dc.contributor.author
Henneken, Maren
dc.date.accessioned
2018-06-07T21:53:47Z
dc.date.available
2003-11-18T00:00:00.649Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/8579
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-12778
dc.description
0\. Titelblatt und Inhaltsverzeichnis
1\. Einleitung1
2\. Fragestellung16
3\. Material und Methoden17
4\. Ergebnisse31
5\. Diskussion63
6\. Zusammenfassung, Summary76
Literatur80
Anhang94
Danksagung, Lebenslauf100
dc.description.abstract
Die rheumatoide Arthritis ist eine Autoimmunerkrankung mit unbekannter
Ursache. Sie ist klinisch durch eine chronische Entzündung der Synovialmembran
und Pannuns-Bildung gekennzeichnet. Dies führt zu geschwollenen Gelenken und
Gelenkszerstörungen. Zellen des Immunsystem wie T- und B-Zellen, Makrophagen,
Mastzellen und Endothel-Zellen wandern in die Synovialmembran. In einigen
Patienten entwickeln sich organisierte lymphoide Strukturen, die die Idee
einer lokalen Keimzentrumsreaktion unterstützen. Die Isolierung von B-Zellen
direkt aus Gefrierschnitten und die Analyse ihres V-Gen-Repertoires lassen
vermuten, dass in den ektopen Keimzentren B-Zellen zu Plasmazellen
ausdifferenzieren. Nur ein geringer Anteil an RA-Synovialgewebe entwickelt
ektope Keimzentren. Es sind aber Plasmazellen nachzuweisen. Daraus ergibt sich
die Frage, wie diese Zellen im Synovialgewebe akkumulieren.
Die Wanderung der Lymphozyten vom peripherem Blut ins Synovialgewebe ist ein
mehrstufiger Prozess, an dem Adhäsionsmoleküle, wie Selektine und Integrine,
und verschiedene chemotaktile Moleküle beteiligt sind. Das Ziel dieser Arbeit
ist die Wanderung der B-Zellen in das chronisch entzündete Synovialgewebe zu
verstehen. Chemokine und ihre Rezeptoren sind wichtig für die Steuerung der
Lymphozyten-Wanderung. Die Expressionsmuster der Chemokinrezeptoren auf
peripheren Blut-Zellen wurden untersucht. Zusätzlich wurden Gefrierschnitte
der Synovialmembran auf das Vorhandensein von Chemokinen getestet.
Mononukleare periphere Blut-Zellen von Patienten mit RA, OA und SLE, sowie
gesunde Kontrollen, wurden mit B-Zell-spezifischen Antikörpern gefärbt. Die
Kombination von Antikörpern gegen die Oberflächenmarker CD19, CD20 und CD27
machten die Unterscheidung der drei B-Zell-Subpopulationen (naive, Gedächtnis
B-Zellen und Plasmazellen) möglich. Die verschiedenen B-Zell-Subpopulationen
werden auf ihre Chemokinrezeptor-Expression untersucht. Periphere
Blut-B-Zellen von RA-Patienten unterscheiden sich in der Expression der
Chemokinrezeptoren von gesunden Kontrollen. CXCR5 ist der typische
Chemokinrezeptor für B-Zellen, verantwortlich für die Wanderung in die
sekundären lymphatischen Organe. Wie erwartet expremieren nahezu alle naiven
und Gedächtnis B-Zellen der gesunden Kontrollen diesen Rezeptor. Bei vielen
RA-Patienten war der Anteil der CXCR5-positiven B-Zellen reduziert, dies
sowohl bei naiven als auch bei Gedächtnis B-Zellen. Für die Lenkung von
Lymphozyten in entzündete Gewebe ist der Chemokinrezeptor CXCR3 beschrieben
worden. Die Expression von CXCR3 auf peripheren Blut-Zellen wurde analysiert.
In dieser Arbeit konnten zwei CXCR3-positive B-Zell-Fraktionen gezeigt werden.
Obwohl der Anteil der CXCR3-positiven B-Zellen, gleich bleibt, nimmt der
Anteil der CXCR3 "hoch" exprimierenden B-Zellen signifikant bei RA-Patienten
zu. Die Reduktion des Anteils CXCR5-positiver B-Zellen korreliert mit der
Zunahme CXCR3 "hoch" exprimierender B-Zellen bei RA-Patienten.
