Die aktuelle Empfehlung bei metastasiertem kolorektalem Karzinom (mCRC) mit RAS/ BRAF Wildtyp (wt) besteht in der Gabe einer Chemotherapie-Doublette mit einem Antikörper gegen den epidermalen Wachstumsfaktor-Rezeptor (EGFR) wie Cetuximab. Hierunter ist das progressionsfreie Überleben (PFS) mit ca. zehn bis zwölf Monaten weiterhin nicht zufriedenstellend. Zur Umgehung von Resistenzmechanismen und Verbesserung des Therapieansprechens werden alternative Therapiekombinationen erprobt. Checkpointinhibierende Antikörper gegen die programmierter Zelltod-Protein-1 (PD-1)/ programmierter Zelltod-Ligand-1 (PD-L1)-Achse verbessern die Therapiemöglichkeiten vieler Indikationen grundlegend. Eine gegenseitige Verstärkung durch immunologische Wechselwirkungen von dem gegen PD-L1 gerichteten Avelumab und dem gegen den EGFR gerichteten Cetuximab wird angenommen. Daher wird diese Kombination mit einer Chemotherapie aus 5-Fluorouracil, Folinsäure und Irinotecan (FOLFIRI) in der FIRE-6-Studie als Erstlinientherapie bei Patient*innen mit mCRC erprobt. Ziel der Arbeit ist die Charakterisierung des Immunsystems unter der Studientherapie, insbesondere der Effekte der Therapieregime und deren Zusammenhang mit der vorläufigen Therapieansprache. Auch Hinweise auf stattgehabte antikörperabhängige zellvermittelte Zytotoxizität (ADCC) werden untersucht. Dazu wurde eine longitudinale Immunüberwachung der 45 Patient*innen über vier Zeitpunkte mittels durchflusszytometrischer Messungen durchgeführt. Im gesamten Therapieverlauf konnte eine verstärkte Expression von Aktivierungsmarkern auf CD4+ und CD8+ T-Zellen sowie natürlichen Killer- (NK-) Zellen detektiert werden. Eine Aktivierung der regulatorischen T-Zellen (Tregs) wurde unter der Hinzunahme von Avelumab beobachtet. Die Expression von Checkpointmolekülen auf peripheren CD4+ und CD8+ T-Zellen zeigte sich als ein Hinweis auf Aktivierung. Die Verschiebung von klassischen Monozyten (cMonos) hin zu mehr nicht-klassischen Monozyten (ncMonos) nach der Hinzunahme von Avelumab weist auf die chronische Inflammation unter der Therapie hin und könnte eine stattgehabte ADCC suggerieren. Mit einem besseren besten Ansprechen (BOR) im Therapieverlauf verbunden waren ein Anstieg von Lymphozyten, T-Zellen, CD4+ und CD8+ T-Zellen sowie die verstärkte Expression von Checkpointmolekülen als Aktivierungsmarker auf CD4+ und CD8+ T-Zellen. Bei CD4+ T-Zellen zeigte sich dies insbesondere unter der Therapie mit FOLFIRI und Cetuximab, bei CD8+ T-Zellen eher bei der Hinzunahme von Avelumab. Dagegen ist ein Abfall von Tregs und stabil 10 regulierenden Helios+ Tregs während des gesamten Therapieverlaufs prognostisch negativ. Auch der starke Abfall von NK-Zellen und aktivierten NK-Zellen unter FOLFIRI und Cetuximab mit ihrer Funktion der Tumorzelllyse war prognostisch ungünstig. Die postulierten Wirkmechanismen und das Potenzial der Therapiekombination wurden in dieser Arbeit untermauert, was den Stellenwert der aufgeführten Analysen hervorhebt.
For metastasised colorectal cancer (mCRC) with RAS/ BRAF wild type (wt), latest guidelines recommend a chemotherapeutic doublet with an antibody directed against the epidermal growth factor receptor (EGFR), like cetuximab. Under this treatment, the progression free survival (PFS) of about 10 months is still not satisfying. To overcome resistance mechanisms and improve the response to treatment, other therapeutic combinations are being investigated. Checkpoint inhibiting antibodies against the signalling axis of programmed cell death protein-1 (PD-1)/ programmed death ligand-1 (PD-L1) fundamentally improve therapeutic options for many indications. It is anticipated that avelumab, which is directed against PD-L1, and cetuximab augment their efficacy mutually due to immunologic mechanisms. Therefore, this combination is investigated with a chemotherapy consisting of 5-fluorouracil, folinic acid and irinotecan in the FIRE-6 trial as first-line therapy for patients with mCRC. The objective of this work is the characterisation of the immune system during the trial therapy with particular emphasis to effects of the different stages of therapy and their association to preliminary therapy response. Also, indication of antibody dependent cell-mediated cytotoxicity (ADCC) is investigated. This was pursued by monitoring the immune system of 45 patients longitudinally for four specific dates using flow cytometry. In the course of the complete therapy, an increased expression of markers of activation on CD4+ and CD8+ T cells as well as natural killer (NK) cells was detected. An activation of regulatory T cells (Tregs) was observed after adding avelumab. The expression of checkpoint molecules on peripheral CD4+ and CD8+ T cells gives evidence for the immune activation. Classical monocytes (cMonos) shifting towards non-classical monocytes (ncMonos) after adding avelumab exhibits a chronic inflammation due to the trial therapy and might suggest occurred ADCC. An augmentation of lymphocytes, T cells, CD4+ and CD8+ T cells and the increased expression of checkpoint molecules as markers of activation on CD4+ and CD8+ T cells related to a better best overall response (BOR). For CD4+ T cells, this occurred while administrating FOLFIRI and cetuximab, for CD8+ T cells rather when combining it with avelumab. On the other hand, a reduction of Tregs and stable regulating Helios+ Tregs during all points of therapy indicated a negative prognosis. Likewise, a severe decrease of NK cells and activated NK cells with their function of tumour cell lysis while administrating FOLFIRI and cetuximab was identified to be prognostically negative. 12 The postulated mode of action and the potential of the combination therapy of the trial could be undergirded with this thesis, emphasising the significance of the shown analyses.
