Verlauf der Muskeldystrophie bei der Dysferlin-defizienten SJL/JMaus

Abstract

Einleitung: Die SJL/J-Maus hat eine Splice Site Mutation im Dysf und dient daher als Tiermodell für die Gliedergürtelmuskeldystrophie 2B (LGMD 2B). Ziel der Untersuchung: Wir wollten eine detaillierte klinische und histologische Charakterisierung dieses Mausmodells vornehmen und Alter bei Krankheitsbeginn, klinische Progression und histopathologische Veränderungen in Skelettmuskel und Herz beschreiben. Material und Methoden: Die SJL/J-Mäuse verschiedenen Alters wurden untersucht und mit gleichaltrigen C57BL/6-Kontrollen verglichen. Die klinische Untersuchung wurde gemäß eines modifizierten SHIRPA-Protokolls durchgeführt. Biopsien aus Herz- und Skelettmuskel wurden entnommen, gefärbt und ausgewertet. Das Amyloid wurde immunhistologisch untersucht und mittels Western Blot bestätigt. In einer Interventionsstudie wurde die Gabe von Anti-C5-Antikörpern mit IgG-Isotypen-Kontrolle und Albumin verglichen. Ergebnisse: Die klinischen Tests ermöglichten keine sichere Differenzierung zwischen kranken und gesunden Tieren. In der Histologie zeigten 14 - 20 Wochen alte SJL/J-Mäuse wenig pathologische Merkmale. Die 30 - 34 Wochen alten SJL/J-Mäuse wiesen alle Dystrophiezeichen in hohen Zahlen auf. Einige Mäuse entwickelten Amyloidablagerungen in den Herzschnitten, welches als AA-Amyloid charakterisiert wurde. Die Kontrollen zeigten keine myopathologischen Zeichen. Der Interventionsversuch ergab signifikant weniger Nekrosen in der Anti-C5-AK- Gruppe als in der Albumin-Gruppe. Diskussion: Zwischen der 18. und 28. Lebenswoche der SJL/J-Maus sind die histologischen Parameter geeignet, die Progression der Muskeldystrophie zu monitoren. Klinische Tests waren zu allen Zeitpunkten nicht zuverlässig. Bei älteren Tieren sind die Komorbiditäten so ausgeprägt, dass ab der 30. Lebenswoche die SJL/J-Maus zur Dysferlin-Forschung ungeeignet ist. Dysferlin-Defizienz scheint eine Amyloidbildung zu begünstigen.

Introduction: SJL/J mice have a splice site mutation in the Dysferlin gene and thus serve as an animal model for limb girdle muscular dystrophy type 2B (LGMD 2B). Aim: We wanted to make a detailed clinical and histopathological characterization of the SJL/J mouse model determining age at onset, clinical progression and histopathological changes in skeletal muscle and heart. Material and Methods: SJL/J mice at different ages were compared to age- matched C57BL/6 controls. Clinical tests were conducted according to a modified SHIRPA-Protocol. Biopsies were taken of heart and quadriceps, stained and characterized morphologically. The amyloid was examined immunohistologically, results confirmed via Western blot. An interventional trial comparing the effects of anti-C5-antibodies with those of IgG-isotype control and albumin was performed. Results: The clinical tests did not allow discrimination between healthy and affected animals. In muscle histology young SJL/J mice showed little pathological signs. The older SJL/J mice´s sections displayed in abundance all characteristics of a dystrophic muscle. In some animals amyloid was found in heart sections, which was characterized as AAamyloid. Controls showed no myopathological signs. Mice treated with anti-C5-antibodies showed significantly less necrotic fibres than those treated with albumin. Discussion: Between weeks 18 - 28 of age histologic markers are suitable to monitor muscle dystrophy progression in SJL/J mice. Clinical tests were not reliable at these times. Older animals display pronounced comorbidities that make them unsuitable for further dystrophy research. Dysferlin deficiency seems to promote formation of amyloid.