dc.contributor.author
Kreutzkamp, Jan Erich
dc.date.accessioned
2018-06-07T22:51:06Z
dc.date.available
2014-06-20T08:43:06.276Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/9714
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-13912
dc.description.abstract
Einleitung: Aufgrund des demographischen Wandels und der steigenden Prävalenz
von Diabetes mellitus und vaskulären Erkrankungen werden immer mehr Patienten
mit der Diagnose einer terminalen Niereninsuffizienz behandelt. Es hat sich
gezeigt, dass die Nierentransplantation im Vergleich zu Hämodialyse und
Peritonealdialyse die beste Therapieoption ist, da sie den beiden
Dialyseverfahren sowohl in Bezug auf die Lebenserwartung als auch in Bezug auf
die Lebensqualität überlegen ist. Die weitere Verlängerung des
Transplantatüberlebens bleibt ein wichtiges Ziel der aktuellen Forschung. Die
chronische Transplantatschädigung mit resultierender Fibrosierung des Organs
ist eine der Hauptursachen des vorzeitigen Transplantatverlustes. Hierfür ist
die immunsuppressive Erhaltungstherapie mit Calcineurin-Inhibitoren zumindest
teilweise mitverantwortlich. In zahlreichen Untersuchungen an
Transplantatnieren und an Eigennieren wurde der profibrotische Effekt von
Transforming Growth Factor-β1 (TGF-β1) belegt. In der vorliegenden Arbeit
wurde der Einfluss von Tacrolimus auf die Synthese von TGF-β1 und der beiden
Rezeptoren Typ I-Rezeptor (TβRI) und Typ II-Rezeptor (TβRII) an
Mesangiumzellen untersucht. Methodik: Verschiedene Kulturen von
Mesangiumzellen aus Sprague-Dawley-Ratten wurden in Anwesenheit von 10, 50
oder 100 ng/ml Tacrolimus bzw. ohne Tacrolimus über unterschiedliche Zeiträume
inkubiert. Die Messung der mRNA von TGF-β1, TβRI und TβRII erfolgte durch
kompetitive reverse Transkription-Polymerasekettenreaktion (rT-PCR). Das
TGF-β1-Protein im Zellkulturüberstand wurde mittels Enzyme Linked
Immunosorbent Assay (ELISA) bestimmt. Die Proteine TβRI und TβRII in
Mesangiumzellen wurden mittels Western Blot gemessen. Ergebnisse: Im Vergleich
zur Inkubation ohne Tacrolimus zeigte sich nach 72stündiger Inkubation mit
Tacrolimus eine vermehrte Expression von TGF-β1-mRNA in einigen
Mesangiumzellkulturen (10 ng/ml: 1,86-fach, 50 ng/ml: 1,70-fach, 100 ng/ml:
1,48-fach vs. 0 ng/ml Tacrolimus). Übereinstimmend fand sich eine vermehrte
Produktion von TGF-β1-Protein in den Kulturüberständen nach 96 Stunden
Inkubation mit Tacrolimus (0 ng/ml Tacrolimus: 380,91 ng/ml, 10 ng/ml: 591,30
ng/ml, 50 ng/ml: 573,64 ng/ml, 100 ng/ml: 625,87 ng/ml). Der Effekt war nicht
dosisabhängig und nicht in allen Mesangiumzellkulturen reproduzierbar. Im
Gegensatz dazu kam es nach Inkubation der Mesangiumzellen mit Tacrolimus weder
auf mRNA- noch auf Protein-Ebene zu einer vermehrten Synthese der beiden
Zielrezeptoren TβRI und TβRII. Schlussfolgerung: Zusammenfassend konnte in
dieser Arbeit gezeigt werden, dass kultivierte Mesangiumzellen von Sprague-
Dawley-Ratten bei Inkubation mit Tacrolimus vermehrt TGF-ß1 synthetisieren.
Dieser Effekt war jedoch nicht bei allen Mesangiumzellkulturen zu beobachten.
Genetische Polymorphismen könnten eine mögliche Erklärung für dieses Phänomen
sein. Die durch Tacrolimus induzierte Zunahme der TGF-ß1-Synthese von
Mesangiumzellen könnte bei der Fibrosierung der Transplantatniere im Rahmen
der chronischen Transplantatschädigung eine Rolle spielen.
de
dc.description.abstract
Introduction: Due to demographic changes and the increasing prevalence of
diabetes mellitus and vascular diseases the number of patients with end stage
renal disease is increasing. Renal transplantation is the best therapeutic
option compared to hemodialysis and peritoneal dialysis, as it was shown to be
superior to both dialysis modalities concerning life expectancy and the
quality of life. Further improvement of renal allograft survival remains an
important goal of current research. Chronic allograft injury with resulting
organ fibrosis is one of the main causes of premature graft loss. At least in
part maintenance immunosuppression with calcineurin-inhibitors is responsible
for this phenomenon. In numerous studies investigating transplanted kidneys
and native kidneys the profibrotic effect of transforming growth factor-β1
(TGF-β1) has been shown. In this dissertation, the effect of tacrolimus on the
synthesis of TGF-β1 and its receptors type I (TβRI) and type II (TβRII) was
investigated in cultured mesangial cells. Methods: Different mesangial cell
cultures derived from Sprague-Dawley rats were incubated in the presence of
10, 50, 100 ng/ml tacrolimus or in the absence of tacrolimus over different
periods of time. TGF-β1-, TβRI- and TβRII-mRNA were measured by competitive
reverse transcription polymerase chain reaction (rT-PCR). TGF-β1-protein in
cell culture supernatants was measured by enzyme-linked immunosorbent assay
(ELISA). TβRI- and TβRII-protein in mesangial cells were measured by Western
blot. Results: Compared to incubation in the absence of tacrolimus, an
increased expression of TGF-β1-mRNA was found in some mesangial cell cultures
following 72 hours of incubation in the presence of tacrolimus (10 ng/ml:
1,86-fold, 50 ng/ml: 1,70-fold, 100 ng/ml: 1,48-fold). In agreement, an
increased production of TGF-β1-protein was observed in cell culture
supernatants after 96 hours of incubation with tacrolimus (0 ng/ml tacrolimus:
380,91 ng/ml, 10 ng/ml: 591,30 ng/ml, 50 ng/ml: 573,64 ng/ml, 100 ng/ml:
625,87 ng/ml). The effect was not dose-dependent and could not be reproduced
in all mesangial cell cultures. In contrast, incubation of mesangial cells
with tacrolimus had no effect on TβRI- and TβRII-synthesis, neither at the
mRNA level nor at the protein level. Conclusion: In summary, this dissertation
shows that incubation of cultured rat mesangial cells from Sprague-Dawley rats
with tacrolimus increase TGF-ß1 synthesis. However, the effect was not
reproducible in all mesangial cell cultures. Genetic polymorphisms may be a
possible explanation for this phenomenon. Tacrolimus-induced increase of
mesangial TGF-ß1-synthesis may play a role in renal allograft fibrosis in the
course of chronic allograft injury.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
transforming growth factor beta
dc.subject
mesangial cells
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Wirkung von Tacrolimus auf die Synthese von TGF-β1 und die Expression der
TGF-β1-Rezeptoren TβRI und TβRII in der Mesangiumzelle
dc.contributor.firstReferee
N.N.
dc.contributor.furtherReferee
N.N.
dc.date.accepted
2014-06-22
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000096647-5
dc.title.translated
Effect of tacrolimus on TGF-β1 synthesis and expression of its receptors TRβI
and TβRII in mesangial cells
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000096647
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000015163
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access