dc.contributor.author
Blochmann, Rico
dc.date.accessioned
2018-06-07T15:17:42Z
dc.date.available
2014-09-25T12:39:38.213Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/859
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-5061
dc.description.abstract
Auf Basis der bislang zur Verfügung stehenden Methoden konnte weder ein
effektiver HIV-Impfstoff entwickelt noch der durchschlagende Erfolg bei der
Induktion einer Anti-Tumorantwort erzielt werden. Aus diesem Grund ist es
Aufgabe der Grundlagenforschung, innovative Lösungsansätze bereit zu stellen,
um die Effektivität der Vakzinierung zu verbessern. Diesbezüglich zeigte der
Einsatz von replikationskompetenten Vektorsystemen erste vielversprechende
Ergebnisse im SIV-Primatenmodell. Hinsichtlich dieses Ansatzes war es Ziel
dieser Dissertation, ein neues replikationskompetentes Impf-Vektor-System
basierend auf simianen Foamyviren zu entwickeln, um eine effektive und
permanente Immunantwort gegen definierte Antigene stimulieren zu können. Auf
der Basis des foamyviralen Vektors pHSRV2/13 (PFV/HFV) erfolgte die
Konstruktion von replizierenden PFV-∆Bet-Basis-Vektoren. In einer ersten
Tierversuchsphase konnte durch ballistische Applikation der PFV-∆Bet-
Deletionsmutanten via Gene Gun eine permanente PFV-gerichtete
Antikörperantwort in Hamstern und Mäusen induziert werden. Die Entwicklung
eines effektiven viralen Impf-Vektor-Systems bedingte maßgeblich die stabile
Expression definierter Antigene unter Kontrolle der viralen Replikation. Durch
die gezielte genetische Modifikation der PFV-∆Bet-Basis-Vektoren konnte eine
Palette von Hybridviren mit variablen Replikations- und Antigen-
Expressionseigenschaften generiert werden. Dabei war es möglich, eine stabile
Expression von GFP und HIV-CTL-Epitopen über einen Zeitraum von 68 Tagen in
vitro nachzuweisen. Im Anschluss erfolgte die Immunisierung von Hamstern und
Mäusen mit den generierten PFV-HIV-Epitop-Hybridviren. Durch diese Hybridviren
konnte eine permanente, PFV-gerichtete Antikörperantwort über einen Zeitraum
von knapp 400 Tagen induziert werden. Darüber hinaus ist es gelungen, die in
vivo Replikation der generierten Impf-Vektoren über Re-Isolation des
applizierten Impfvirus aus dem Gewebe eines infizierten Hamsters eindeutig
nachzuwiesen. Einen endgültigen Beweis für die Funktionalität des generierten
Impf-Vektor-Systems lieferte der geführte Nachweis einer induzierten HIV-
Epitop-spezifischen T-Zellpopulation im Milzgewebe von immunisierten Mäusen
knapp 400 Tage nach Applikation der Hybrid-Impfviren. Dabei wurde eine
variable Immunantwort in Abhängigkeit zu den unterschiedlichen Eigenschaften
der konstruierten Impf-Vektoren stimuliert. Dadurch konnte bewiesen werden,
dass durch die Applikation von replizierenden foamyviralen Impf-Vektoren die
Induktion einer starken und permanenten Immunabwehr prinzipiell möglich ist.
de
dc.description.abstract
Attempts to develop a successful HIV vaccine or induce an effective anti-tumor
response using the methods available have so far been unsuccessful. The
evaluation of innovative strategies aimed at improving the efficacy of
vaccination is therefore an important aspect of basic research. Recent studies
using replication vector systems in the SIV-primate model have, in this
respect, been promising. The aim of this thesis was therefore to develop a
novel replication-competent vaccine vector system based on simian foamy
viruses able to induce an effective and enduring immune response against
defined antigens. Replicating PFV-ΔBet vectors were constructed using the
foamy viral vector pHSRV2/13 (PFV/HFV) as a basis. An initial animal
experiment demonstrated the induction of a long-lasting PFV-specific antibody
response in hamsters and mice by gene gun ballistic application of the PFV-
ΔBet deletion mutants. In order to be effective, a vaccine viral vector of
this kind requires the stable expression of defined antigens under the control
of viral replication. A variety of hybrid viruses with differing replication
and antigen expression characteristics were generated by specific genetic
modification of the PFV-ΔBet basis vectors. Virus replication and the stable
expression of GFP and an HIV-CTL epitope string could be demonstrated for up
to 68 days in vitro. Hamsters and mice were therefore inoculated with the PFV-
HIV epitope hybrid viruses and a persistent PFV-specific antibody response was
observed over a period of nearly 400 days. Furthermore, in vivo replication of
the vaccine vectors was demonstrated by re-isolation of the inoculated virus
from the tissues of an infected hamster. The functionality of the vaccine
vector system was clearly demonstrated by the presence of HIV epitope-specific
T-cells in the spleens of mice immunized almost 400 days previously with the
hybrid viruses. The strength of the response appeared to depend on the
particular characteristics of the vaccine vectors. These data demonstrate that
is in principle possible to induce a strong and persisting immunity by
application of replicating foamy virus vaccine vectors.
en
dc.format.extent
VI, 150, XVIII S.
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
replicating vector
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::570 Biowissenschaften; Biologie
dc.title
Replizierende foamyvirale Vektoren zur Stimulation einer effektiven und
permanenten Immunantwort gegen HIV und tumorassoziierte Antigene
dc.contributor.contact
r.blochmann@gmx.net
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. Reinhard Kurth & PD Dr. Norbert Bannert
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. Rupert Mutzel
dc.date.accepted
2014-06-04
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000097458-3
dc.title.translated
Replicating foamy viral vectors to stimulate an effective and long lasting
immune response against HIV and tumor-associated antigens
en
refubium.affiliation
Biologie, Chemie, Pharmazie
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000097458
refubium.mycore.derivateId
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dcterms.accessRights.dnb
free
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open access