dc.contributor.author
Abou-Chaker, Khalil
dc.date.accessioned
2018-06-07T22:20:47Z
dc.date.available
2011-09-08T07:49:13.507Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/9157
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-13356
dc.description.abstract
Die Agglutinationstechnik stellt seit mehr als 100 Jahren die einfachste und
schnellste Methode zum Nachweis zellulärer Antigene und Antikörper dar. Die
Anwendung und Weiterentwicklung dieser Technik hat sich bisher nur in der
Erythrozyten-Serologie bewährt. Das Ziel der vorliegenden Arbeit ist es daher,
klinisch relevante Polymorphismen mittels einfacher Agglutinationstests zu
erfassen. Durch die Verwendung braun gefärbter, paramagnetischer Partikel
wurde der primär für die Erythrozyten-Serologie konzipierte und etablierte
Gelzentrifugationstest zur Bestimmung thrombozytärer und leukozytärer
Polymorphismen weiterentwickelt. Es ist uns gelungen, die aus der Polymerase-
Ketten-Reaktion (PCR) resultierenden PCR-Produkte von humanen Plättchen- (HPA)
und humanen Leukozyten-Antigenen (HLA) in neuen Partikel-Gel-Agglutinations-
Assays (PaGIA) nachzuweisen. Es wurden 1 400 HPA- und 1 564 HLA-Proben
untersucht. Die Ergebnisse des neuen PaGIA zeigten im Vergleich zur PCR-SSP
(PCR-Sequence-specific-primer) bzw. konventionellen Gelelektrophorese eine
hundertprozentige Übereinstimmung. Neben der Anwenderfreundlichkeit und der
Zeitersparnis hat die Darstellung von PCR-Amplifikationen mithilfe gefärbter
Partikel im PaGIA gegenüber der Gelelektrophorese den Vorteil, dass hier ohne
kanzerogene Agenzien wie Ethidiumbromid gearbeitet werden kann. In einer
weiteren Anwendung zur Phänotypisierung des granulozytären Antigens HNA-1a von
Blutspendern (n=147) mit paramagnetischen Partikeln zeigten die Ergebnisse
ebenfalls eine hundertprozentige Korrelation mit den molekularbiologischen
Untersuchungen in der PCR. Die Ergebnisse dieser Arbeit verdeutlichen das
Potential der PaGIA für die Routinediagnostik, die sich durch die hohe
Sensitivität und Spezifität sowie in Rentabilität und Schnelligkeit
auszeichnet.
de
dc.description.abstract
The agglutination technique has presented the simplest and fastest method of
providing evidence of cellular antigens and antibodies for more than 100
years. The use and further development of this technique has so far only stood
the test in the erythrocyte serology. The aim of the present paper is
therefore to record polymorphisms using simple agglutination tests. Using
brown coloured, paramagnetic particles, the gel centrifugation test, primarily
designed and established for the erythrocyte serology, was further developed
to determine thrombocytic and leukocytic polymorphisms. The PCR products of
human platelet antigens (HPA) and human leukocyte antigens (HLA) resulting
from the polymerase chain reaction were able to be demonstrated in new
particle gel agglutination assays (PaGIA). 1,400 HPA and 1,564 HLA samples
were analysed. The results of the new PaGIA showed a one hundred percent
correlation in comparison to the PCR-SSP (PCR sequence-specific primer) or
conventional gel electrophoresis. In addition to the user-friendliness and
time-savings, the illustration of the PCR amplifications using coloured
particles in the PaGIA in comparison to gel electrophoresis has the advantage
that this method does not require carcinogenic agents such as ethidium
bromide. In a further use to phenotype the granulocytic antigens HNA-1a of
blood donors (n=147) with paramagnetic particles, the results also showed a
one hundred percent correlation with the molecular-biological tests in the
PCR. The results of this paper illustrate the potential of the PaGIA for
routine diagnostics which are characterised by high sensitivity and
specificity as well as profitability and speed.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
Particle gel agglutination assay
dc.subject
single nucleotide polymorphism
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Entwicklung eines Partikel-Gel-Agglutinationstests zum Nachweis von
Einzelnukleotidpolymorphismen und zur Phänotypisierung granulozytärer Antigene
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. med. A. Salama
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. U. Pison, Prof. Dr. med. G. Bein
dc.date.accepted
2011-09-09
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000024638-0
dc.title.translated
Development of a particle gel agglutination test for detection of single
nucleotide polymorphism and for phenotyping granulocytic antigens
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000024638
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000012122
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access