dc.contributor.author
Rheinfeld, Svenja
dc.date.accessioned
2018-06-07T18:11:11Z
dc.date.available
2016-01-21T10:14:55.801Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/4722
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-8922
dc.description.abstract
Das Ziel dieser Arbeit war es, die Spermien der drei Nebenhodenschwanzsegmente
E7 bis E9, modifiziert nach Fouchécourt et al. (2000), hinsichtlich ihrer
Motilität, Tiefgefrierbarkeit und Haltbarkeit zu untersuchen. Außerdem wurde
die Spermienkonzentration und -gesamtzahl in den Nebenhodenschwanzregionen
bestimmt. Die Gewinnung der Nebenhodenschwanzspermien von zehn, drei bis
vierzehnjährigen, Hengsten erfolgte durch retrogrades Spülen (E9) und Slicing
(E7, E8). Der Unterschied in der Spermienkonzentration und -gesamtzahl
zwischen den drei Regionen war hochsignifikant. Es wurde ein Anstieg der
Spermienkonzentration und -gesamtzahl von E7 bis E9 festgestellt. Im Vergleich
der zwei Methoden zur Dichtebestimmung, Zählkammer und NucleoCounter® SP-100,
ergab sich eine starke Korrelation beider Verfahren. Die Verdünnung der
Nebenhodenschwanzspermien mit Gent-Verdünner, führte zu einer Steigerung der
Beweglichkeit, im Vergleich zur Verdünnung mit EquiPro™. Die Motilität der
Nebenhodenschwanzspermien variierte je nach Hengst stark. Eine Zunahme der
Beweglichkeit von E7 bis E9 war festzustellen. Verglich man die subjektive und
objektive Motilitätsanalyse, durch Schätzung und CASA, miteinander, so ergab
sich nur für die Beweglichkeit der Spermien von E9 eine positive Korrelation.
Wurden die Nebenhodenschwanzspermien, nach Verdünnung, über 96 Stunden kühl
gelagert, so ergab sich eine starke Reduktion der Beweglichkeit in den ersten
24 Stunden, aber auch nach 96 Stunden waren noch motile Spermien vorhanden.
Die Nebenhodenschwanzspermien wurde mit vier verschiedenen Einfrierprogrammen,
mit und ohne vorherige Kühlung sowie mittels Einfrierautomat oder
Schwimmrampe, tiefgefroren und die Ergebnisse verglichen. Nach
Kryokonservierung wurde eine stark verminderte Beweglichkeit und
Geschwindigkeit der Nebenhodenschwanzspermien aller drei Segmente ungeachtet
der verwendeten Einfriertechnik festgestellt. Auch die Tiefgefrierbarkeit der
Nebenhodenschwanzspermien war individuell sehr verschieden. Die kühle Lagerung
der aufgetauten Spermien über 48 Stunden, führte wiederum zu einer deutlichen
Abnahme innerhalb der ersten 24 Stunden. Die Gesamt- und Vorwärtsbeweglichkeit
waren, unabhängig von Nebenhodenschwanzregion und angewandter Einfriertechnik,
zu jedem Zeitpunkt nur sehr gering. Die Spermien von E7 und E8 zeigten
geringere Motilitäts- und Geschwindigkeitswerte, als die von E9. Die Spermien
von E7 und E8, welche mit dem Einfrierprogramm SRS eingefroren wurden, wiesen
die geringste Haltbarkeit auf. Es ist möglich bewegliche Spermien aus dem
Nebenhodenschwanz des Hengstes zu gewinnen, diese aufzubereiten, kühl zu
lagern und tiefzufrieren. Die vier verschiedenen Einfriermethoden mit oder
ohne Kühlung bzw. mit Einfrierautomat oder Styroporbox (Schwimmrampe)
lieferten vergleichbare Ergebnisse.
de
dc.description.abstract
The purpose of the study was to investigate the differences between motility,
freezability and longevity of epididymal sperm, harvested from different
segments of the cauda epididymidis [modificated from Fouchécourt et al.
(2000)]. The sperm concentration and total amount of sperm in the different
segments were determined as well. Epididymal sperm was collected from 10
stallions (age 3 – 14 years) by retrograde flushing (E9) and slicing technique
(E7, E8). Differences in sperm concentration and total amount of sperm between
the 3 cauda segments were significant. The increase in sperm concentration and
sperm amount from the distal to the proximal cauda region E7 to E9 was
remarkable. Sperm concentration was measured by counting chamber and
NucleoCounter® SP-100. Both techniques showed high correlation between the
results obtained. Diluting the epididymal spermatozoa with Gent-extender led
to an increase in motility compared with the motility after dilution with
EquiPro™, but the motility of equine epididymal sperm showed a high individual
variation and increased from segment E7 to E9. Comparing the subjective
estimation and objective sperm analysis by CASA only the motility of the sperm
harvested from E9 showed a positive correlation. The longevity of diluted
epididymal sperm determined over 96 hours yielded a strong reduction of
motility within the first 24 hours, but after 96 hours a small percentage of
spermatozoa was still motile. Cryopreservation was performed using four
different techniques with or without previous cooling and with programmable
freezer or floating rack. Freezing led to a remarkable reduction of motility
and velocity of epididymal sperm from all segments, regardless of the freezing
protocol. The freezability of sperm cells showed high individual variation as
well. After cooled storage of the thawed sperm for 48 hours, the sperm
motility was reduced. Regardless of the duration of storage and freezing
protocol, sperm motility was always low. Spermatozoa, harvested from segment
E7 and E8 were less motile and showed smaller velocity than those from segment
E9. The longevity of thawed sperm from E7 and E8, frozen by freezing protocol
SRS was reduced in comparison to the longevity of sperm frozen with the other
freezing protocols. Collecting, processing, storage and freezing motile sperm
from 3 different segments of the cauda epididymidis after castration of
stallions is possible. Comparing 4 different freezing protocols, with or
without previous cooling by programmable freezer and floating freeze rack,
showed comparable results.
en
dc.format.extent
VII, 177 Seiten
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
semen production
dc.subject
male fertility
dc.subject
laboratory methods
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::630 Landwirtschaft::630 Landwirtschaft und verwandte Bereiche
dc.title
Segmentale Analyse und Tiefgefrierkonservierung von Spermien aus den
Nebenhodenschwanzsegmenten beim Hengst
dc.contributor.firstReferee
Univ. Prof. Dr. Johannes Handler
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. Peter-Henning Clausen
dc.contributor.furtherReferee
Univ. Prof. Dr. Robert Klopfleisch
dc.date.accepted
2015-12-03
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000101077-5
dc.title.translated
Segmental analysis and cryopreservation of equine epididymal sperm from
different segments of the cauda epididymidis
en
refubium.affiliation
Veterinärmedizin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000101077
refubium.note.author
Mensch und Buch Verlag
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000018452
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access