Anti-CD22-vermittelte Änderung der Expression von Adhäsionsmolekülen und des Migrationsverhaltens von B-Lymphozyten bei SLE-Patienten im Vergleich zu gesunden Probanden

Abstract

Epratuzumab, ein humanisierter, monoklonaler Anti-CD22-Antikörper führte in klinischen Studien bereits zu einer reduzierten Krankheitsaktivität bei SLE- Patienten und repräsentiert somit eine potentielle neue Therapieoption des SLE. In diesem Zusammenhang wurde außerdem eine Reduktion von B-Zellen im peripheren Blut beschrieben. In der folgenden Dissertation wird der Effekt von Epratuzumab hinsichtlich der Expression und Funktionalität von Rezeptoren der B-Zell-Migration in vitro mit Hilfe der Durchflusszytometrie und Transmigrationsversuchen untersucht. Nach Inkubation des Anti-CD22-Antikörpers konnte eine reduzierte Expression von CD62L und β7-Integrin auf CD27- B-Zellen von gesunden Probanden und von SLE-Patienten festgestellt werden. Des weiteren führte die Inkubation mit Epratuzumab bei B-Zellen gesunder Probanden zu einer erhöhten Migration gegenüber allen getesteten Chemokinen (CXCL9, CXCL10, CXCL11, CXCL12, CXCL13), während bei SLE-Patienten eine Steigerung nur gegenüber CXCL12 zu verzeichnen war. Die Subpopulation der CD27- IgD+ naiven B-Zellen wies dabei jeweils die höchste Migrationszunahme auf. Außerdem konnte eine Steigerung der Chemokin-unabhängigen, spontanen Migrationsrate aller B-Zellen, sowohl bei gesunden Probanden als auch bei SLE-Patienten, nach Epratuzumab Inkubation nachgewiesen werden. Somit stellt des veränderte Zelladhäsions- und Migrationsverhalten einen möglichen Wirkmechanismus von Epratuzumab dar.

Epratuzumab, a humanized monoclonal antibody targeting CD22 has reduced disease activity in SLE patients in clinical studies and represents a potential new therapeutic agent for the treatment of SLE. Further, a reduction in peripheral blood B lymphocytes has been described after epratuzumab treatment. Therefore this dissertation analyzes the influence of epratuzumab on expression and functionality of receptors of B cell migration in vitro using fluorescence activated cell sorting and a functional migration assay. After incubation with epratuzumab a reduction in expression of CD62L und β7-Integrin on CD27- B lymphocytes from healthy donors and SLE patients was found. In addition the incubation led to an elevated migration of B lymphocytes from healthy donors towards all chemokines (CXCL9, CXCL10, CXCL11, CXCL12, CXCL13). In contrast B cells from SLE patients only showed an elevated migration towards CXCL12. In both groups the highest increase was seen in CD27- IgD+ naive B lymphocytes. Finally epratuzumab increased chemokine- independent, spontaneous migration of all b cells harvested from healthy donors as well as from SLE patients. Therefore the change in cell adhesion and migrational behavior might be a possible mechanism of action of epratuzumab.