Die vorliegende Arbeit beschäftigt sich mit der Analyse von homöopathischen Urtinkturen und Extrakten aus ausgewählten Euphorbiaceen, welche im besonderen Hinblick auf die enthaltenen hautreizenden und tumorpromovierenden Diterpenester von Interesse sind. Die monographische Beschreibung dieser Urtinkturen im Europäischen Arzneibuch macht es notwendig, eine einfach durchzuführende Methode zur Quantifizierung dieser Inhaltsstoffe zu entwickeln, um das von ihnen ausgehende Gefährdungspotenzial einschätzen zu können. Es wurden hierfür Urtinkturen und Extrakte aus den Samen von Croton tiglium L. und Jatropha curcas L. zunächst qualitativ untersucht, um eine genaue Beschreibung von den enthaltenen Phorbolestern vorzunehmen. Mithilfe der UHPLC-MS/MS-Analysen konnten die enthaltenen Inhaltsstoffe identifiziert werden, wobei in der Urtinktur und den Extrakten aus Crotonsamen eine Vielzahl zuvor nicht beschriebener Phorbolesterderivate gefunden wurden. In der Urtinktur sowie den Extrakten aus Jatropha curcas L. konnten die bereits in der Literatur beschriebenen Jatrophafaktoren 1-6 identifiziert werden. Wegen der hohen Anzahl unterschiedlicher Phorbolester in der Croton Urtinktur wurde eine Quantifizierung über die Diterpen-Grundalkohole nach einer Hydrolyse gewählt. Die zunächst durchgeführte enzymatische Spaltung der Ester führte nicht zu zufrieden stellenden Ergebnissen. Die gewählte Methode zur Quantifizierung nach alkalischer Hydrolyse der Phorbolester wurde durch eine externe Kalibrierung als TPA-Äquivalente validiert. Die Standardsubstanz wird dabei dem gleichen Hydrolyseprozess unterzogen und es wird über ihre Spaltprodukte kalibriert. Für die Jatropha Urtinktur wurde ebenfalls eine Quantifizierung der Phorbolester in der Summe als TPA-Äquivalente gewählt, wobei die gesamten Peakflächen der Jatrophafaktoren im Chromatogramm aufsummiert und zusammen gegen den externen Standard TPA berechnet wurden. In der untersuchten Urtinktur aus Euphorbia cyparissias L. konnten die aus der Literatur bekannten Ingenolester identifiziert werden, aber aufgrund der heterogenen Zusammensetzung konnte hier keine zufriedenstellende Methode für die Quantifizierung gefunden werden. Mit der entwickelten Methode konnte für vier unterschiedliche Chargen der Croton Urtinktur sowie für fünf selbst hergestellte Extrakte aus unterschiedlichen Samenproben ein Vergleich in der qualitativen und quantitativen Zusammensetzung der Phorbolester erreicht werden. Zwei Chargen der Jatropha Urtinktur wurden zusammen mit den eigenen Extrakten über die beschriebene Methode quantifiziert und verglichen.
The present work deals with the analysis of homeopathic mother tinctures and extracts from selected Euphorbiaceae, which are of particular interest in terms of the skin-irritating and tumor-promoting properties of the containing diterpene esters. The monographic description of these mother tinctures in the European Pharmacopeia necessitates the development of an easy method for the quantification of these compounds estimating their risk potential. For this purpose, we have qualitatively analysed mother tinctures and extracts from the seeds of Croton tiglium L. and Jatropha curcas L. to get a precise description of the phorbol esters contained therein. By means of UHPLC-MS/MS analysis we were able to identify the contained compounds. In both the mother tincture and the extracts from croton seeds a lot of phorbol ester derivatives not yet described were found. In the mother tincture from Jatropha curcas L. we could identify the jatropha factors 1-6 already described in the literature. Due to the high amount of different phorbol esters in the croton mother tincture quantification of the basic diterpene alcohols after hydrolysis was the chosen method. Initially, it was attempted to perform an enzymatic decomposition of the esters; this approach,however, did not work out satisfactorily. The chosen method for quantification after alkaline hydrolysis of the phorbol esters was validated by means of external calibration as TPA-equivalents. The standard substance was treated with the same process of hydrolysis and the calibration over the decomposition products. For the jatropha mother tincture, quantification of the phorbol esters as total amount of TPA-equivalents was chosen. The sum of the peak areas of the jatropha factors was calculated by means of an external standard TPA. In the examined mother tincture of Euphorbia cyparissias L. the ingenol esters already described in the literature could be identified. However, due to the heterogeneous composition, we were unable to find a satisfactory method for the quantification. The developed method facilitated a comparision of the quantitative and qualitative phorbol ester compositions of the four different croton mother tinctures and the five extracts from croton seeds. The two jatropha mother tinctures were compared with an own extract by means of the described quantification method.
