dc.contributor.author
Thomas, Alexander
dc.date.accessioned
2018-06-07T22:56:45Z
dc.date.available
2007-05-15T00:00:00.649Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/9848
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-14046
dc.description
Titelblatt und Inhaltsverzeichnis
Einleitung
Material und Methoden
Ergebnisse
Diskussion
Literaturverzeichnis
dc.description.abstract
Humanes endothelin-converting-enzyme (ECE)-1, das Hauptenzym in der
Endothelinbiosynthese, zeigt eine breite Zell- und Gewebeexpression innerhalb
des Kardiovaskulären Systems. Die Expression von ECE-1c, das die Hauptisoform
repräsentiert, wird gelenkt durch einen alternativen Promotor. Die Mechanismen
der ECE-1c Promotorregulation waren jedoch bisher weitestgehend unbekannt. Da
die ECE-1c Transkription von mehreren Startpunkten aus beginnt, konnte man
eine ECE-1c Promotorfunktion als houskeeping Promotor annehmen. Mittels
promotor reporter assays , gel-shifts und supershift assays konnte die
Funktionalität von cis-wirkenden Elementen für die Bindung der CAAT-Box
bindenden Proteine NF-YB, GATA-2, E2F und eines GC-Box bindenden Faktors, die
räumlich assoziiert sind mit den Transkriptionsstartpunkten des ECE-1c, in
humanen endothelialen EA.hy926-Zellen demonstriert werden. In der mehr
upstream gelegenen Promotorregion wurden drei hoch polymorphe
Dinukleotidwiederholungen, 5´(CA)n, (CG)n und 3´(CA)n, identifiziert, die die
Promtorfunktion in endothelialen EA.hy926-Zellen stark beeinflussen (2,7-fache
Aktivierung, wenn man das am stärksten aktive mit dem am wenigsten aktiven
Allel vergleicht) und in ähnlicher Weise in humanen neuronalen KELLY-Zellen.
Die Ergebnisse bilden eine molekulare Erklärung für die grundlegende
Expression von ECE-1c mRNA. Die Modulation durch genetische und epigenetische
Mechanismen, die in dieser Studie gezeigt wurden, könnte für die
interindividuelle Variation der grundlegenden Endothelinsystemaktivität beim
Menschen angesehen werden und darüberhinaus die individuelle Prädisposition
für kardiovaskuläre Erkrankungen beeinflussen.
de
dc.description.abstract
BACKGROUND: Human endothelin-converting enzyme (ECE)-1, the key enzyme in
endothelin biosynthesis, shows broad cell and tissue expression within the
cardiovascular system. Expression of ECE-1c, which represents the major ECE-1
isoform, is directed by an alternative promoter, but the mechanisms of ECE-1c
promoter regulation are largely unknown. As ECE-1c transcription is initiated
from several start sites, we hypothesized that the ECE-1c promoter functions
as a housekeeping promoter. OBJECTIVE: To investigate the putative
housekeeping function of the ECE-1c promoter in vascular endothelial cells,
which represent a main site of its expression. RESULTS: Using promoter
reporter assays, gel shift and supershift assays, we have demonstrated, in
human endothelial EA.hy926 cells, functionality of cis-acting elements for
binding of the CAAT-box binding protein NF-YB, GATA-2) E2F-2, and a GC-box
binding factor, which are spatially associated with transcriptional start
sites of ECE-1c. In the more upstream promoter region we have identified three
highly polymorphic dinucleotide repeats, 5'-(CA)n, (CG)n and 3'-(CA)n, which
strongly affected promoter function in endothelial EA.hy926 cells (2.7-fold
activation comparing the most active to the least active allele) and, in a
similar manner, in human neuronal KELLY cells. Finally, by in-vitro
methylation, we were able to achieve strong suppression of the ECE-1c promoter
activity in endothelial cells. CONCLUSION: Our results provide a molecular
explanation for constitutive expression of ECE-1c mRNA. Modulation by genetic
and epigenetic mechanisms as revealed in our study may account for
interindividual variation of the constitutive endothelin system activity in
humans and thus influence individual predisposition to cardiovascular disease.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
endothelin converting enzyme polymorphism promotor
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Transkriptionelle Regulation der Isoform c des humanen Endothelin-
Konvertierungs-Enzyms (ECE)-1
dc.contributor.firstReferee
Priv.-Doz. Dr. med. H.-D. Orzechowski
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. M. Bader
dc.date.accepted
2007-04-24
dc.date.embargoEnd
2007-06-11
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000002922-8
dc.title.translated
Regulation of the major isoform of human endothelin-converting enzyme-1 by a
strong housekeeping promoter modulated by polymorphic microsatellites
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000002922
refubium.mycore.transfer
http://www.diss.fu-berlin.de/2007/349/
refubium.mycore.derivateId
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open access