Die Analyse der Anteile Chemokinrezeptor-tragenden B-Zellen, zeigte deutliche
Unterschiede zwischen RA-Patienten und gesunden Kontrollen, in Hinblick auf
drei der sieben untersuchten Chemokinrezeptoren. Die Ergebnisse lassen
vermuten, dass bei RA-Patienten die Expression der Chemokinrezeptoren gestört
ist. Dies führt zur Annahme, dass die Chemokinrezeptor Expression auf
B-Zellen, durch die chronische Entzündung verändert wird. Dadurch könnte die
Wanderung der B-Zellen, besonders die der Gedächtnis B-Zellen, ins das
Synovialgewebe beeinflusst werden.
de
dc.description.abstract
Rheumatoid Arthritis is a complex autoimmune disease of unknown cause. It is
clinically marked by a chronic inflammation of the synovial membrane and
pannus formation, which leads to swollen joints and at last to joint
destruction. Inflammatory cells like T and B cells, macrophages, mast cells
and endothelial cells infiltrate the synovial membrane. In some patients
organized lymphoid structures are developed which supports the idea of a
possible local germinal center reaction. Dissection of B cells directly from
frozen tissue sections and analysis of their V-gene repertoire suggested that
in ectopic germinal centers, B cells differentiate into plasma cells. However,
although only a few RA synovial tissues develop ectopic germinal centers,
multiple plasma cells are still seen. The question arises, how these cells
accumulate in the synovial tissue.
Migration of lymphocytes from the blood to the synovial tissue is a multistep
process in which interactions of adhesion molecules, as selectins and
integrins, with their ligands and a large variety of chemoattractant molecules
are involved. The aim of the thesis is to understand B cell migration into the
chronically inflamed synovial tissue. As chemokines and their receptors are
important in the control of lymphocyte trafficking, the expression patterns of
chemokine receptors on peripheral blood B cells were analyzed. In addition,
synovial tissue sections were tested for the presence of chemokines.
Peripheral blood mononuclear cells from RA, OA, SLE patients and normal
controls were stained with antibodies specific for B cells. The combination of
antibodies against surface markers like CD19, CD20 and CD27 gave the
possibility to distinguish between the three B cell subpopulations, such as
naïve, memory and plasma cells. The diverse B cell subpopulations were
analyzed for their expression of chemokine receptors. Peripheral blood B cells
from RA patients differ in their expression of chemokine receptors from those
of healthy controls. CXCR5 is the main chemokine receptor responsible for the
migration of B cells into secondary lymphoid organs. As expected, in healthy
individuals this receptor is expressed on practically all naïve and memory B
cells. However, in many RA patients, CXCR5 was down regulated on both
peripheral blood naïve and memory B cells. The chemokine receptor CXCR3 has
been described as a receptor directing lymphocytes into inflamed tissue. The
expression of CXCR3 on peripheral blood B cell subsets was analyzed. In this
thesis two fractions of CXCR3 positive B cells were shown. Although the total
number of CXCR3 positive B cells was the same as in controls, the fraction of
CXCR3 high expressing B cells was significantly increased in RA patients. In
comparison to healthy individuals, naïve and memory B cells from RA patients
showed an elevated expression of CXCR3 high. The increased expression is
correlated with the decreased expression of CXCR5 in RA patients.
The analysis of seven chemokine receptors already showed differences for three
receptors between the RA patients and healthy controls. The results suggested
that in RA patients the expression of chemokine receptors is deregulated.
These findings may lead to the assumption that the expression of chemokine
receptors on B cells is changed under chronic inflammation. It may influence
the migration of B cells, especially of memory B cells into the synovial
tissue.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
chemokine receptor
dc.subject
rheumatoid arthritis
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::570 Biowissenschaften; Biologie::570 Biowissenschaften; Biologie
dc.title
Untersuchung der B-Zell-Akkumulation im entzündeten Synovialgewebe bei
rheumatoider Arthritis
dc.contributor.firstReferee
PD Dr. Claudia Berek
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. Volker A. Erdmann
dc.date.accepted
2003-11-07
dc.date.embargoEnd
2003-11-20
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-2003002905
dc.title.translated
Analysis of B cell accumulation in chronically inflamed synovial tissue of
patients with rheumatoid arthritis
en
refubium.affiliation
Biologie, Chemie, Pharmazie
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000001114
refubium.mycore.transfer
http://www.diss.fu-berlin.de/2003/290/
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000001114
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dcterms.accessRights.openaire
open access