Metabolic responses and diagnostic advancements in chickens exposed to mixed intestinal parasite infections

Abstract

This thesis reveals the metabolic responses to intestinal nematode infections in highperforming chickens and delineates the development of an effective non-invasive diagnostic tool for the detailed characterisation of infections with significant implications for broader impacts on poultry Management

High-performing chickens of the Lohmann Brown genotype were experimentally infected with both Ascaridia galli and Heterakis gallinarum, which also led to concurrent histomonosis nfections. The birds were necropsied at specific time points after infections, and the liver and plasma were investigated for the metabolic responses to the infections. Notably, this is the first study providing a detailed, time-dependent analysis of the infection-induced metabolic alteration in nematode infected chickens. The identification of key metabolites associated with different infection stages including larval penetration of the mucosa, patency, and reinfection provides a nuanced understanding of the dynamic host-parasite interplay, paving the way for targeted investigations into specific pathways and their functional consequences. This finding prompts a deeper investigation into the trade-offs between immune defence and Overall performance, with implications for breeding programs and management strategies aimed at optimizing both health and productivity in poultry.

The elevated concentrations of amino acids during heightened immune responses at early phase of nematode infection indicated the possible diversion of metabolic resources towards immune response at the expense of performance and productivity. The increased Plasma amino acids were attributed to a potential imbalance in protein secretion and re-absorption in the small intestine. The study further identified altered metabolic pathways, including Arginine proline metabolism which are crucial for collagen synthesis and tissue repair, thus highlighting the importance of amino acids in supporting the defence mechanism during nematode infection. Additionally, the identification of key metabolites like trimethylamine Noxide (TMAO) whose high concentration may indicate the presence of mixed nematode infections, opens up a new perspective for biomarker research. Further exploration into the applicability of TMAO indiverse parasitic situations are encouraged particularly the mechanism of TMAO production and its role in discriminating the status of helminth infections in chicken.

The status of nematodes infection is currently achieved through faecal egg counts which may not always be reliable due to variations in worm fecundity amongst other reasons. An alternative method is to measure anti-ascarid antibodies in chicken plasma. However, this practice may not always meet current welfare standards in poultry production, as it involves an invasive technique for blood collection that also requires licensed experts to perform. Therefore, this thesis further developed a new non-invasive nematode diagnosis based on the measure of worm antigens in chicken faeces.

The development of this coproantigen ELISA as a non-invasive diagnostic tool presents an opportunity for improved parasite management. This novel approach accurately differentiated infected and non-infected chickens for both nematode species, offering a promising noninvasive alternative to faecal egg counts. While showing high diagnostic accuracy for A. galli, further refinement is needed for accuracy and sensitivity to H. gallinarum. Temporal variations among different diagnostic methods highlighted the need for tool-specific selection. The coproantigen ELISA demonstrated superior performance in overall qualitative diagnostics, surpassing other methods. Concurrently, the antibody ELISA showcased an early detection capability, while faecal egg counting emerged as the method most closely correlated with worm burdens, serving as a reliable measure of infection intensity.

In the broader context of existing information, this study advances our understanding of the potential metabolic cost of defence against nematode infections in high-performing chickens. The identified metabolites and pathways not only contribute to the fundamental knowledge of host-parasite interactions but also lay the groundwork for targeted interventions to mitigate the impact of these infections on poultry productivity. The development of innovative noninvasive diagnostic tool adds an applied dimension to the research, providing tangible benefits for poultry producers grappling with the challenges of nematode infections.

Diese Dissertation beschreibt die metabolischen Reaktionen auf intestinale Nematodeninfektionen bei Hochleistungshühnern und skizziert die Entwicklung eines effektiven nicht-invasiven diagnostischen Verfahrens für die detaillierte Charakterisierung von Infektionen mit weitreichenden Auswirkungen auf das Geflügelmanagement.

Hochleistungshühner des Genotyps Lohmann-Brown wurden experimentell mit Ascaridia galli und Heterakis gallinarum infiziert, was auch zu Histomonoseinfektionen führte. Die Tiere wurden zu spezifischen Zeitpunkten nach den Infektionen anhand von Leber- und Plasmaproben auf metabolische Anpassungsreaktionen auf die Infektionen untersucht. Die Studie liefert somit eine detaillierte und zeitabhängige Analyse der infektionsbedingten Stoffwechselveränderungen bei mit Nematoden infizierten Hühnern. Die Identifizierung von Schlüsselmetaboliten, die mit verschiedenen Infektionsstadien in Verbindung gebracht werden, einschließlich des Eindringens der Larven in die Schleimhaut, der Passage und der Reinfektion, ermöglicht ein tieferes Verständnis der dynamischen Wirt-Parasiten-Interaktion und erlaubt somit gehzielte Untersuchungen spezifischer Stoffwechselwege und ihrer Funktionen. Diese Erkenntnisse haben Auswirkungen auf Zuchtprogramme und Managementstrategien, die darauf abzielen, Tiergesundheit und Produktivität in der Geflügelzucht zu optimieren.

