dc.contributor.author
Kohlhardt-Floehr, Cornelia Elisabeth
dc.date.accessioned
2018-06-07T19:29:48Z
dc.date.available
2010-11-16T08:31:36.417Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/6157
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-10356
dc.description.abstract
Aufgabe der vorliegenden Arbeit war es, die Substanz Usninsäure aus
chilenischen Flechten hinsichtlich ihrer Wirkungsweise unter
UV-B-Lichtbestrahlung im Zellkulturmodell zu erforschen. Zunächst wurden
Untersuchungen zur Dunkeltoxizität der Usninsäure auf menschliche lymphoide
Zellen (Jurkat-Zellen) durchgeführt. Die Zellen wurden nach Inkubation mit
verschiedenen Usninsäurekonzentrationen und variierten Inkubationszeiten auf
direkte Membranzytotoxizität geprüft und ebenfalls wurde die metabolische
Aktivität bestimmt. In einem Konzentrationsbereich von 1x10-8 M bis 1x10-4 M
Usninsäure ließ sich keine Dunkeltoxizität für die eingesetzten Jurkat-Zellen
ermitteln. Im Mittelpunkt der experimentellen Arbeit stand außerdem die
Erforschung der Usninsäurewirkung unter verschiedenen UV-B-Bestrahlungsdosen
hinsichtlich eines antioxidativen oder prooxidativen Effekts. Hierzu kamen
unterschiedliche UV-B-Dosen bei unterschiedlichen Usninsäurekonzentrationen
zum Einsatz. Zusätzlich sollte durch weitere Variation der Ausgangsbedingungen
wie Inkubationszeit und Umgebungstemperatur im ersten Teil untersucht werden,
ob die von den Zellen akkumulierte Usninsäure dabei ihre Wirkungsweise
verändert. Zur Beurteilung des Effektes wurden bei den Experimenten mit
Jurkat-Zellen der Eosintest zur Ermittelung der prozentualen Überlebensrate
und der XTT zur photometrischen Bestimmung der metabolischen Aktivität
eingesetzt. Es hat sich gezeigt, dass die mit Usninsäure in einer
Konzentration von 1x10-8 M bis 1x10-6 M inkubierten Zellen bei UV-B-Dosen von
20 – 1000 mJ/cm² eine höhere Überlebensrate und einen besseren Metabolismus
aufwiesen, als die Zellen, die nicht mit Usninsäure inkubiert worden, aber
gleichen UV-B-Bestrahlungsdosen ausgesetzt waren. Dies kann auf antioxidativen
Eigenschaften der Usninsäure zurückgeführt werden. Weiterhin wurden die
Jurkat-Zellen mit 1x10-4 M Usninsäure inkubiert und mit UV-B-Dosen von 1 J/cm²
bis 14 J/cm² bestrahlt. Auch hier kam der Eosintest zur Ermittelung der
prozentualen Überlebensrate und der XTT zur photometrischen Bestimmung der
metabolischen Aktivität zum Einsatz. Die Jurkat-Zellen wiesen eine verringerte
Überlebensrate sowie einen verminderten Metabolismus im Vergleich zu Zellen in
Medium ohne Zusätze auf, so dass ein prooxidativer Effekt der Usninsäure
anzunehmen ist. Im zweiten Teil der Promotionsarbeit wurden Untersuchungen zur
Zytotoxizität der Usninsäure auf menschliche Keratinozyten (HaCaT-Zellen)
durchgeführt. Zur Ermittlung einer Toxizität diente der ViaLight Plus Cell
Proliferation and Cytotoxicity BioAssay (Vialight-Assay), mit dem die
metabolische Aktivität der Zellen bestimmt wird. Zusätzlich wurde diese
Methode mit dem carboxy-DC-FDA-Assay (DC-FDA-Assay) kombiniert. Dieser Assay
zeigt mittels Fluoreszenz die intrazellulär, durch UV-Bestrahlung
entstandenen, Radikale an. Eine anti- oder prooxidative Wirkung der Usninsäure
konnte daher anhand der gemessenen Radikale nachgewiesen werden. Die
Kombination mit dem Vialight-Assay diente dazu, diejenige Konzentration zu
finden, bei der die eingesetzten Zellen uneingeschränkt metabolisierten und
die Radikale durch die Usninsäure gelöscht wurden. Diese Konzentration lag bei
den eingesetzten HaCaT-Zellen bei 1x10-8 M Usninsäure. Die Untersuchungen zur
Substanz Usninsäure stellen einen Anfang zur Erforschung natürlicher
Substanzen aus Flechten im Hinblick auf antioxidative und prooxidative
Eigenschaften unter UV-B-Lichtbestrahlung dar. Weitere intensive Studien zu
dieser und ähnlichen Substanzen sind nötig, um das gesamte Wirkungsspektrum zu
erfassen und um diese am Menschen anwenden zu können.
de
dc.description.abstract
Natural compounds which can behave as antioxidants and protect against UV-
radiation may well have medical and cosmetic value. Usnic acid, which can be
obtained from lichens offer such a potential. The latter is one of the best
known and reviewed compounds present in lichens and exhibits many properties
of value such as antibiotic, antitumor and UV-filter-effects. We report
studies of the potential antioxidant and prooxidant activity of usnic acid
extracted from Xanthoparmelia farinosa (Vainio) using a human lymphocyte cell
line (Jurkat-cells) under UV-B-irradiation. Cell survival and cell metabolism
were determined using different conditions such as usnic acid concentration
and UV-B-dose. Compared to the controls the cells incubated with usnic acid in
concentrations of 1x10-8 and 1x10-6 M showed a higher cell survival and a
normal metabolism under low doses of UV-B-light up to 0,1 J/cm². When both
higher UV-B-doses (up to 14 J/cm²) and higher concentrations of usnic acid
(1x10-4 M) where used, the opposite effect was observed It is concluded that
these effects are due to bifunctional (a switch of) antioxidative-prooxidative
behaviour of usnic acid under UV-B-irradiation.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
UVB-Irradiation
dc.subject
human lymphoid cells
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Prooxidatives und antioxidatives Verhalten der Usninsäure unter
Ultraviolet-B-Lichtbestrahlung
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. Dr.-Ing. J. Lademann
dc.contributor.furtherReferee
Priv.-Doz. Dr. U.-C. Hipler, Prof. Dr. med. Prof. h.c. mult. F. Boehm
dc.date.accepted
2010-11-19
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000019465-9
dc.title.subtitle
die Wirkung auf menschliche lymphoide Zellen
dc.title.translated
Prooxidant and antioxidant behaviour of usnic acid from lichens under UVB-
light irradiation
en
dc.title.translatedsubtitle
studies on human cells
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000019465
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000008406
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access