Tamoxifen (TAM), das in der Behandlung des hormonabhängigen Mammakarzinoms eingesetzt wird, ist ein Prodrug, das durch Hydroxylierung in 4-Position des A-Rings zum 4-Hydroxytamoxifen (4-OHT) aktiviert wird. Dieses besitzt einen 8-fach höheren RBA-Wert als TAM und ist ein reines Antiestrogen an hormonabhängigen Brustkrebszellen, dessen Wirkung durch die Dimethylaminoethoxy-Seitenkette in 4-Position des B-Rings vermittelt wird. Da eine Reihe O-acylierter Triarylalkenderivate jedoch eine schwache aber signifikante antagonistische Wirkung auch ohne eine basische Seitenkette aufwies, war ein Ziel dieser Arbeit die Notwendigkeit einer solchen Seitenkette für die antagonistische Wirkung auf molekularer Ebene zu untersuchen. Hierzu wurden 1,1-Bis(4-hydroxyphenyl)-2-phenylalkene (BisOHR), 1,1,2-Tris(4-hydroxyphenyl)alkene (TrisOHR), 1-(3-Fluor-4-hydroxyphenyl)-1,2-bis(4-hydroxyphenyl)alkene (FTrisOHR) und deren O-Methylether mit unterschiedlich langen C2-Alkylseitenketten synthetisiert. Von BisOHPr und TrisOHPr und deren O-Methylethern wurden Derivate mit unterschiedlich substituierter C2-Propylseitenkette dargestellt. Von allen Verbindungen wurden die Affinität zum ER, die agonistische und antagonistische Wirkung an der hormonabhängigen MCF-7-2a-Zelllinie sowie die Proliferationshemmung an in vitro Testmodellen untersucht. Die Rezeptoraffinität und die antagonistische Wirkung zeigten eine eindeutige Abhängigkeit von der Art und Länge der Seitenkette an C2. Die erfolgreichsten Verbindungen waren BisOHEt, TrisOHEt sowie FTrisOHBu, die eine 4-OHT vergleichbare antagonistische Wirkung auf molekularer Ebene zeigten. Aufgrund der fehlenden Seitenkette kann diese Wirkung nicht nach dem für 4-OHT vorgeschlagenen Mechanismus vermittelt werden. Ein möglicher Wirkmechanismus ist der kürzlich für ein Tetrahydrochrysenderivat vorgeschlagene „ passive " Antagonismus. Die antiproliferative Wirkung konnte nicht mit der Länge der Seitenkette korreliert werden. Die erfolgreichsten antiproliferativen Verbindungen waren BisOMePrNH2 und TrisOMePrNH2, die sogar eine zytozide Wirkung an MCF-7-Zellen aufwiesen. Ferner wurden Voruntersuchungen zur Fluoreszenzmarkierung von ER-Liganden durchgeführt. Die Konjugation eines Triarylalkens mit einem Fluoreszenzfarbstoff erschien als besonders geeignete Methode, da die Molekülgeometrie des Triarylalkens auf diese Weise nicht beeinflusst wird. Im Hinblick auf eine potentielle Anwendung in der Fluoreszenzkorrelationsspektroskopie (FKS) wurde Rhodamin B als Fluoreszenzfarbstoff eingesetzt. Dieser wurde über einen Hexylspacer mit den Triarylalkenen verbunden. Die resultierenden fluoreszenzmarkierten Triarylalkene 27 und 33Z erwiesen sich jedoch aufgrund ihrer geringen Rezeptoraffinität und ihrer Fluoreszenzcharakteristika nicht als geeignet für den Einsatz in der FKS.
Tamoxifen (TAM) is widely used in the treatment of hormone dependent breast cancer. TAM itself acts as prodrug, which is activated by hydroxylation of the 4-position of the A-ring. The resulting 4-hydroxytamoxifen (4-OHT) possesses an 8 times higher binding affinity to the estrogen receptor (ER) and acts as pure anti-estrogen in hormone dependent tumor cells. The dimethylaminoethoxy side chain in 4-position of the B-ring seems to be crucial for the anti- estrogenic activity. As it could be previously shown a series of O-acyl triarylalkene derivatives possessed weak but significant antagonistic effects, without bearing a basic side chain. Therefore in this work the necessicity of a basic side chain for the antagonistic effects of triarylalkenes was examined on molecular level. According to this 1,1-Bis(4-hydroxyphenyl)-2-phenylalkenes (BisOHR), 1,1,2-Tris(4-hydroxyphenyl)alkenes (TrisOHR), 1-(3-Fluor-4-hydroxyphenyl)-1,2-bis(4-hydroxyphenyl)alkenes (FTrisOHR) and the corresponding O-methylethers with different C2-alkyl side chains were synthesized. Additionally BisOHPr and TrisOHPr derivatives with different functional groups at the alkyl side chain were synthesized. Receptor binding affinity, agonistic and antagonistic properties on the MCF-7-2a hormone dependent breast cancer cell line and the cytotoxic properties were examined. Receptor binding affinity and antagonistic properties were influenced by the length and the functional groups at the end of the side chain at C2. The most active compounds BisOHEt, TrisOHEt and FTrisOHBu possessed similar antagonistic properties on molecular level as 4-OHT. These strong antagonistic effects cannot be mediated by the mode of action that is known for 4-OHT, as the examined compounds do not bear a basic side chain. It might rather be assumed that the antagonistic properties are exerted by a mode of action termed " passive " antagonism which was proposed recently for a tetrahydrochrysene derivative. The cytotoxic properties could not be correlated with the length of the C2-alkyl side chain. The most active compounds were the O-methylated amines BisOMePrNH2 and TrisOMePrNH2 which showed even cytocidal effects on MCF-7 cells. Furthermore investigations on the fluorescence labelling of ER-ligands were carried out. To achieve this goal conjugation of a triarylalkene with a fluorescent probe seemed the most suitable method. Two positions of the triarylalkene scaffold were chosen for conjugation by overlay with E2. Regarding an application of the conjugates in fluorescence correlation spectroscopy the triarylalkenes were connected with rhodamine b by means of a hexyl spacer. The resulting compounds 27 and 33Z still require optimisation according to ER-affinity and fluorescence characteristics in view of their future application.
