dc.contributor.author
Schlieben, Patricia
dc.date.accessioned
2018-06-07T14:46:38Z
dc.date.available
2013-07-30T12:01:31.517Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/405
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-4609
dc.description.abstract
Die am häufigsten diagnostizierte Neoplasie der Haut des Hundes ist der kutane
Mastzelltumor (MZT). Entsprechend seinem histologischen Zellbild und dem
verwendeten Grading-System werden zwei bzw. drei unterschiedliche
histologische Grade differenziert. Während Grad 1 bzw. low-grade MZT durch gut
differenzierte monomorphe Tumorzellen charakterisiert sind und weder zur
Metastasierung noch zur Rezidivbildung neigen, enthalten Grad 3 bzw. high-
grade MZT entdifferenzierte, pleomorphe Mastzellen, die häufig metastasieren
und rezidivieren. Obwohl Mastzelltumoren, ähnlich wie Mammatumoren, seit
längerer Zeit im Mittelpunkt der Forschung stehen, sind molekularbiologische
Details, die zu diesem offensichtlichen unterschiedlichen klinischen Verhalten
führen, weitgehend unbekannt. Große Hoffnung wurde auf den Stammzellfaktor-
Rezeptor KIT und sein Protoonkogen c-kit gelegt, dessen Aktivierung in
normalen Mastzellen die Zellproliferation und -reifung sowie die Migration und
Degranulation von Zellen steigert. Die Identifikation von aktivierenden
Mutationen, wie etwa die Tandemduplikation im Exon 11, ließen dementsprechend
einen großen Einfluss auf die Proliferation und Progression von kaninen
Mastzelltumoren vermuten. Der direkte Einfluss der c-kit-Mutation auf das
Proteinexpressionsprofil mutierter MZT-Zellen wurde bislang jedoch noch nicht
analysiert. Darüber hinaus wurden bis heute nur bei circa 12 % aller MZT, bzw.
40 % der Grad 3 MZT entsprechende Mutationen identifiziert. Dies wiederum
führt zu der Frage, welche anderen molekularbiologischen Veränderungen das
aggressive klinische Verhalten der höhergradigen MZT verursachen. In der
vorliegenden Studie wurden deshalb die Proteinexpressionsmuster kaniner
kutaner MZT mit unterschiedlichem histologischen Grad (je n=5) bzw.
unterschiedlichem c-kit- Mutationsstatus (je n=3) mittels zweidimensionaler
differenzieller Gelelektrophorese verglichen und differenziell exprimierte
Proteine im Anschluss mittels Massenspektrometrie identifiziert. Tumoren mit
unterschiedlichem histologischen Grad unterschieden sich in der Expression von
13 Proteinen. Dabei handelte es sich vorrangig um Stressproteine, mit
Zellmotilität assoziierte Proteine und Mastzell-typische
Differenzierungsproteine. Eine Validierung der Ergebnisse mit Hilfe weiterer
biochemischer Methoden und größerer Fallzahlen wird im Weiteren zeigen, ob das
aggressive klinische Verhalten höhergradiger MZT möglicherweise durch die
veränderten Expressionsprofile dieser Proteine erklärbar sein könnte. In der
Mutationsanalyse, dem zweiten Teil der vorliegenden Arbeit, konnten 15
verschiedene, signifikant differenziell exprimierte Proteine identifiziert
werden. Entgegen der Arbeitshypothese fanden sich jedoch keine Proliferations-
assoziierten Proteine im differenziellen Proteom. Diese Ergebnisse untermauern
die Vermutung, dass der Nachweis der c-kit-Mutation, im Gegensatz zum
histologischen Grad, von geringer Relevanz für die Prognose des klinischen
Verhaltens kaniner kutaner Mastzelltumoren ist.
de
dc.description.abstract
Cutaneous mast cell tumors (MCT) are one of the most common skin tumors in
dogs. According to their histological appearance and the applied grading-
system two or three different histological grades have to be distinguished.
Grade 1 or low-grade MCT are characterized by well differentiated monomorphic
tumor cells which neither tend to metastasize nor recur. Grade 3 or high-grade
MCT are composed of dedifferentiated pleomorphic mast cells which often recur
or even metastasize to distant organs. Although mast cell tumors are in the
focus of research worldwide molecular details which provide the basis for this
different clinical behavior are in most aspects unknown. Studies about KIT,
the receptor for stem cell factor, and its proto-oncogene c-kit revealed
promising results, as the identification of an activating internal tandem
duplication in exon 11 lead to the assumption that KIT activity is of major
relevance to MCT proliferation and progression. Impact of c-kit-mutations on
the protein expression profile of mutated MCT cells is however unknown. Since
recent studies identified c-kit-mutations in only 12 % of all MCT and 40 % of
grade 3 MCT, other molecular alterations have to be responsible for the
aggressive clinical behavior of grade 3 MCT. Therefore, the present study
compared the protein expression patterns of grade 1 and grade 3 MCT (each n=5)
and of MCT with or without c-kit-mutation (each n=3) by two-dimensional
difference gel electrophoresis. Differentially expressed proteins were
identified by mass spectrometry subsequently. Tumors of distinct histological
grade differed in the expression of 13 proteins. Most of them are associated
with stress resistance, cell motility and mast cell differentiation. Further
studies are needed now to evaluate if these modified expressions patterns are
responsible for the aggressive clinical behavior of grade 3 MCT. The
comparison of c-kit-mutated and non-mutated MCT revealed 15 significantly
differentially expressed proteins. Contrary to the second hypothesis no
proteins with an association to increased proliferation activity were
detectable. These results substantiate the assumption that activating
mutations in the proto-oncogene c-kit are of less relevance for clinical
behavior than the histological grade.
en
dc.format.extent
IX, 55 S.
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
mass spectrometry
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::630 Landwirtschaft::630 Landwirtschaft und verwandte Bereiche
dc.title
Auswirkungen des histologischen Grades und des c-kit-Mutationsstatus auf das
Proteinexpressionsprofil kaniner kutaner Mastzelltumoren
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. Robert Klopfleisch
dc.contributor.furtherReferee
PD Dr. Michael Veit
dc.contributor.furtherReferee
Univ.-Prof. Dr. Johanna Plendl
dc.date.accepted
2013-06-25
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000094719-9
dc.title.translated
Impact of Histological Grade and c-kit-Mutations on the Protein Expression
Profile of Canine Cutaneous Mast Cell Tumors
en
refubium.affiliation
Veterinärmedizin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000094719
refubium.note.author
Mensch und Buch Verlag ; aus Copyrightgründen sind die Zeitschriftenartikel
hier nicht online veröffentlicht.
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FUDISS_derivate_000000013736
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open access