dc.contributor.author
Röhner, Eric
dc.date.accessioned
2018-06-07T19:44:08Z
dc.date.available
2009-02-19T11:26:47.170Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/6375
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-10574
dc.description.abstract
Die Bedeutung von bakteriellen Infektionen und Virulenzfaktoren in der
Ätiologie der Rheumatoiden Arthritis (RA) werden zunehmend diskutiert. In der
vorliegenden Arbeit wurde die Bedeutung von oralpathogenen Bakterien als eine
Möglichkeit in der Pathogenese von entzündlichen Gelenkerkrankungen
untersucht. Patienten mit einer Parodontitis haben ein höheres Risiko eine RA
zu bekommen als gesunde Personen und vice versa. P. gingivalis besitzt die
Fähigkeit, IgM- RF zu induzieren und mittels seines Enzymes PAD Proteine zu
citrullinieren. Patienten mit einer RA haben einen signifikant höheren AK-
Titer gegen P. gingivalis im Blut als gesunde Personen. Dabei korreliert die
Höhe des P. gingivalis- AK- Titers mit der Höhe des AK- Titers gegen
citrullinierte Proteine. Humane Chondrozyten wurden aus Gelenken isoliert, als
Monolayer kultiviert und mit P. gingivalis infiziert. Die Adhäsion von P.
gingivalis an humane Chondrozyten wurde mittels Scanning-
Elektronenmikroskopie (SEM) dargestellt. Eine mögliche Invasion von P.
gingivalis in humane Chondrozyten wurde lasersmikroskopisch sowie mittels
Invasionsassays untersucht. Veränderungen des Zellzyklus der infizierten
Chondrozyten wurden mittels Durchflusszytometrie (FACS) analysiert. Die
Apoptose der infizierten Chondrozyten wurde mittels Terminale- Desoxyribosyl-
Transferase mediated dUTP Nick End Labeling (TUNEL)- Assays sowie der Caspase
3- Western- Blot- Analyse dargestellt. Abschließend wurde die Zellnekrose nach
Infektion mit P. gingivalis mittels Bestimmung der Laktatdehydrogenase (LDH)-
Konzentration der infizierten Zellen untersucht. Die Ergebnisse der
vorliegenden Arbeit zeigten eine Adhäsion und Interaktion von P. gingivalis an
bzw. mit humanen Chondrozyten. Das Invasionsassay und die konfokale
Lasermikroskopie bestätigten eine Invasion von P. gingivalis in humane
Chondrozyten. Die FACS- Analyse zeigte nach Infektion mit P. gingivalis eine
prozentuale Zunahme der Chondrozyten in der G1- Phase und eine prozentuale
Abnahme der infizierten Zellen in der S- Phase und in der G2/ M- Phase.
Mittels TUNEL- Assays und Caspase 3- Western- Blot- Verfahrens konnte eine
signifikante Apoptose infizierter Chondrozyten nachgewiesen werden. Die
Untersuchung der LDH- Konzentration zeigte keinen LDH- Anstieg nach 2-
stündiger Infektion mit P. gingivalis, jedoch war nach 4 h und 6 h eine
Zunahme der LDH- Konzentration zu verzeichnen. Zusammenfassend unterstützen
unsere Daten die Hypothese einer möglichen Assoziation zwischen der
Parodontitis und der RA.
de
dc.description.abstract
A role of bacterial infections in the pathogenesis of rheumatoid arthritis
(RA) has been suggested. P. gingivalis, a Gram-negative, anaerobic rod, is one
of the major pathogens associated with periodontal disease (PD). The present
study examines P. gingivalis infection and effects on cell cycle progression
and apoptosis of human articular chondrocytes. Methods. Primary human
chondrocytes cultured in monolayers were challenged with P. gingivalis.
Infection and invasion of P. gingivalis into chondrocytes was analyzed by
scanning electron microscopy (SEM), double immunofluorescence and by
antibiotic protection and invasion assay. Cell cycle progression of infected
chondrocytes was evaluated by flow cytometry. Also, cell apoptosis was
visualized by terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end
labeling (TUNEL) of DNA strand breaks and by Western blot analysis. Results.
Data revealed that P. gingivalis was able to adhere and infect primary human
chondrocytes. Following chondrocyte infection intracellular localization of P.
gingivalis was noted. Flow cytometry analyses demonstrated affected cell cycle
progression, with an increase of G1 phase and decrease of G2 phase post-
infection. In addition, increased apoptosis of P. gingivalis infected
chondrocytes was visualized by TUNEL assay as well as by an up-regulation of
caspase-3 protein expression. Conclusion. The present data demonstrate that P.
gingivalis infects primary human chondrocytes and affects cellular responses,
which might contribute to the tissue damage seen in the pathogenesis of RA.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Einfluss von Porphyromonas gingivalis auf primäre humane Chondrozyten, in
vitro
dc.contributor.contact
eric.roehner@charite.de
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. med. F. Buttgereit
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. B. Manger, Prof. Dr. med. T. Kocher
dc.date.accepted
2009-03-27
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000008497-2
dc.title.translated
Effects of Porphyromonas gingivalis on Cell Cycle Progression and Apoptosis of
Primary Human Chondrocytes
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000008497
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000005211
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access