Severe mental and behavioral disorders are common, affecting 1-3% of the world populace. They thus constitute a major burden not only for the affected families but also for society. There is reason to believe that autosomal recessive mental retardation (ARMR) is more common than X-linked MR, but it has so far received considerably less attention. This is partly due to small family sizes and low consanguinity rates in industrialized societies, both of which have hampered gene mapping and identification, which is illustrated by the fact that until 2003, when this study was started, no more than one gene was shown to be implicated in non-syndromic ARMR (NS-ARMR). The work presented here is part of a larger project to shed more light on the molecular causes of ARMR as a prerequisite for diagnosis, counselling and therapy, focusing on large consanguineous Iranian families with several mentally retarded children. It combines clinical and molecular approaches such as patient recruitment, clinical characterization, sample collection, SNP array genotyping, whole genome linkage analysis, homozygosity mapping and finally mutation screening in a systematic fashion. Successful mutation detection is followed by functional analyses of the affected genes. In the study presented here, the investigation of 135 families led to the identification of 31 novel genomic loci for ARMR. Contrary to previous observations, which prima facie argued against the existence of frequently mutated genes, overlapping autozygosity regions from several families could now be observed on chromosomes 1, 5 and 19. At each of these loci a minimum of two overlapping linkage intervals were solitary in the respective families and showed a LOD score of, or above, three. Mutation screening in one of these families with NS-ARMR has led to the discovery of a new gene for NS-ARMR, TUSC3, where a mutation was found that leads to the loss of TUSC3 transcript in patient cells. Additional investigations in families with syndromic forms of ARMR revealed a new gene for ataxia and mild mental retardation. This gene, CA8, was found to carry a R237Q mutation, with a putatively deleterious effect on functional properties of the gene product in the affected patients. Furthermore one novel mutation in ALDH3A2 in patients with Sjögren-Larsson syndrome and two in the MCPH1 gene in patients with primary microcephaly were found. Gene expression profiling, knockdown experiments and irradiation studies added more evidence on the involvement of MCPH1 in cell cycle control, DNA damage response and transcriptional regulation. In summary, the identification of a novel gene for NS-ARMR and many new genomic intervals with a high probability for containing different genes with disease causing mutations is in keeping with previous results that indicated a high degree of genetic heterogeneity for this disorder. Still, the several overlapping loci found in this study now also indicate the presence of genes with an increased frequency of mutations in ARMR patients. Further studies are necessary to identify the disease causing mutations in these newly identified linkage intervals and to determine the contribution of the affected genes to the complex processes of human cognition. These studies will be greatly facilitated by the novel high throughput sequencing technologies, which are now available and that will allow a much increased pace for the detection of disease causing mutations.
Schwere kognitive Erkrankungen und Verhaltensstörungen betreffen ca. 1-3% der Weltbevölkerung und stellen damit eine erhebliche Belastung für die betroffenen Familien, aber auch die Gesellschaft als Ganzes dar. Es gibt Gründe die dafür sprechen, dass autosomal rezessive Formen mentaler Retardierung (ARMR) häufiger auftreten als X-chromosomal vererbte Formen geistiger Behinderung, jedoch bisher weniger Aufmerksamkeit erfahren haben. Dies liegt zum Teil daran, dass in industrialisierten Gesellschaften die dort vorherrschenden kleinen Familien und der geringe Grad an Konsanguinität in der Bevölkerung die Genkartierung behindert haben. Veranschaulicht wird dieser Sachverhalt durch die Tatsache, dass zu Beginn dieser Studie im Jahr 2003 nur ein Gen für nicht-syndromale mentale Retardierung (NS-ARMR) bekannt war. Die hier vorgestellte Arbeit ist Teil eines größer angelegten Projekts zur Aufklärung der molekularen Ursachen geistiger Behinderung in konsanguinen iranischen Großfamilien mit mehreren mental retardierten Kindern, um damit die Voraussetzungen für Diagnose, Beratung und Therapie zu verbessern. Diese Studie verbindet klinische und molekulargenetische Untersuchungsmethoden wie Patientenrekrutierung, klinische Charakterisierung, Probensammlung, SNP-array Genotypisierung, genomweite Kopplungsanalyse, Homozygotiekartierung und Mutationsanalyse auf systematische Art und Weise. Auf erfolgreiche Mutationsanalysen folgen schließlich Untersuchungen zur Funktion betroffener Gene. In der hier vorgestellten Arbeit führte die Untersuchung von 135 Familien zur Identifizierung von 31 neuen Loci für ARMR. Im Gegensatz zu früheren Beobachtungen, welche zunächst gegen die Existenz häufig mutierter Gene sprachen, wurden nun überlappende autozygote Bereiche von mehren Familien auf den Chromosomen 1, 5 und 19 gefunden. An jedem dieser Loci waren mindestens zwei der überlappenden Intervalle die einzigen in den jeweiligen Familien und zeigten einen LOD Score von drei oder höher. Die Mutationsanalyse in einer dieser Familien mit NS-ARMR führte zur Entdeckung eines neuen Gens für NS-ARMR, TUSC3, in welchem eine Mutation gefunden wurde, die den Verlust des zugehörigen Transkripts in Patientenzellen zur Folge hat. Weitere Untersuchungen von Familien mit syndromalen Fromen mentaler Retardierung brachten ein neues Gen für Ataxie mit milder geistiger Behinderung zu Tage. In diesem Gen, CA8, tragen die betroffenen Patienten eine R237Q Mutation mit mutmaßlich stark einschränkenden Auswirkungen auf die Funktion des Genprodukts. Des Weiteren wurde eine neue Muation im ALDH3A2 Gen von Patienten mit Sjögren-Larsson Syndrom, sowie zwei bisher unbekannte Mutationen im MCPH1 Gen von Patienten mit primärer Mikrozephalie gefunden. Genomweite Genexpressionsuntersuchungen, Knockdown- Experimente und Bestrahlungsversuche lieferten neue Erkenntnisse über die Beteiligung von MCPH1 an der Zellzykluskontrolle, bei zellulären DNA-Reparatursystemen und Transkriptionsregulation. Zusammenfassend kann gesagt werden, dass die Identifizierung eines neuen Gens für NS-ARMR und vieler neuer Kopplungsintervalle, welche mit einer hohen Wahrscheinlichkeit unterschiedliche Gene mit Krankheitsverursachenden Mutationen enthalten, mit vorangegangenen Ergebnissen, welche ein Hohes Maß an Heterogenität für ARMR nahe legen, übereinstimmen. Andererseits jedoch deuten die hier beschriebenen überlappenden Loci nun auch auf das Vorhandensein von Genen hin, welche bei ARMR-Patienten häufiger von Mutationen betroffen sind. Weitere Untersuchungen sind erforderlich, um die krankheitsverursachenden Mutationen in diesen neu identifizierten Kopplungsintervallen zu finden, und den Beitrag der betroffenen Gene zu den komplexen kognitiven Vorgängen im menschlichen Gehirn zu verstehen. Diese Studien werden durch die inzwischen zugänglichen neuen Hochdurchsatz-Sequenziertechnologien stark erleichtert, die es ermöglichen Mutationen erheblich schneller aufzuspüren als bisher.
