HERVs sind Sequenzen von exogenen Retroviren, die vertikal über die Keimbahnzellen vererbt werden. In gesunden Zellen wird die Expression epi-genetisch kontrolliert. Unter bestimmten pathophysiologischen Bedingungen (Tumore und Autoimmunerkrankungen) kann jedoch eine Reaktivierung er-folgen. In diesem Fall werden virale Partikel gebildet, sodass eine de novo Infektion oder eine Retrotransposition möglich sind. Im Zuge der Arbeit wurden deshalb diverse Restriktionsverfahren analysiert. Zunächst wurde der inhibitorische Effekt der verschiedenen zellulären Rest-riktionsfaktoren (APOBEC 3G und PYHIN-Proteine) auf die HERV-K(HML-2)-Partikelproduktion untersucht. Die erhaltenen Ergebnisse belegen, dass die nukleären PYHIN Proteine MNDA und IFIX, ebenso wie IFI16, die HERV-K(HML-2)-Partikelproduktion signifikant reduzieren. Darüber hinaus wurde im Rahmen der Arbeit nachgewiesen, dass durch die Expression von HERV-K(HML-2) eine Stressreaktion mit einhergehender Ausbildung einer Stressgranula erfolgt. Durch die Ausbildung der Stressgra-nula wird die zelluläre Proteinexpression herunter reguliert und somit auch die virale Proteinsynthese beeinflusst. Die gewonnenen Daten belegen, dass im Gegensatz zu HIV-1, HERV-K(HML-2) dies nicht unterbinden kann. In einem weiteren Teil der Arbeit wurde untersucht, welche antiretroviralen HIV-1-Medikamente die HERV-K(HML-2)-Infektion und die Bildung von reifen viralen Partikeln inhibieren können. Dafür wurden VSV-G-pseudotypisierte infektiöse HIV-1- und HERV-K(HML-2)-Viren mit einem GFP-Reporter her-gestellt und humane Zelllinien in der Anwesenheit von verschiedenen Inhi-bitorkonzentrationen (NRTI, NtRTI, NNRTI & Integraseinhibitoren) infiziert. Die Proteaseinhibitoren wurden während der Herstellung der Viren hinzuge-geben. Es konnten nukleosidische und nukleotidische reverse Transkriptas-einhibitoren sowie Integraseinhibitoren mit hoher Aktivität gegenüber HERV-K(HML-2) identifiziert werden. Alle getesteten NNRTIs und Proteaseinhibito-ren zeigten keine Aktivität gegen HERV-K(HML-2).
HERVs are sequences of originally exogenous retroviruses that are vertically transmitted upon integration in a germ line cell. In healthy tissues the ex-pression of HERVs is epigenetically controlled. However, under some patho-pysiolocial condition (cancer and autoimmune diseases) a reactivation of human endogenous retrovirus can occurre. In this context a production of viral particles can happen, so that de novo infection or retrotransposition events are possible. Due to this fact several restriction-modes were analysed. First of all, the in-hibitory effect of different cellular antiviral factors including APOBEC 3G and PYHIN proteins (AIM2, MNDA, IFIX) on the HERV-K(HML-2) particle produc-tion were tested. The results obtained demonstrate that the nuclear PYHIN proteins MNDA and IFIX as well as IFI16 reduced significantly the HERV-K(HML-2) particle production. Furthermore, it is proven in this thesis, that the intracellular expression of HERV-K(HML-2) induced a stress reaction with a progession to stress gran-ule formation. The stress granules reduced the intracellular protein expres-sion and this has also an effect on the viral protein synthesis. In contrast to HIV-1, HERV-K(HML-2) not only induces stress granules, but it is also not able to prevent stress granule formation induced by other means. In a next part of this thesis, it has been analyzed which of the antiretroviral HIV-1-drugs can inhibit the HERV-K(HML-2)-infection and formation of ma-ture particles. Therefore VSV-G pseudotyped infectious HERV-K(HML-2)- and HIV-1-viral particle with a GFP-reporter were produced and human cell lines were infected in the presence of varying inhibitor concentrations (NRTIs, NtRTI, NNRTIs or integrase inhibitors). The protease inhibitors were already added at the viral particle production step. NRTIs, NtRTIs and inte-grase inhibitors with a high activity against HERV-K(HML-2) were identified. All tested NNRTIs and protease inhibitors are non-functional against HERV-K(HML-2).
