Generierung eines epithelialen Zellmodells zur funktionellen Charakterisierung des Tight Junction-Proteins Claudin-16

Abstract

Mutationen im Claudin-16-Gen sind mit der familiären Hypomagnesiämie mit Hyperkalzurie mit Nephrokalzinose (FHHNC) assoziiert. In dieser Arbeit wurde nach Vergleich der endogenen Claudin-Expressionsmuster in unterschiedlichen Zelllinien eine stabile Transfektion hochohmiger MDCK-C7-Zellen mit FLAG getaggter Claudin-16-cDNA durchgeführt, und die resultierenden Zellklone wurden molekular-biochemisch und elektrophysiologisch analysiert. Das Zellmodell stellt ein geeignetes Modell für weiterführende Studien der physiologischen Mg2+-Resorption im renalen Tubulussystem dar.

Mutations in the claudin-16 gene are associated with familial hypomagnesemia with hypercalciuria and nephrocalcinosis (FHHNC). After comparing the endogenous claudin expression patterns in different cell lines a stable transfection of high-resistance MDCK-C7 cells with FLAG tagged cDNA of claudin-16 was accomplished, the resulting cell clones were analyzed, using molecular-biochemical and electrophysiological methods. The cell model, which was established in this work, represents a suitable model for further studies of the physiological Mg 2 + reabsorption in the renal tubules.