dc.contributor.author
Huppertz, Tilman
dc.date.accessioned
2018-06-07T15:21:07Z
dc.date.available
2009-07-17T11:44:00.943Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/948
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-5150
dc.description.abstract
Bakterien der Gattung Shigella sind die Erreger der bakteriellen Ruhr beim
Menschen. Der wesentliche Virulenzfaktor der Shigellen ist ihre Fähigkeit zur
Invasion. Die Invasion in Epithelzellen ist Ausdruck des erregerspezifischen
Infektionsprozesses, der gekennzeichnet ist durch eine vom Bakterium
induzierte zelluläre Aufnahme über einen Phagozytose-ähnlichen Mechanismus. In
dessen Verlauf kommt es zur charakteristischen Reorganisation des Zytoskeletts
der Zelle mit Ausbildung einer blütenartigen Membranstruktur an der
bakteriellen Eintrittsstelle, deren Bildung von der kleinen GTPase Rho
abhängig ist. Es wurde gezeigt, dass die Rho-Isoformen RhoA und RhoC selbst an
den bakteriellen Invasionslocus rekrutiert werden. Trotz hoher
Sequenzhomologie der Isoformen untereinander existiert aber ein
unterschiedliches Rekrutierungsmuster: RhoA akkumuliert vorwiegend um die
eindringenden Bakterien herum während RhoC in die bakterieninduzierten
zellulären Protrusionen rekrutiert wird. Für diese differentielle Rekrutierung
ist die polybasische Rekrutierungsdomäne am C-Terminus der beiden Rho-
Isoformen notwendig und ausreichend. Um eine weitere Charakterisierung der
Rekrutierungsdomäne zu ermöglichen wurden Konstrukte mit dieser polybasischen
Domäne kloniert und exprimiert. Die exprimierten Proteine wurden in
Kooperation mit der Arbeitsgruppe von Konrad Büssow in einem Overlayassay
eingesetzt. In einer vorläufigen Auswertung konnte eine Vielzahl von
potentiellen in-vitro Bindungspartnern der Rekrutierungsdomäne von RhoA und
RhoC nachgewiesen werden. Fast alle Zellkompartimente waren vertreten,
Einschränkungen hinsichtlich der Proteinfunktion waren nicht ersichtlich. Die
Ergebnisse sprechen für eine pleiotrope Wirkung von RhoA und RhoC auf
verschiedene Funktionen und Bereiche der Zelle und haben weitreichende
Konsequenzen für die funktionelle Rolle der beiden Rho-GTPasen über die
Epithelzellinvasion durch Shigella hinaus.
de
dc.description.abstract
Shigella is the etiologic agent of human bacillary dysentry, an infectious
large bowel disease. A major feature of Shigella’s pathogenic potential is the
capacity to invade epithelial cells. Shigella entry into epithelial cells is
considered a parasite-induced internalization requiring cytosceletal
rearrangements; Shigella entry induces a blossom-like membrane structure at
the bacterial entry site. This membrane folding process is dependent on the
small GTPase Rho. It has been shown that the two Rho isoforms RhoA and RhoC
are recruited into bacterial entry sites with different localization relative
to the membrane structures. While RhoA preferentially accumulates in close
vicinity to entering bacteria, RhoC is recruited into the tips of Shigella-
induced cellular protrusions. This differential recruitment is mediated by a
polybasic recruitment-domain at the C-terminal end of the Rho-GTPases. To
further characterise this polybasic region we cloned and expressed constructs
containing the tagged Rho C-terminus. In cooperation with Konrad Büssow´s
group the purified proteins were used to probe a human expression library for
binding. In a preliminary evaluation of the results we found a multitude of
potential in-vitro binding partners of this protein domain. These results are
of importance for the functional role of the Rho-GTPases not only during
Shigella-invasion into epithelial cells but also for their role in the
regulation of cellular processes.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Charakterisierung der Rekrutierungsdomäne der kleinen Rho-GTPasen RhoA und
RhoC
dc.contributor.firstReferee
PD Dr. Thomas Adam
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. rer. nat. H. Karch
dc.contributor.furtherReferee
Priv.-Doz. Dr. med. A. Sturm
dc.date.accepted
2009-09-18
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000011292-8
dc.title.translated
Characterisation of the recruitmentdomain of the Rho-GTPases RhoA and RhoC
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000011292
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000005967
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access