dc.contributor.author
Müller, Anja
dc.date.accessioned
2018-06-07T16:33:59Z
dc.date.available
2017-06-02T10:26:19.517Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/2717
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-6918
dc.description.abstract
Die Autoimmunhepatitis (AIH) ist eine chronisch-entzündliche Lebererkrankung,
bei der mit bisher ungeklärter Ursache die Hepatozyten durch das eigene
Immunsystem geschädigt werden. Die Hepatozyten des murinen TF-OVA-Stammes
exprimieren transgen Ovalbuminprotein. Mit Hilfe dieses Modells kann
untersucht werden, ob CD8+ oder CD4+ T-Zellen effektiv durch ein in
Hepatozyten vorhandenes Antigen aktiviert werden. Wir etablierten ein neues
Zellisolationsverfahren, das die magnetische und die Fluoreszenz-aktivierte
Zellsortierung kombiniert. Dadurch können Kupfferzellen (KC) und Dendritische
Zellen (DC) als professionelle sowie sinusoidale Leberendothelzellen (LSEC)
als nicht-professionelle Antigen-präsentierende Zellen (APZ) der Leber
zeitgleich und spezifisch aufgereinigt werden. Nach dreitägiger Kokultur waren
naive antigenspezifische OT-I CD8+ T-Zellen durch alle drei untersuchten
Zelltypen aus TF-OVA-Tieren aktiviert worden. Das transgene Ovalbumin der
Hepatozyten musste also zuvor von den NPZ phagozytiert, prozessiert und das
Antigen dann im Komplex mit MHC-I durch Kreuzpräsentation präsentiert worden
sein. Es zeigte sich für das endogene Antigen, dass unter nicht
inflammatorischen Bedingungen nur KC und DC als professionelle APZ in der Lage
sind, in OT-I CD8+ T-Zellen eine Effektorfunktion (Sekretion von IFN-γ) zu
induzieren. Naive antigenspezifische OT-II CD4+ T-Zellen wiesen nach Kokultur
mit LSEC, KC und DC aus TF-OVA-Tieren keine Proliferation und Aktivierung auf.
Dies änderte sich jedoch, wenn die NPZ zuvor mit exogenem Ovalbuminprotein
inkubiert wurden. Es kam sowohl zu einer Aktivierung von CD4+ T-Zellen als
auch zu einer Verstärkung der Effektorfunktion von CD8+ T-Zellen. In Bezug auf
endogene Antigene zeigen diese Ergebnisse, dass professionelle APZ der Leber
befähigt sind, CD8+ T-Zellen, nicht aber CD4+ T-Zellen, effektiv zu aktivieren
und eine Immunreaktion gegen Antigene hepatozellulären Ursprungs auszulösen.
Diese Resultate legen nahe, dass CD8+ T-Zellen an den initialen Prozessen der
Autoimmunität der Leber beteiligt sein könnten.
de
dc.description.abstract
Autoimmune hepatitis (AIH) is a chronic inflammatory liver disease leading to
progressive destruction of hepatocytes due to an autoaggressive process.
However, it is unknown, which T-cell subpopulation reacts against endogenous
hepatocellular antigens and which of the non-parenchymal liver cells are
capable of serving as antigen presenting cells (APC) and of activating antigen
specific T-cells.To investigate this topic, we used the TF-OVA mice which
express the transgenic protein ovalbumin in hepatocytes. We established a new
process that allows isolation of different non-parenchymal liver cell lines at
the same time. We tested Kupffer cells (KC) and dendritic cells (DC), which
are professional APC, as well as liver sinusoidal endothel cell (LSEC), which
are non-professional APC, for their capacity to present the endogenous antigen
ovalbumin in vitro. After three days of coculture LSEC, KC and DC from TF-OVA
mice induced proliferation and activation in naive antigen specific OT-I CD8+
T-cells. The results are an indirect proof that the transgenic antigen from
hepatocytes of TF-OVA mice was phagocytosed and processed by all three cell
types and loaded antigen onto MHC-I (cross presentation). Only the
professional APC were able to induce effector function (IFN-γ) in antigen
specific CD8+ T-cells in a non-inflammatory context by presenting an antigen
of hepatocellular origin. Naive antigen specific OT-II CD4+ T-cells were not
activated after coculture with LSEC, KC, or DC from TF-OVA mice. However,
after pre-incubation of APC with exogenous ovalbumin protein, activation of
OT-II CD4+ T-cells was observed, and the effector function of CD8+ T-cells was
increased. Our results confirm that professional APC from the liver are
capable of inducing effector function in CD8+ T-cells by presenting antigen of
hepatocellular origin. Our findings suggest that CD8+ T-cells may be involved
in the initial steps leading to autoimmunity in the liver.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
autoimmune hepatitis
dc.subject
antigen presentation
dc.subject
cross presentation
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Aktivierung von T-Zellen durch professionelle und nicht-professionelle
Antigen-präsentierende Zellen der Leber im Mausmodell der Autoimmunhepatitis
dc.contributor.firstReferee
N.N.
dc.contributor.furtherReferee
N.N.
dc.date.accepted
2017-06-25
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000104733-9
dc.title.translated
Activation of T-cells by professional and non-professional antigen presenting
cells of the liver in a mouse model of autoimmune hepatitis
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000104733
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000021511
dcterms.accessRights.dnb
free
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open access