dc.contributor.author
Bolewski, Bianca
dc.date.accessioned
2018-06-07T15:01:57Z
dc.date.available
2012-07-16T11:47:46.802Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/459
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-4662
dc.description.abstract
Eine frühe Diagnose mit einer daraus resultierenden rechtzeitigen Behandlung
einer Krebserkrankung sind die entscheidenden Schritte für eine verbesserte
Überlebensrate. Eine innovative Strategie stellt die zielgerichtete
Tumordiagnose und -therapie dar. Dabei kommen tumorbindende Moleküle, die
entweder an ein signalgebendes oder therapeutisches Agens gekoppelt werden
können, zum Einsatz. Als Zielstrukturen solcher tumorbindenden Moleküle wurde
in vorliegender Arbeit der Orexinrezeptor 1 (OXR1), ein G-Protein gekoppelter
Rezeptor (GPCR), auf die Eignung als Zielstruktur zur Behandlung von
gastrointestinalen Tumoren hin untersucht. Weiter wurde die endogene
Expression des OXR1 in humanen Tumorzelllinien nachgewiesen und
OXR1-vermittelte Effekte untersucht. In dieser Arbeit konnte das erste Mal an
humanen Gewebeschnitten gezeigt werden, dass der humane OXR1 in 90 % der
Ösophaguskarzinome, und in 86 % der pankreatischen Adenokarzinome und
pankreatischen NETs stark exprimiert war. Darüber hinaus wurde der Rezeptor in
100 % der untersuchten kolorektalen Karzinome immunhistochemisch detektiert.
Insbesondere in 93 % der untersuchten Plattenepithelkarzinome des Ösophagus
wurde eine hohe OXR1 Dichte detektiert, wobei die Expression nicht mit dem
Stadium der Tumorerkrankung der Patienten assoziiert war. Der OXR1 war
ebenfalls im Plattenepithel des gesunden Ösophagus vorhanden, jedoch zeigte
die semi-quantitative Auswertung der Gewebeschnitte, dass die Rezeptordichte
in 70 % der Plattenepithelkarzinome des Ösophagus höher oder mindestens gleich
im Vergleich zum normalen Ösophagus war. Entsprechend wurde auf RNA und
Proteinebene eine Expression des Rezeptors in humanen Tumorzelllinien (in 70 %
der ösophagealen, in 70 % der kolorektalen, in 100 % der pankreatischen
Tumorzelllinien) detektiert. Abschließend ließ der Nachweis des OXR1 in
subkutanen Xenograft-Tumorschnitten auf die Erhaltung des Zielrezeptors im
Mausmodell schließen. Diese Beobachtungen machen den OXR1 zu einem
vielversprechenden Zielrezeptor für die gerichtete Tumordiagnostik und
-therapie. Vorversuche der in vivo Bildgebung im Mausmodell mit NIR
gekoppeltem OXA waren nur in 20 % erfolgreich, was der geringen Stabilität des
nativen OXA zu Grunde liegen könnte. Funktionelle Untersuchungen der OXR1
endogen exprimierenden humanen Tumorzelllinien zeigten keinen Einfluss von OXA
auf das Wachstums- oder Apoptoseverhalten der Zellen. Dies schließt die
Einsetzung des OXA als wachstumshemmendes Therapeutikum aus, unterstützt
jedoch die Anwendung als Leitstruktur für eine gerichtete Tumordiagnostik und
-therapie. Die OXR-vermittelte Signaltransduktion wurde mittels der
Ca2+-Mobilisierung, cAMP Konzentrationsmessung und Internalisierungsversuchen
untersucht, um die Funktionalität der Rezeptoren nachzuweisen. Hierbei konnten
in einigen Tumorzelllinien unterschiedliche OXR1-induzierte Effektorsysteme
nachgewiesen werden, welche auf die Funktionalität der OXR1 hinwiesen.
Zusammenfassend präsentieren die vorliegenden Ergebnisse der funktionellen
Untersuchungen und insbesondere der Expressionsanalysen den OXR1 als eine
vielversprechende molekulare Zielstruktur für die gerichtete Tumordiagnostik
und -therapie in Tumoren des GIT.
de
dc.description.abstract
Early diagnosis and therapy are essential for improving the survival rate of
cancer patients. One innovative strategy is demonstrated by targeted
tumordiagnosis and -therapy. Here key structure binding molecules, which bind
specifically to their target, are labeled either to a signal-producing or
therapeutic agent. This work investigated the evaluation of the orexinreceptor
1 (OXR1), a G protein-coupled receptor (GPCRs), for the intended use as a
target structure of gastrointestinal tumors. In addition human tumor cell
lines, endogenously expressing OXR1, were identified to study OXR1 mediated
effects. This work demonstrated for the first time the expression of the OXR1
in 90% of the human esophageal tumor tissue samples and in 86% of the pancreas
adenocarcinoma und pancreatic NETs which were investigated. Moreover in 100%
of the colorectal carcinoma this receptor was detected by immunhistochemistry.
Notably, 93% of the investigated esophageal squamous cell carcinoma (ESCC)
represented a high density of OXR1, while the OXR1 expression did not
correlate with the tumor stage. The OXR1 expression was also found in normal
esophageal tissue, however 70% of the esophageal squamous cell carcinoma
showed a higher or equal expression profile in comparison to the normal
tissue. Accordingly the receptor could be detected in human tumor cell lines
(in 70% of the esophageal, in 70% of the colorectal and in 100% of the
pancreatic tumor cell lines) on RNA and protein levels. Finally, the staining
of subcutaneous Xenograft-tumor slices showed the availability of the
maintaining structure in mouse model. These results demonstrate that OXR1 is a
promising target for targeted tumordiagnosis and -therapy of ESCC and perhaps
pancreatic and colorectal cancer. Preliminary results of in vivo imaging in
mice using NIR labeled OXA were successful only in 20 %, perhaps due to the
low OXA stability. Analyzing the OXR1-mediated effects in human tumor cell
lines endogenously expressing the OXR1, no influence of OXA on proliferation
and apoptosis could be detected. This excludes the use of OXA as anti-
proliferative therapeutic. To show the functionality of the endogenously
expressed receptor, OXR1-induced signaling was reviewed measuring
Ca2+-mobilization, change of intracellular cAMP and ligand internalization.
Some tumor cell lines activated different OXR1-mediated effector systems,
demonstrating a functionally active OXR1 in these cell lines. In conclusion,
the results from the functional- and in particular from the expression-
analysis represents OXR1 as an promising target structure for targeted
tumordiagnosis and -therapy approaches of carcinomas of the gastrointestinal
tract.
en
dc.format.extent
II, 130, X S.
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
Targeted tumordiagnosis and -therapy
dc.subject
in vivo Imaging
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::570 Biowissenschaften; Biologie::572 Biochemie
dc.title
Expression und Funktion des Orexinrezeptors 1 in Tumoren des humanen
Gastrointestinaltrakts
dc.contributor.firstReferee
Dr. Carsten Grötzinger
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. Rupert Mutzel
dc.date.accepted
2012-06-22
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000038291-0
dc.title.translated
Expression and function of the orexin receptor 1 in human gastrointestinal
tumors
en
refubium.affiliation
Biologie, Chemie, Pharmazie
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000038291
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000011509
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access