dc.contributor.author
Schefe, Jan Hendrik
dc.date.accessioned
2018-06-07T21:43:17Z
dc.date.available
2009-07-31T12:06:00.932Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/8318
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-12517
dc.description.abstract
Eine der jüngsten Entdeckungen innerhalb des Renin-Angiotensin-Systems (RAS)
stellt der Renin/Prorenin-Rezeptor (RER) dar. An diesem Rezeptor wirken Renin
und Prorenin als Liganden, wobei ihre enzymatische Aktivität im Sinne einer
Prozessierung von Angiotensinogen zu Angiotensin I um ein Mehrfaches ansteigt.
Darüber hinaus initiieren diese Liganden eine Signaltransduktionskaskade,
deren Erforschung Gegenstand dieser Arbeit war. Mittels yeast two-hybrid
screening wurde der Transkriptionsfaktor promyelocytic zinc finger protein
(PLZF) als direkter Interaktionspartner des RER identifiziert und mittels
Koimmunpräzipitation bestätigt. Eine Homodimerisierung des RER konnte
ebenfalls nachgewiesen werden. Nach Aktivierung des RER mit Renin transloziert
PLZF in den Nukleus, um dort die Transkription des RER selbst zu reprimieren,
bzw. die Transkription von PI3K-p85a zu aktivieren. Diese Effekte waren durch
siRNA gegen den RER aufhebbar. Site-directed mutagenesis von
Promotorkonstrukten sowie electrophoretic mobility shift-assay (EMSA) konnten
ein PLZF-cis-Element innerhalb des RER-Promotors nachweisen. Chromatin-
Immunpräzipitations-Experimente wiesen eine 6-fach gesteigerte Rekrutierung
von PLZF auf diesen Promotorabschnitt unter Renin-Stimulation nach. Renin-
Stimulation verursachte ebenfalls eine Zunahme der Zellzahl sowie eine Abnahme
der Apoptose, wobei diese Effekte durch PI3K-Inhibition partiell und durch
siRNA gegen PLZF vollständig aufgehoben werden konnten. mRNA-
Expressionsuntersuchungen von RER und PI3K-p85a in Geweben von PLZF-knockout-
Mäusen bestätigten die Signifikanz von PLZF als übergeordneten Regulator der
Transkription dieser beiden Gene. Zusammenfassend konnte hiermit erstmalig
eine Signaltransduktionskaskade des RER beschrieben und charakterisiert
werden.
de
dc.description.abstract
One of the most recent discoveries within the RAS is the renin/prorenin
receptor (RER). Receptor binding of the ligands renin and prorenin increases
their enzymatic activity in terms of the generation of angiotensin I and also
induces an intracellular signal transduction cascade. Via yeast two-hybrid
screening, the transcription factor promyelocytic zinc finger protein (PLZF)
has been identified as direct interaction partner of the RER which has been
confirmed by co-immunoprecipitation. A homodimerization of the RER has also
been demonstrated. Upon activation of the RER with renin, PLZF translocates
into the nucleus and reduces the transcription of the RER or increases the
transcription of PI3K-p85a. These effects were abolished by siRNA against the
RER. Site-directed mutagenesis of promoter constructs as well as
electrophoretic shift-assays (EMSA) identified a PLZF cis-element within the
RER promoter. Chromatin-immunoprecipitation experiments demonstrated a 6-fold
increased recruitment of PLZF to this promoter area upon stimulation by renin.
Renin stimulation also induced an increase in cell number and a decrease of
apoptotic activity. These effects were partly abolished by PI3K inhibition and
completely abolished by siRNA against PLZF. The expression analysis of RER and
PI3K-p85a in tissues of PLZF-knockout mice confirmed the role of PLZF as
upstream regulator of these two genes. To conclude, this work demonstrates and
characterizes for the first time the existence of a signal transduction
cascade that involves the RER.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
renin-angiotensin system
dc.subject
(pro)renin receptor
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Molekularbiologische Identifizierung und Charakterisierung des
Transkriptionsfaktors promyelocytic zinc finger protein als direkten Protein-
Interaktionspartner des Renin/Prorenin-Rezeptors
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. med. Thomas Unger
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. rer. nat. Monika Stoll
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. rer. nat. A. H. Jan Danser
dc.date.accepted
2009-01-30
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000005806-8
dc.title.translated
Molecular biological identification and characterization of the transcription
factor promyelocytic zinc finger protein as direct protein interaction partner
of the renin/prorenin receptor
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000005806
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000004569
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access