Zur Wirksamkeit von Propoliszubereitungen bei Otitis externa des Hundes sowie Untersuchungen der antibakteriellen, antiviralen Aktivitäten von ethanolischen Propolisextrakten und deren Wirkung auf Zellkulturen

Abstract

In der vorliegenden Arbeit wurden Untersuchungen zu verschiedenen Wirkungen von Propolis in vivo und in vitro durchgeführt.

Bei insgesamt 97 Otitis externa-Fällen an 51 Hunden wurden 7%ige bzw. 10%ige Zubereitungen aus ethanolischen Propolistrockenextrakt mit Glyzerin bzw. Rizinusöl erfolgreich zur 1xtäglichen lokalen Behandlung eingesetzt. In 81,44 % der Fälle trat eine Heilung nach 7 Tagen ein. Nach 14 Tagen Behandlung betrug die Heilungsquote 96,90%. Innerhalb eines Beobachtungszeitraumes von 3 Monaten wurden keine Rezidive festgestellt.

Ethanolischer Propolistrockenextrakt wirkte dosisabhängig antibakteriell bis bakterizid auf anaerobe Bakterienstämme. Innerhalb des getesteten Keimspektrums bestanden gattungsbedingte Unterschiede in der Propolisempfindlichkeit. Alle getesteten 14 anaeroben Bakterienstämme wurden im Dilutionstest vollständig im Wachstum gehemmt. Die ermittelten MHK-Werte von ethanolischen Propolistrockenextrakt für Arten der Gattung Fusobacterium lagen bei 1,0 mg Propolistrockenextrakt je ml Nährboden, für die übrigen getesteten anaeroben Bakterien bei 0,5 mg/ml.

Propolis- und Pappelknospenharztrockenextrakt (von Populus italica) wiesen im Dilutionstest ausgeprägte Wirkungen auf veterinärmedizinisch relevante grampositive Bakterien, Hefen und Pilze auf. Die antibakterielle Wirkung von ethanolischen Propolis- und Pappelknospenharztrockenextrakt war für grampositive Keime annähernd gleichstark ausgeprägt. Die antimykotische Wirkung vom Propolistrockenextrakt lag etwas über der vom Pappelknospenharztrockenextrakt. Die ermittelten MHK-Werte des Propolistrockenextraktes und des Pappelknospenharztrockenextraktes für grampositive Bakterien, Pilzen und Hefen lagen zwischen 0,175 bei Staphylococcus aureus, Trichophyton mentagrophytes und 2,8 mg/ml bei Malassezia pachydermatis. Die gramnegativen Keime Pseudomonas aeruginosa und Escherichia coli wurden in den getesteten Konzentrationen bis zu 2,8 mg/ml in ihrem Wachstum nicht vollständig gehemmt.

Ein konzentrationsabhängiger antiviraler Effekt des Propolistrockenextraktes wurde auf das Vesikulärstomatitis-Virus aus der Familie der Rhabdoviren und das equine Herpesvirus 1 aus der Familie der Herpesviridae nachgewiesen. Die stärkste antivirale Wirkung auf beide Viren lag bei einer Propolistrockenextraktkonzentration von 125 µg/ml Nährmedium vor. Die antivirale Wirkung des Propolistrockenextraktes auf das EHV 1 war stärker ausgeprägt als auf das VSV. Mit cELISA durchgeführte Mengenmessungen der Virusproteine gp 51 und p 24 lassen eine Hemmung der Produktion des bovinen Leukosevirus durch Propolistrockenextraktzusatz zum Nährmedium der permanenten Zellkultur FLK-BLV (VAN DER MAATEN et al. 1979) als möglich erscheinen.

