Molekulare Diagnose von Lymphknotenmetastasen in endoskopisch behandeltem Gebärmutterhalskrebs: Genauigkeit des APTIMA Tests zur Detektion von High Risk Humanen Papillomvirus mRNA in Wächterlymphknoten

Abstract

Einleitung Metastasen der Beckenlymphknoten sind die wichtigsten negativen Prognoseparameter für Patienten mit Zervixkarzinom im Frühstadium. Mikrometastasen und isolated Tumor Cells (ITC) sind durch Standard Histopathologie schwierig zu erkennen. Obwohl Studien über die Korrelation der Anwesenheit Humaner Papillomvirus-(HPV-) DNA in Beckenlymphknoten mit vorhandener Metastase in Gebärmutterhalskrebspatienten bestehen, sind die Analyse von HPV DNA aus Lymphknotenpräparaten auf Grund des Risikos einer falsch positiven Ergebnisse limitiert. In dieser Arbeit wurde das Vorhandensein von High Risk HR HPV-E6/E7 mRNA in Lymphknotengewebe evaluiert und mit entsprechenden Metastasen assoziiert. Patienten und Methoden Die Studie beinhaltete 115 Patienten mit Zervixkarzinom im Frühstadium (FIGO IA bis IIB). Cytobrush-Technik wurde zur Probenentnahme aus Lymphknotengewebe angewandt, und diese schließlich pathologisch untersucht. HR HPV-E6/E7 mRNA wurde mittels APTIMA Assay detektiert. Ergebnisse Das mittlere Patientenalter zum Zeitpunkt der Diagnose betrug 40+11 Jahre (Interquartilsabstand=24-72 Jahre). Vorhandener Gebärmutterhalskrebs war auf das Frühstadium begrenzt (FIGO). HPV-E6/E7 mRNA wurde in Primärmetastasen aller Patienten detektiert, bei 87 Patienten (75,7%) in Zervixmetastasen und in 84 Patienten (73%) in Lymphknotenmetastasen, wie durch abschlißende Pathologie bestätigt. 5,6% (16 aus 287) der entnomenen Sentinellymphknoten testete positiv auf HPV-E6/E7 mRNA, entsprechend einer Positivität von 8,7% (10 aus 115) eingeschlossener Patienten. Alle durch Histologie als metastatisch bestätigte Lymphknoten (pelvine- und paraaortal) waren ebenfals HPV-E6/E7 mRNA-positiv. Zusätzlich wurden 8 bzw. 9 histologisch unauffällige Patienten und Lymphknoten positiv auf HPV-E6/E7 mRNA getestet. Die Beziehung von HPV zu histologischem Status zwischen primärer und Lympknotenmetastase, sowie zwischen pelvinen- und paraaortalen Lymphknoten bleIbt schwierig. HPV-Status und Histologie unterscheiden sich nicht zwischen SCC, Adenokarzinom oder Adenosquamösem Karzinom. Die Sensitivität, Spezifizität, NPV, PPV und dIagnostische Effizienz der Überprüfung auf HPV-E6/E7 mRNA für Patienten mit Metastasen betrugen 100%, 92,4%, 100%, 52,6% bzw. 93%. Die Sensitivität, Spezifizität, NPV, PPV und diagnostische Effizienz der Überprüfung auf HPV-E6/E7 mRNA für Wächterlymphknoten mit Metastasen betrugen 100%, 96.6%, 100%, 67,9% bzw. 96,9%. Zusammenfassung Das APTIMA HPV Assay ermöglicht die rasche und einfache Detektion von HPV-E6/E7 mRNA in Wächterlymphknoten. Positive Ergebnisse können auf eine Metastase im Frühstadium hinweisen. Die Resultate sollten jedoch durch unabhängige Testverfahren bestätigt werden.

Introduction Nodal metastasis is the most important negative prognostic parameter for patients with early-stage cervical cancer. However, micrometastasis and isolated tumor cells are difficult to detect by conventional histopathology. Although some studies that focused on the correlation between the human-papillomavirus-(HPV)-DNA presence of pelvic lymph nodes and pathological metastasis in patients with cervical cancer have already been published, HPV DNA analysis of lymph node preparations is limited due to the high rate of false positive results. In the present paper, we evaluated the correlation of the presence of high risk HR HPV-E6/E7 mRNA in the lymph node with histological metastasis. Patients and Methods The study included 115 patients with stage IA to IIB cervical cancer. The cytobrush technique was used for sample collection from the pelvic lymph nodes before sending them for pathological assessment. HR-HPV-E6/E7 mRNA was detected by APTIMA assay. Results The median age of the patients at diagnosis was 40+11 years (interquartile range=24-72years). The status of HPV-E6/E7- mRNA was detected in the primary tumor in all patients. We found 87 (75.7%) patients with HPV-E6/E7- mRNA in the lymph nodes, while final pathology confirmed nodal metastases in 84 patients (73%). HPV-E6/E7-mRNA was positive in 5.6% (16/287) of the removed sentinel lymph nodes, representing a positivity of 8.7% (10/115) of the included patients. All the histologically confirmed metastatic lymph nodes (pelvic and paraaortic) were also HPV-E6/E7-mRNA positive. Additionally, pathology confirmed no metastases in 8 patients and 9 sentinel nodes were positive for HPV-E6/E7-mRNA. However, the relationship of HPV and histology status in pelvic and paraarotic lymph node is complicated and the status of HPV and histology is related to the stage but not histology type. The sensitivity, specificity, NPV and PPV of HPV-E6/E7-mRNA for patients with metastases were 100%, 92.4%, 100%, 52.6% and 93%, respectively. And the sensitivity, specificity, NPV and PPV of HPV-E6/E7-mRNA for lymph nodes with metastases were 100%, 96.6%, 100%, 67.9% and 96.9%, respectively. Conclusion By using the APTIMA HPV assay, it is possible to detect the status of HPV-E6/E7-mRNA in the SLN. And HPV-E6/E7-mRNA is positive could be considered a sign of an early metastasis. Potential advantages of this method are the lower costs and the rapid assessment to results. However, the result must be further explained carefully.