dc.contributor.author
Schlafer, Sebastian
dc.date.accessioned
2018-06-07T21:52:45Z
dc.date.available
2012-02-16T10:45:07.246Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/8554
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-12753
dc.description.abstract
Parodontitis ist die bakteriell bedingte entzündliche Erkrankung aller
Strukturen des Zahnhalteapparates und stellt im fortgeschrittenen Lebensalter
die häufigste Ursache für Zahnverlust dar. Die Mikroflora parodontaler
Läsionen ist der Zahnwurzel als komplexer, strukturell heterogener Biofilm
aufgelagert und umfasst eine Vielzahl nicht oder nur schwer kultivierbarer
Organismen, die erst durch die Einführung DNA-basierter Nachweisverfahren in
den Blickpunkt der Forschung gerückt sind. Filifactor alocis ist ein solches
schwer zu kultivierendes Bakterium, das in den vergangenen Jahren wiederholt
bei Patienten mit chronischer Parodontitis (CP) und generalisierter
aggressiver Parodontitis (GAP) nachgewiesen werden konnte. In der ersten
Studie der vorliegenden Arbeit wurde eine für F. alocis spezifische
Oligonukleotidsonde entwickelt und die Prävalenz des Organismus mit Dot Blot
Hybridisierungen in insgesamt 490 subgingivalen Proben von GAP-Patienten, CP-
Patienten und Parodontitis-resistenten (PR) Patienten untersucht. Darüber
hinaus wurde mit Hilfe von Fluoreszenz in situ Hybridisierung (FISH) und
anschließender Epifluoreszenzmikroskopie die räumliche Verteilung und
strukturelle Anordnung von F. alocis in subgingivalen Biofilmen von GAP-
Patienten analysiert. In der zweiten Studie dieser Arbeit wurde, mit denselben
Methoden, die Prävalenz oraler Selenomonas spp., die in der Vergangenheit
ebenfalls oft mit Parodontalerkrankungen assoziiert worden sind, in 742 Proben
von GAP-, CP- und PR Patienten bestimmt und ebenso die räumliche Anordnung
dieser Organismen in GAP-Biofilmen studiert. F. alocis erwies sich als
hervorragender Markerkeim für parodontale Erkrankungen. Der Organismus konnte
bei einem Großteil der CP- und GAP-Patienten detektiert werden und wies
zugleich eine ausgesprochen niedrige Prävalenz in der PR Gruppe auf. Auch die
mikroskopische Untersuchung subgingivaler Biofilme von GAP-Patienten ließ auf
eine entscheidende Rolle von F. alocis bei der Pathogenese von
Parodontalerkrankungen schließen. Der Organismus siedelte vornehmlich in der
Tiefe der parodontalen Läsion in enger Nähe zur Wirtsabwehr und war, in
Assoziation mit anderen Parodontalkeimen, an zahlreichen Formationen
beteiligt, die eine strukturelle Organisation des Biofilms widerspiegelten.
Die Prävalenz von Selenomonas spp. dagegen war nicht signifikant mit dem
Vorliegen von Parodontalerkrankungen korreliert. FISH und die anschließende
epifluoreszenzmikroskopische Analyse von GAP-Biofilmen zeigten jedoch, dass
Selenomonas spp., wenn sie in einer Probe dargestellt werden konnten, oft in
großer Zahl auftraten und in diesen Fällen einen wichtigen Beitrag zur
Biofilmarchitektur leisteten. In der dritten Studie dieser Arbeit wurden
Biopsien boviner Dermatitis digitalis (DD), einer entzündlich ulzerierenden
Biofilmerkrankung der Rinderklaue, untersucht. Guggenheimella bovis, ein nur
selten in DD-Läsionen nachzuweisendes Bakterium, konnte mit Hilfe von FISH
tief im Gewebe, als Pionierkeim in einigem Abstand von der voranschreitenden
bakteriellen Front, dargestellt werden. Die vorliegende Arbeit verdeutlicht
eindrucksvoll den Wert einer kombiniert epidemiologischen und mikroskopischen
Analyse der Beteiligung putativer Pathogene für das Studium von
Biofilmerkrankungen.
de
dc.description.abstract
Periodontitis is an inflammatory disease of bacterial aetiology that affects
all structures supporting and anchoring the tooth. In the adult population,
periodontitis represents the most frequent cause of tooth loss. The microflora
in periodontal lesions forms complex, structurally heterogeneous biofilms on
the root surface of affected teeth and comprises a multitude of fastidious and
as yet uncultured bacteria. Identification of these organisms was only made
possible by the advent of culture-independent DNA-based techniques. Filifactor
alocis is a fastidious, Gram-positive rod and was repeatedly detected in
patients suffering from chronic periodontitis (CP) and generalized aggressive
periodontitis (GAP) in recent years. For the first study of the present
dissertation, a species-specific oligonucleotide probe was designed, and dot
blot hybridizations were performed to determine the prevalence of F. alocis in
a total of 490 subgingival samples from GAP patients, CP patients and
periodontitis-resistant (PR) patients. Furthermore, fluorescence in situ
hybridization (FISH) and subsequent epifluorescence microscopy were used to
analyse the spatial distribution and structural arrangement of F. alocis in
subgingival biofilms from GAP patients. In the second study, identical methods
were employed to determine the prevalence of oral Selenomonas spp., regarded
as candidate periodontal pathogens by some authors, in 742 samples from GAP,
CP and PR patients. Moreover, the structural arrangement of these organisms in
GAP biofilms was studied. F. alocis proved to be an excellent marker organism
for periodontal disease. The species could be detected in the majority of CP
and GAP patients and had an extremely low prevalence in the PR group. The
microscopic analysis of subgingival biofilms from GAP patients suggested an
important role of F. alocis in the pathogenesis of periodontal disease. The
organism predominantly colonized the depth of periodontal pockets and
contributed to numerous bacterial formations that reflect a structural
organization of the biofilms. In contrast, the prevalence of Selenomonas spp.
was not correlated with periodontal disease. However, FISH and subsequent
microscopic analysis of GAP biofilms showed that, at least in some cases,
Selenomonas spp. appeared in large numbers and made a relevant contribution to
biofilm architecture. In the third study of the present work, biopsies from
digital dermatitis (DD) lesions, an ulcerative inflammatory bovine foot
disease, were analysed. With the help of FISH, Guggenheimella bovis, a Gram-
positive coccoid rod that is only seldom detected in DD-lesions, could be
visualized deep inside the tissue as a pioneer organism way ahead of the
advancing bacterial front. The present work clearly demonstrates the
advantages of a combined epidemiological and microscopic approach for the
study of polymicrobial biofilm diseases.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
digital dermatitis
dc.subject
dot blot hybridization
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Die Beteiligung ausgewählter putativer Pathogene an Parodontitis und boviner
Dermatitis digitalis
dc.contributor.contact
sebastian.schlafer@hotmail.de
dc.contributor.firstReferee
PD Dr. med. Annette Moter
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. sc. med. Wolfgang Presber
dc.contributor.furtherReferee
PD Dr. med. Dirk Theegarten
dc.date.accepted
2012-02-24
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000035638-5
dc.title.subtitle
molekulare Epidemiologie und räumliche Verteilung in Biofilmen
dc.title.translated
The role of selected putative pathogens in periodontitis and bovine digital
dermatitis
en
dc.title.translatedsubtitle
molecular epidemiology and spatial distribution in biofilms
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000035638
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000012376
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access