CD47-Expression auf Blutzellen und im Blutplasma bei Autoimmunhämolytischer Anämie und Immunthrombozytopenie

Abstract

Das ubiquitär exprimierte Oberflächenprotein CD47 hat sich in tierexperimentellen Studien als Phagozytoseinhibitor und potentielles Protein der Selbsttoleranz erwiesen. In Experimenten an Knockout-Mäusen konnte gezeigt werden, dass zielzellgebundenes CD47 in der Lage ist, die Phagozytose von Blutzellen durch Makrophagen zu hemmen und damit den Schweregrad von Autoimmunzytopenien zu vermindern. In der vorliegenden Arbeit wurde untersucht, ob CD47 auch beim Menschen Einfluss auf das Ausmaß von Hämolyse und Thrombozytenzerstörung im Rahmen von Autoimmunzytopenien hat. Mittels quantitativer Durchflusszytometrie wurden AIHA-Patienten, ITP-Patienten und Gesunde hinsichtlich ihrer CD47-Mengen auf Erythrozyten, Thrombozyten, Lymphozyten und Granulozyten miteinander verglichen. Es fanden sich sowohl bei AIHA-Patienten als auch ITP-Patienten normale CD47-Expressionslevel. Weiterhin exprimieren Patienten mit aktiver Hämolyse oder Thrombozytenzerstörung nicht weniger CD47 als Patienten in Remission oder Gesunde. Darüber hinaus konnte CD47 in löslicher Form im Blutplasma aller Probanden nachgewiesen werden, ohne dass die Menge des Proteins in Beziehung zur Diagnose oder zum Ausmaß der Zellzerstörung stand. Ein Zusammenhang zwischen CD47-Expression und Schweregrad einer Autoimmunzytopenie, der für den murinen Organismus bereits nachgewiesen wurde, ließ sich somit beim Menschen anhand der Ergebnisse dieser Arbeit nicht belegen. Ein Einfluss von CD47 auf Phagozytoseprozesse im Rahmen von AIHA und ITP kann dennoch nicht ausgeschlossen werden, auch wenn das Protein offenbar eine weniger dominierende Rolle spielt als bis dahin angenommen wurde.

In animal experiments the ubiquitously expressed cell surface protein CD47 has been shown to inhibit phagocytosis and to act as a potential protein of self- tolerance. Experiments on knock-out mice have shown the ability of target cell CD47 to inhibit phagocytosis of bloodcells by macrophages and to decrease the severity of autoimmune cytopenias. This thesis examined, whether CD47 also has an impact on the degree of cell elimination within autoimmune haemolytic anemia (AIHA) and immune thrombocytopenia (ITP) in humans. By means of quantitative flow cytometry patients with AIHA, patients with ITP and healthy blood donors were compared concerning their expression levels of CD47 on RBCs, platelets, lymphocytes and granulocytes. Patients with AIHA and patients with ITP showed normal CD47 expression levels. Additionally, patients with active haemolysis or destruction of platelets do not express less CD47 than patients in remission or healthy blood donors. Furthermore, soluble CD47 was detected in the blood of all subjects, but a correlation between its quantity an the degree of cell destruction could not be demonstrated. Finally, a connection between CD47 expression and severety of autoimmune cytopenias that has been shown for murine organism, could not be proved for humans in this thesis. However, an influence of CD47 on phagocytosis in the context of AIHA and ITP could not be excluded, although the protein seems to play a less important role than was assumed so far.