dc.contributor.author
Hewing, Bernd
dc.date.accessioned
2018-06-07T19:01:09Z
dc.date.available
2008-07-15T08:50:07.733Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/5663
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-9862
dc.description.abstract
Die endotheliale NO-Synthase (eNOS) gilt als Schlüsselenzym der vaskulären
Homöostase. Neben seiner Bedeutung als potenter endogener Vasodilatator ist
Stickstoffmonoxid (NO), das Produkt der eNOS, für eine Reihe gefäßprotektiver
Eigenschaften verantwortlich. Während für die humane iNOS und nNOS eine Reihe
von alternativen Splice-Varianten beschrieben sind, existiert bisher kein
Nachweis alternativ gespleißter Isoformen für die eNOS. Im Rahmen der hier
vorliegenden Arbeit konnten erstmals alternative Splice-Varianten der humanen
eNOS nachgewiesen werden. Die drei neuen Splice-Varianten - eNOS13A, eNOS13B
und eNOS13C - entsprechen von Exon 1 bis 13 der humanen eNOS. An das Exon 13
schließt sich jeweils ein neues Exon bestehend aus Intron 13 Sequenzen an,
gefolgt von einem Poly-A-Schwanz. Im Falle einer Translation der Splice-
Varianten entstehen verkürzte eNOS-Proteine, denen große Teile der Reduktase-
Domäne fehlen und die keine eigene eNOS-Aktivität besitzen. Die Koexpression
von eNOS mit eNOS13A in COS-7 Zellen führte zu einer Abnahme der eNOS-
Aktivität durch die Bildung von Heterodimeren. Die Stabilisierung der full-
length eNOS-Proteinmenge nach Proteasominhibition deutet auf einen vorzeitigen
Abbau der Heterodimere über das Ubiquitin-Proteasom-System hin. Die drei eNOS
Splice-Varianten werden nativ in verschiedenen Endothelzellen und in einer
Vielzahl humaner Gewebe exprimiert. Eine besonders hohe Expression an eNOS13A-
mRNA konnte in humanem Testis-Gewebe nachgewiesen werden. Die Ergebnisse
dieser Arbeit zeigen einen neuartigen potentiellen Mechanismus zur Regulation
der eNOS-Aktivität und NO-Produktion über dominant-negative Splice-Varianten
der humanen eNOS.
de
dc.description.abstract
NO, the product of endothelial NOS (eNOS), is a major regulator of vascular
homeostasis and a critical factor in preventing cardiovascular diseases.
Whereas for human iNOS and nNOS a number of different splice variants have
been described, no such splice isoforms are known for eNOS so far. This study
describes three novel splice variants for human eNOS. These splice variants -
termed eNOS13A, eNOS13B and eNOS13C - share the first 13 exons of human eNOS
followed by novel overlapping exons containing intron 13 sequences. All three
splice variants share the same polyadenylation signal followed by a poly-A
tail. When translated, these splice-variants would result in truncated eNOS
proteins lacking eNOS activity. Coexpression of full-length and eNOS13A in
COS-7 cells diminished eNOS enzyme activity by formation of heterodimers.
Coexpression in COS-7 cells with inhibition of the proteasome suggest an
enhanced degradation of the heterodimers by the ubiquitin-proteasome-system.
All three splice-variants were expressed in different endothelial cells and
various human tissues. Expression of eNOS13A was particularly high in human
testis. Taken together, these data suggest a new mechanism for the regulation
of eNOS activity and NO production by dominant-negative splice variants of
human eNOS.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
alternative splicing
dc.subject
nitric oxide synthase
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Alternatives Splicing im Intron 13 der humanen eNOS: ein potentieller
Mechanismus für die Regulation der eNOS-Aktivität
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. med. K. Stangl
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. M. Endres
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. S. Dimmeler
dc.date.accepted
2008-09-19
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000004248-1
dc.title.translated
Alternative splicing in intron 13 of the human eNOS gene: a potential
mechanism for regulating eNOS activity
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000004248
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000003970
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access