Ex-vivo Detektion und Quantifizierung autoreaktiver T-Zellen bei MS-Patienten und Kontrollen

Abstract

Die Multiple Sklerose (MS) ist die häufigste chronisch-entzündliche Erkrankung des Zentralnervensystems. Man geht davon aus, dass eine durch aktivierte Myelin-spezifische T-Zellen hervorgerufene Entzündungsreaktion zur Demyelinisierung und zum Untergang von Axonen und Neuronen führt. Mit Hilfe eines IL-7 modifizierten Proliferationsassays konnte Myelinreaktivität auf MBP-Protein sowie andere eingesetzte Myelinantigene bei MS-Patienten und Kontrollen nachgewiesen werden, wobei auf einzelne Myelinpeptide häufiger Patienten reagierten. In einer Längsschnittuntersuchung zeigte sich ein höherer kumulativer Stimulationsindex auf MBP-Protein bei den MS-Patienten, was für eine höhere Aktivität Myelin-spezifischer T-Zellen bei der MS sprechen könnte. Ex-vivo, nach nur 6 stündiger Inkubationszeit mit Myelinantigen, konnte bei wenigen Patienten (3/33) und Kontrollen (2/26) eine Population IFN- gamma/TNF-alpha produzierender CD4+/CD69+ T-Zellen mit dem Durchflusszytometer detektiert werden. Es zeigte sich kein Unterschied hinsichtlich der Frequenz Myelin-spezifischer T-Zellen bei Patienten und Kontrollen

Multiple sclerosis (MS) is the most common chronic inflammatory disease of the central nervous system. Activated myelin specific T cells are thought to mediate an inflammatory reaction leading to demyelination, axonal damage and loss of neurons. Using an IL-7 modified proliferation assay, myelin reactivity to MBP-protein and other myelin antigens was shown in MS patients and healthy controls. To some of the antigens patients reacted more frequently than volunteers. A longitudinal analysis revealed a higher cumulative stimulation index for MBP protein in MS patients, which may indicate a higher activity of myelin specific T cells in MS. An IFN-gamma/TNF-alpha producing CD4+/CD69+ T cell population was detected ex vivo only 6 hours after antigenic challenge by intracellular flow cytometry in 3/33 MS patients and 2/26 healthy controls. The calculated myelin specific T cell frequencies did not differ between patients and controls.