Hintergrund: Organtransplantierte Patienten benötigen regelhaft eine immunsuppressive Dauertherapie. Es zeigte sich jedoch, dass einige Patienten im Langzeitverlauf nach Lebertransplantation auch komplett auf diese verzichten können, ohne dass es zu Abstoßungsreaktionen kommt. Bisher existieren keine hinreichend validierten Biomarker zur Identifizierung dieser „operational toleranten“ Patienten. Epigenetische Modifikationen der „Treg-specific demethylated region“ (TSDR) im Foxp3-Genlocus von CD4+ T-Zellen stellten sich in anderen Arbeiten als vielversprechend heraus. Ziel dieser Arbeit war es, charakteristische Besonderheiten operational toleranter Patienten zu identifizieren und zudem Hinweisen nachzugehen, dass ein komplettes Absetzen der Immunsuppression durch subklinische Entzündungsprozesse den Zustand des Transplantats beeinträchtigen kann.
Methodik: Die vorliegende Arbeit untersuchte innerhalb der Berliner Kohorte operational tolerante Patienten (TOL) im Vergleich zu Patienten mit stabiler Transplantatfunktion unter immunsuppressiver Therapie einer minimalen Dosierung (MIN), einer Standard-Dosierung (ST) und einer hohen Dosierung (HD) sowie zu nicht toleranten Patienten, die eine späte Rejektion zeigten (REJ). Alle Patienten erhielten eine orthotope post mortem Lebertransplantation vor mindestens fünf Jahren. Es erfolgte die Erhebung allgemeiner klinischer, histologischer, sonografischer und laborchemischer Parameter sowie die experimentelle Bestimmung der Frequenz an „stabilen“ regulatorischen CD4+ T-Zellen mit demethylierter TSDR als potenzieller Marker im peripheren Blut.
Ergebnisse: Die Studienkohorte umfasste 61 Patienten (8 TOL, 12 MIN, 28 ST, 7 HD, 6 REJ). Die TOL-Gruppe neigte häufiger zur Thrombozytopenie und zeigte im Vergleich zu der ST-Gruppe (191 (63-406) /nl) statistisch signifikant weniger Thrombozyten (134 (43-216) /nl; p = 0,044). Bei der TOL-Gruppe war eine Tendenz zu einer erhöhten Frequenz an CD4+ T-Zellen mit demethylierter TSDR (4,8 (2,9-15,1) %; p = 0,539) erkennbar. Unter allen Patienten zeigten diejenigen der MIN-Gruppe die geringste histologische Inflammationsausprägung (p = 0,039). Außerdem fielen die Patienten der MIN-Gruppe (ASAT: 27 (18-38) U/l, ALAT: 19 (10-33) U/l) und der ST-Gruppe (ASAT: 26 (10-63) U/l, ALAT: 19 (11-70) U/l) durch die geringsten Transaminasenaktivitäten im Serum auf, während die Patienten der TOL-Gruppe höhere ASAT-Werte (35 (23-48) U/l; versus MIN: p = 0,072 bzw. versus ST: p = 0,084) und auch höhere ALAT-Werte (29 (14-50) U/l; versus MIN: p = 0,212 bzw. versus ST: p = 0,388) aufwiesen.
Schlussfolgerung: Die erhobenen Daten der Transaminasenaktivität und histologischen Inflammation deuten darauf hin, dass eine minimale Dosis dem vollständigen Absetzen im Hinblick auf den Transplantatzustand überlegen sein könnte. Um dies endgültig zu belegen, sind weitere Untersuchungen an größeren Kohorten notwendig.
Background: Patients with organ transplants regularly require lifelong immunosuppressive therapy. However, it has been shown that in the long term some liver transplant patients can withdraw their immunosuppression without any rejection. To date, there are no sufficiently validated biomarkers to identify these "operationally tolerant" patients. Epigenetic modifications of the "Treg-specific demethylated region" (TSDR) in the Foxp3 gene locus of CD4+ T cells have proved promising in other studies. The aim of this work was to identify characteristic features that are associated with operational tolerance and to examine if a complete cessation of immunosuppression can impair the condition of the transplant by subclinical inflammatory processes.
Methods: The present study investigated within the Berlin cohort operationally tolerant patients (TOL) in comparison to patients with stable graft function under immunosuppressive therapy of minimal dose (MIN), standard dose (ST), and high dose (HD) as well as to non-tolerant patients showing late rejection (REJ). All patients received orthotopic post mortem liver transplantation at least five years ago. General clinical as well as histological, sonographic and laboratory parameters were assessed and the frequency of "stable" regulatory CD4+ T cells with TSDR-demethylation was determined experimentally as a potential marker in peripheral blood.
Results: The study cohort included 61 patients (8 TOL; 12 MIN; 28 ST; 7 HD; 6 REJ). The TOL group was more prone to thrombocytopenia and showed statistically significant lower platelet counts (134 (43-216) /nl; p = 0.044) compared to the ST group (191 (63-406) /nl). The TOL group presented a tendency towards an increased frequency of CD4+ T cells with demethylated TSDR (4.8 (2.9-15.1) %; p = 0.539). Out of all groups, the MIN group showed the lowest histological inflammation rate (p = 0.039). In addition, patients in the MIN group (ASAT: 27 (18-38) U/l, ALAT: 19 (10-33) U/l) and the ST group (ASAT: 26 (10-63) U/l, ALAT: 19 (11-70) U/l) showed the lowest serum transaminase activity, while patients in the TOL group showed higher ASAT values (35 (23-48) U/l; p = 0.072 versus MIN and p = 0.084 versus ST) and also higher ALAT values (29 (14-50) U/l; p = 0.212 versus MIN and p = 0.388 versus ST).
Conclusion: The data collected suggest that a minimum dose may be superior to complete weaning with respect to the graft status measured by transaminase activity and histological inflammation. However, further studies on larger cohorts are necessary to provide definitive evidence of this.
