dc.contributor.author
Bochert, Kai
dc.date.accessioned
2018-06-07T20:34:15Z
dc.date.available
2009-05-04T10:57:44.861Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/6953
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-11152
dc.description.abstract
Ziel der vorliegenden Arbeit war die Synthese und pharmakologische Testung
antagonistisch am P2X7-Rezeptor wirksamer Verbindungen mit
4,5-Diaryl-2-imidazolinstruktur. Diese wurden durch Zyklisierung von
1,2-Diamino-1,2-diarylethanen, die ebenfalls im Rahmen dieser Arbeit
hergestellt wurden, synthetisiert. Zu diesem Zweck wurden Iminoester
eingesetzt. Zur Synthese zyklisch substituierter
Diaryltetrahydropyrroloimidazole und Diarylhexahydroimidazopyridine fanden
Chloralkyliminoester Verwendung. Zur Strukturvariation wurden u.a.
verschiedene Substituenten in die Aromaten in 4- und 5-Position des
Imidazolins eingeführt, die Substituenten in 2-Position des Imidazolins
verändert sowie durch Methylierung
4,5-Diaryl-1-methyl-2-phenethyl-2-imidazoline hergestellt. Die zytotoxischen
Eigenschaften der Verbindungen wurden an MDA-MB 231 Zellen untersucht. Die
potenteste Verbindung weist einen IC50-Wert von 1.57 µM auf. Als wichtigster
Parameter für zytotoxische Aktivität konnte die Lipophilie der Verbindungen
ausgemacht werden. Für die Untersuchungen am P2X7-Rezeptor musste zunächst ein
Testsystem etabliert werden. Dies geschah im Rahmen dieser Arbeit durch
Verwendung stabil mit dem Ratten-P2X7-Rezeptor transfizierter Zellen der
Zelllinie HEK 293. Nach Inkubation mit den zu testenden Verbindungen und
anschließender Stimulation durch den natürlichen Agonisten ATP kann die
Zellaufnahme des ebenfalls zugefügten Fluoreszenzfarbstoffes Ethidiumbromid
mit dem Grad der Aktivierung des P2X7-Rezeptors gleichgesetzt werden. Diese
Zellaufnahme kann fluorimetrisch durch die intrazelluläre Konzentration des
Farbstoffes bestimmt werden, da die Fluoreszenz lediglich nach Interkalation
des Ethidiumbromids in Nukleinsäuren erfolgt. Aus der verringerten Aufnahme
des Farbstoffes lässt sich anschließend die antagonistische Aktivität der
jeweiligen Substanzen ermitteln. Für die potenteste Verbindung konnte ein
IC50-Wert von 0.07 µM (70 nM) ermittelt werden. Sterische Eigenschaften sowie
Substituenten geringer Lipophilie konnten als wesentliche Merkmale für
inhibitorische Wirkung am P2X7-Rezeptor ermittelt werden. Insbesondere durch
die gleichzeitige Eliminierung der zytotoxischen Aktivität der potentesten
Verbindungen im eingesetzten Testsystem bilden die im Rahmen dieser Arbeit
synthetisierten und pharmakologisch untersuchten Verbindungen einen geeigneten
Ausgangspunkt für die Entwicklung und Untersuchung weiterer Substanzen mit
inhibitorischem Einfluss auf Schmerz- und Entzündungsprozesse.
de
dc.description.abstract
This thesis deals with the synthesis of compounds bearing a
4,5-diaryl-2-imidazoline structure, the evaluation of their antagonistic
effects on P2X7-receptors as well as their cytotoxicity against MDA-MB 231
cells. The synthesized compounds were prepared by cyclization of
1,2-diamino-1,2-diarylethanes by using iminoethers. For the synthesis of
cyclic substituted diaryltetrahydropyrroloimidazoles and
diarylhexahydroimidazopyridines chloralkyl-iminoethers were used. Amongst
others, the compounds were modified by introducing various substituents to the
aryl residues located at position 4 and 5 of the imidazoline, by varying
moieties in position 2 as well as by methylation of the imidazoline. The
cytotoxicity of the substances was tested against MDA-MB 231 cells. The most
potent compound had an IC50 of 1.57 µM. The lipophilic properties of the
compounds were determined as the most important parameter. For the
determination of the P2X7 inhibitory activity an assay had to be established.
It has been achieved while using HEK 293 cells stably transfected with the rat
P2X7 receptor. After incubation with the test compounds and subsequent
stimulation with the agonist ATP, the uptake of the simultaneously added
fluorescence dye ethidium bromide was fluorimetrically determined.
Fluorescence only occurs after DNA intercalation of ethidium bromide and is
proportional to the degree of activation of the P2X7 receptor. The
antagonistic activity of the substances was quantified by the reduced uptake
of the dye. The most potent compound had an IC50 of 0.07 µM (70 nM). Steric as
well as hydrophilic properties of the substituents are considered as
substantial criteria for inhibitory activity on P2X7 receptors. Especially
because of the entire loss of cytotoxicity, the obtained results regarding the
effects of 4,5-diaryl-2-imidazolines can be used as basis for the design of
further potent compounds with inhibitory effects on pain and inflammatory
processes.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::540 Chemie
dc.title
4,5-Diaryl-2-imidazoline als P2X7-Rezeptorantagonisten
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. R. Gust
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. R. Stahlmann
dc.date.accepted
2009-04-28
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000009856-4
dc.title.subtitle
Synthese, pharmakologische und biochemische Untersuchungen
dc.title.translated
4,5-diarylimidazoline derivatives as P2X7 receptor antagonists
en
refubium.affiliation
Biologie, Chemie, Pharmazie
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000009856
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000005556
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open access