Alle untersuchten Zellinien - die equine Dermis-Zellinie (ED), die Fledermauslungenzellinie (bat), die Hühnerembryofibroblasten-Zellinie (HEF), die fetal lamb Kidney-Zellinie-BLV-infiziert (FLK/BLV) und die humane Keratinozyten-Zellinie (HaCaT) - zeigten bei hohen Propolistrockenextraktkonzentrationen im Nährmedium zytotoxische Effekte. Die Höhe der Propolistrockenextraktkonzentration im Nährmedium, die zum vollständigen Zelluntergang führte, war abhängig von der Zellinie und lag zwischen 140 µg und 280 µg. Die equine Dermis-Zellinie (ED) zeigte sich am unempfindlichsten gegen Propolistrockenextrakt. Geringe Propolistrockenextraktkonzentrationen (unter 10 µg/ml) führten bei den Zellinien FLK/BLV und HaCaT zur Proliferationserhöhung.

The scientific paper on hand includes examinations to differing effects of Propolis in vitro and in vivo.

Seven per cent respectively 10 per cent dispensations ethanol Propolis- dryextract with glycerol respectively castor oils were successful put in once a day for local treatment by altogether 51 dogs with 97 otitis externa cases. There were 81,44 per cent of the cases healed after 7 days. The rate of cure reached 96,90 per cent after 14 days of treatment. There were no relapses identified within an observation period of 3 months.

Ethanol Propolis-dryextract effected dose-dependent antibacterial too bacterial on anaerobic bacterial strains. The tested germinal spectrum shows differences in the degree of sensitiveness of Propolis, conditioned by species. All 14 tested anaerobic bacterial strains completely stunted in growth by the dilution-test. The determined MIC-values of ethanol Propolis- dryextract for species of Fusobacterium were next to 1,0 mg Propolis- dryextract of each 1 ml culture, other tested anaerobic bacteria next to 0,5 mg per ml.

Propolis- and Poplarbudsdry-extract (from Populus italica) show pregnant effects on veterinary-medical relevant gram-positive bacteria, yeasts and funguses in the dilution-test. The antibacterial effect of Propolis- and Poplarbudsdry-extract was nearly the same on gram-positive germs. The antimycotic effect of Propolis-dryextract was a little higher, then by Poplarbuds-dryextract. The determined MIC-values of Propolis-dryextract and the Poplarbuds-dryextract by gram-positive bacteria, yeasts and mycosis had situated among 0,175 by Staphylococcus aureus, Trichophyton mentagrophytes and 2,8 mg per ml by Malassezia pachydermatis. The gram-negative germs Pseudomonas aeruginosa and Escherichia coli had not completely stunted in growth, testing concentrations till 2,8 mg per ml.

An antiviral effect depending on the concentration of Propolis-dryextract proved of Vesikular-stomatitis-virus from the family of Rhabdo-viruses and equine herpes virus 1 from the family of Herpesviridae. The strongest antiviral effect on both viruses had reached with a concentration of the the Propolis-dryextract of 125 µg per ml fluid culture medium. The antiviral effect of Propolis-dryextract on the EHV 1 was stronger marked, than on the VSV. There were quantitative determinations implemented by cELISA of the virus-proteins gp 51 and p 24. The results indicate a production-retardation of the bovine leucosis-virus by the addition of Propolis-dryextract to the fluid culture medium of the permanent cell culture FLK-BLV (VAN DER MAATEN et al. 1979).

All examined cell lines - the equine dermis cell line (ED), the bat lung cell line (bat), the fowl embryo fibroblaste cell line (HEF), the fetal lamb kidney cell line-BLV-infect (FLK/BLV) and the human immortalized cell line (HaCaT) - show cytotoxic effects, if the level of the Propolis-dryextract in the fluid culture medium was high. The level of the Propolis-dryextract in the fluid culture medium, which lead to the complete cell-devastation depended on the cell line and amounted among 140 µg and 280 µg. The equine dermis cell line (ED) turned out most resistant to Propolis-dryextract. Small Propolis-dryextract-concentrations (below 10 µg per ml) lead by the cell lines FLK/BLV and HaCaT to a higher Proliferation.