Die erhöhten Aminosäurekonzentrationen während der frühen Phase der Nematodeninfekion mit verstärkter Immunantwort deuten auf eine mögliche Umleitung metabolischer Ressourcen auf Kosten von Leistung und Produktivität hin. Die erhöhten Plasmaaminosäurekonzentrationen deuten auf ein mögliches Ungleichgewicht bei der Proteinsekretion und -rückresorption im Dünndarm hin. Die Studie identifizierte weiterhin veränderte Stoffwechselwege, einschließlich des Arginin-Prolin-Stoffwechsels, der für die Kollagensynthese und Gewebereparatur entscheidend ist. Dies unterstreicht die Bedeutung von Aminosäuren bei der Unterstützung der Abwehrmechanismen während der Nematodeninfektion. Darüber hinaus eröffnet die Identifizierung von Schlüsselmetaboliten wie Trimethylamin-N-oxid (TMAO), dessen hohe Konzentration auf das Vorhandensein von Nematodenmischinfektionen hinweisen könnte, eine interessante Perspektive für die Biomarkerforschung. Eine weitere Erforschung der Anwendbarkeit von TMAO in verschiedenen parasitären Fragestellungen sollte insbesondere in Bezug auf den Mechanismus der TMAO-Produktion und seine mögliche Rolle bei der Unterscheidung des Status von Helmintheninfektionen bei Hühnern erfolgen.

Der Status der Nematodeninfektion wird derzeit durch Eizählungen in den Exkrementen ermittelt, die aufgrund von Variationen in der Eizahl der Würmer und weieren Gründen nicht immer zuverlässig sind. Eine alternative Methode besteht darin, Anti-Ascariden-Antikörper im Hühnerplasma zu messen. Diese Methode ist invasiv und muss die Tierschutznormen in der Geflügelhaltung entsprechen, die Entnahme erfolgt als veterinärmedizinische Maßnahme. Daher wurde im Rahmen dieser Dissertation ein neues, nicht-invasives Diagnoseverfahren entwickelt, das auf der Messung von Wurmantigenen in den Exkreta basiert. Die Entwicklung dieses Copro-Antigen-ELISA als nicht-invasive Diagnosemethode stellt eine Möglichkeit für ein verbessertes Parasitenmanagement dar. Dieser neuartige Ansatz unterscheidet bei beiden Nematodenarten zwischen infizierten und nicht-infizierten Hühnern und bietet eine vielversprechende nicht-invasive Alternative zur Eizählung. Während die Methode für A. galli eine hohe diagnostische Genauigkeit aufweist, muss die Genauigkeit und Empfindlichkeit gegenüber H. gallinarum weiter verfeinert werden. Zeiteffekte, die zwischen den verschiedenen Diagnosemethoden festzustellen waren, verdeutlichen die Notwendigkeit einer sorgfältigen Methodenauswahl. Der Copro-Antigen-ELISA zeigte bei der qualitativen Diagnostik eine hohe Genauigkeit und übertraf die anderen Methoden. Gleichzeitig zeigte der Antikörper-ELISA eine frühzeitige Erkennung einer Nematodeninfektion an, während die Eizählung sich als die Methode herausstellte, die am engsten mit der Wurmlast in den Tieren korrelierte und als zuverlässiges Maß für die Infektionsintensität diente.

Im Kontext der bisherigen Untersuchungen erweitert diese Studie unser Verständnis der potenziellen metabolischen Konsequenzen von Nematodeninfektionen bei Hochleistungshühnern. Die identifizierten Metaboliten und Stoffwechselwege tragen nicht nur zum grundlegenden Verständnis über die Wechselwirkungen zwischen Wirt und Parasiten bei, sondern bilden auch die Grundlage für gezielte Interventionen, um die negativen Auswirkungen einer Nematodeninfektionen auf die Produktivität des Geflügels zu mindern. Die Entwicklung eines innovativen, nicht-invasiven diagnostischen Mittels hat eine hohe Relevanz für die Anwendung und bietet Vorteile für Geflügelproduzenten, die mit den Herausforderungen von Nematodeninfektionen konfrontiert sind.