dc.contributor.author
Tait, Danilo
dc.date.accessioned
2018-06-07T15:10:24Z
dc.date.available
2000-07-12T00:00:00.649Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/684
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-4886
dc.description
### Title
### Table of contents
### A. Abstract 1
### B. Introduction 3
### C. Aim of the project 14
### D. Materials and Methods 15
### E. Results 46
### F. Discussion 73
### G. References 80
### H. Acknowledgments 95
dc.description.abstract
Machado-Joseph disease (MJD), also called spinocerebellar ataxia 3 (SCA3), is
a progressive inherited degenerative disorder. The disease is autosomal
dominant and the gene (MJD1) has been mapped to chromosome 14q24.3-q32.1. An
unstable expansion of CAG repeats in the MJD1 gene, translated in a
polyglutamine stretch at the protein level, has been discovered to be the
causative mutation. The highly polymorphic CAG repeat is normally 12-40
repeats in length and is expanded to 55-84 repeat units in affected
individuals. Despite the demonstration that an expanded polyglutamine sequence
at protein level leads to cell death, the physiological function of the wild-
type ataxin-3 protein, remains unknown.
To gain insight into the function of the normal protein, I have studied the
cellular localisation of ataxin-3 by immunofluorescence in two different
mammalian cell lines (COS-7 and Neuroblastoma cells).
To determine whether protein aggregation is also important for the
pathomechanism in MJD, I have performed expression studies with the ataxin-3
protein containing glutamine repeats of different length in a COS-7 cell
culture system.Moreover, I have analysed the formation of polyglutamine
aggregates in vitro by electron microscopy (EM), and by cellulose acetate
filter assay (CAFA).
de
dc.description.abstract
Die Machado-Joseph Krankheit, auch spinocerebelläre Ataxie 3 (SCA3) genannt,
ist eine erbliche degenerative Erkrankung. Die Krankheit ist autosomal
dominant und das Gen (MJD1) wurde auf Chromosom 14q24.3-32.1 kartiert. Eine
instabile Verlängerung von CAG Wiederholungen im MJD1 Gen, im Protein
translatiert als ein Polyglutamin-Strang, wurde als ursächliche Mutation
erkannt. Die hochpolymorphe CAG Wiederholung ist normalerweise 12-40
Wiederholungen lang und bei Patienten auf 55-84 Wiederholungen erweitert.
Obwohl gezeigt worden ist, daß die verlängerte Polyglutamin-Sequenz im Protein
zum Zelltod führt, ist die physiologische Funktion des wild´typischen Ataxin-3
unbekannt.
Um Einsicht in die physiologische Funktion des Proteins zu erhalten, habe ich
die zelluläre Lokalisation von Ataxin-3 in zwei Säugetier-Zelllinien (COS-7
und Neuroblastoma-Zellen) durch Immunofluoreszenz untersucht.
Um zu bestimmen, ob die Proteinaggregation auch für den Pathomechanismus der
MJD wichtig ist, habe ich Expressionsstudien mit Ataxin-3 Proteinen
verschiedener Länge der Polyglutamin-Wiederholungen in einer COS-7 Zellkultur
durchgeführt. Weiterhin habe ich die Bildung von Polyglutamin-Aggregaten in
vitro durch Elektronenmikroskopie (EM) und Celluloseacetat-Filterassay (CAFA)
untersucht.
de
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
nuclear matrix
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::570 Biowissenschaften; Biologie::570 Biowissenschaften; Biologie
dc.title
Subcellular localisation of ataxin-3 protein and analysis of its aggregates in
vitro and in cell culture systems.
dc.contributor.firstReferee
Professor Hans Lehrach
dc.contributor.furtherReferee
Professor Volker Erdmann
dc.date.accepted
2000-05-03
dc.date.embargoEnd
2000-08-24
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-2000000697
dc.title.translated
Subzelluläre Lokalisierung des Ataxin-3 Proteins und Aggregatenanalysen in
vitro und in Zellkultursystemen
de
refubium.affiliation
Biologie, Chemie, Pharmazie
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000000338
refubium.mycore.transfer
http://www.diss.fu-berlin.de/2000/69/
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000000338
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access