Die Aggregation einer ganzen Reihe von verschiedenen Proteinen steht in einem engen Zusammenhang mit verschiedenen Krankheiten, wie z.B. Alzheimer. Obwohl die dafür verantwortlichen Proteine sich in ihrer Ausgangsstruktur und ihrer Sequenz unterscheiden, zeigen sie alle die strukturelle Veränderung zu β -Faltblatt-reichen fibrillären Aggregaten mit der charakteristischen cross-β-Struktur. Der zugrunde liegende Mechanismus verläuft über mehrere Stufen, indem sich instabile präfibrilläre Oligomere über fibrilläre Vorstufen schließlich zu amyloiden Fibrillen zusammenlagern. Die mechanistischen Details sind nur wenig verstanden und viele verschiedene Strategien zur Entwicklung von Inhibitoren gegen die amyloide Aggregation sind bisher verfolgt worden. In den meisten Fällen binden die chemisch diversen Verbindungen an bereits aggregierte Formen des amyloidogenen Proteins in der β-Faltblattkonformation. Das Screening von Substanzbibliotheken und das rationale Design führt in den meisten Fällen zu Inhibitoren die an die aggregierte Spezies binden und die weiter Polymerisation durch die Blockierung der Addition weiterer Monomere unterbinden. Zahlreiche Studien in der Entwicklung peptidbasierter Inhibitoren gehen von amyloiden Kernsequenzen der jeweiligen Proteine aus, da sie dafür bekannt sind, an sich selbst zu binden. Peptidbasierte Inhibitoren binden meist an das amyloidogene Peptidrückgrat in β-Faltblattkonformation. Einmal gebunden, blockieren diese Inhibitoren das Fibrillenwachstum durch sterische Effekte, elektrostatische Abstoßung oder durch das Unterbinden der Ausbildung von Wasserstoffbrückenbindungen. Doch diese Strategie kann möglicherweise die Menge an präfibrillären Oligomeren erhöhen, welche als wesentliche toxische Spezies des Amyloidbildungsprozesses diskutiert werden. Daher sind alternative Ansätze notwendig. Der Übergang vom löslichen Monomer in β-Faltblatt-reiche Spezies ist hierbei der entscheidende Schritt. Einige natürliche amyloidogene Peptidsequenzen bergen ebenfalls Elemente einer α-Helix oder bilden während des Aggregationsprozesses helikale Intermediate. Die Stabilisierung der helikalen Konformation zur Vermeidung des entscheidenden Schritts ist daher ein viel versprechender Ansatz in der Inhibition. Im Rahmen dieser Arbeit werden Studien beschrieben, die das Potential dieser Strategie anhand von Modellpeptiden demonstrieren. Der Ansatz beruht auf helikalen peptidischen Inhibitoren, die designt worden sind, die amyloidogenen Modellpeptide in einem helikalen Komplex zu stabilisieren und auf diese Weise den Übergang zur β-Faltblattkonformation und daraus folgend die Bildung von amyloiden Fibrillen zu inhibieren. Darüber hinaus konnte gezeigt werden, dass helikale peptidische Inhibitoren in der Lage sind, bereits gebildet amyloide Fibrillen wieder aufzulösen.
The formation of amyloid aggregates is responsible for a wide range of diseases, for example Alzheimer’s disease. Although the amyloid forming proteins have natively different structures and different sequences, all undergo a structural change to form amyloid aggregates that have a characteristic cross-β-structure. The mechanism is a multistep process in which unstable prefibrillar oligomers assemble via fibrillar intermediates into amyloid fibrils. The mechanistic details of this process are poorly understood and different strategies to develop inhibitors of amyloid formation are followed to date. In most cases, chemically diverse compounds bind to an elongated form of the protein in a β-strand conformation and thereby exert their therapeutic effect. The screening of libraries of small molecules and the rational design leads in most cases to inhibitors that bind to aggregated species and prevent further polymerization by blocking the addition of peptide monomers. Numerous studies in the development of peptide based amyloid aggregation inhibitors have taken the core sequence of the target peptide as a lead as it is already known to bind to itself. The peptide based inhibitors were designed to bind to the peptide backbone in β-sheet conformation. They block further elongation by steric effects, electrostatic repulsion, or inhibition of the formation of hydrogen- bonds. However, blocking fibril formation with this strategy could increase the amount of prefibrillar oligomeric forms, which are thought to be the toxic species in the amyloid formation process. Therefore, alternative approaches are necessary. The conversion from the soluble monomeric form into β-sheet rich aggregated morphologies appears to be the key event. Several naturally occurring amyloidogenic peptides that form β- sheet rich fibrils harbor also an α-helix in the primary structure or appear to form helical intermediates during amyloid formation under certain conditions. Therefore, one promising approach is the stabilization of the helical conformation to prevent the key-event, the conversion to β-sheet and the formation amyloids. This thesis presents the investigation of the potential of this approach using model peptides. The approach consists of a helical inhibitor peptides which are designed to engage amyloid forming model peptides in a stable helical arrangement, thus to prevent rearrangement into a β-sheet conformation and the subsequent formation of amyloid-like fibrils. Moreover, the helix forming peptide is able to disassemble mature amyloid-like fibrils.
