dc.contributor.author
Zurek, Martin
dc.date.accessioned
2018-06-08T01:46:36Z
dc.date.available
2011-11-08T11:07:36.153Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/13865
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-18063
dc.description.abstract
Di-(2-ethylhexyl)-phthalat (DEHP) ist ein synthetischer Weichmacher, der mit
einem sehr hohen Anteil in PVC-haltigen Alltags- und Medizinprodukten immer
noch häufige Verwendung findet. Es ist nicht kovalent an die Kunststoffmatrix
gebunden und läßt sich wegen seiner lipophilen Eigenschaften durch fetthaltige
Substanzen aus Blutbeuteln oder Kathetersystemen leicht herauslösen. Im
Gastrointestinaltrakt wird es enzymatisch zu seinem korrespondierenden aktiven
Metaboliten Mono-(2-ethylhexyl)-phthalat (MEHP) verstoffwechselt. Die
potentiell schädigenden Wirkungen dieser Phthalate auf den Reproduktionstrakt
sind schon seit über 60 Jahren bekannt. Das in der Industrie weit verbreitete
Schwermetall Cadmium wird überwiegend durch Nahrung oder Zigarettenrauch
aufgenommen und über Jahrzehnte im Körper gespeichert. Ebenso sind die
reproduktionstoxischen Wirkungen von Cadmium seit dem frühen 20. Jahrhundert
bekannt. Darum wurde es als Vergleichssubstanz zu den Phthalaten für die hier
beschriebenen Experimente ausgewählt. In den Versuchen für diese Dissertation
wurden als Prüfzeitpunkte ein, drei und sechs Tage und als Konzentrationen
0,01 μM bis 100 μM für die Phthalate und 0,01 μM bis 1 μM für CdCl2
ausgewählt. Die Wirkung der Verbindungen auf den Hoden und die mögliche
Schädigung der Blut-Hoden-Schranke wurde am Modell der Sertoli-Zelllinie SerW3
untersucht, die alle wesentlichen Strukturmerkmale von natürlich vorkommenden
Sertoli-Zellen aufweist. Die Effekte der charakteristischen Proteine der tight
junctions, adherens junctions und gap junctions und somit auch der Blut-Hoden-
Schranke wurden durch immunhistologische und Westen Blot Untersuchungen
analysiert. Dabei wurden Occludin, N-Cadherin, β1-Integrine, Vimentin und
Connexin 43 ausgewählt, die stellvertretend für die verschiedenen Zell-Zell-
Kontakte stehen. Durch licht- und elektronenmikroskopische Analysen konnten
morphologische und ultrastrukturelle Veränderungen dargestellt werden. Es
konnte gezeigt werden, dass sich bei DEHP außer nach sechs Tagen in den hohen
Konzentrationen kaum Veränderungen an den Proteinen dargestellt haben. Bei
MEHP waren Effekte bereits nach einem Tag in den hohen Konzentrationen und
deutliche Veränderungen nach Tag drei in den mittleren bis niedrigen
Konzentrationen zu sehen. CdCl2 stellte sich im Vergleich zu den Phthalaten
als potentester Stoff dar. Aufgrund seines hohen zelltoxischen Potentials
konnten die Zellen nur in Konzentrationen bis maximal 1 μM getestet werden.
Das stärkste Ausmaß an Veränderungen konnte bei dem tight junction Protein
Occludin bei allen drei Ver-bindungen beobachtet werden. Weiterhin wurden
deutliche Veränderungen bei dem Adhäsionsprotein N-Cadherin und dem gap
junction Protein Connexin 43 gesehen. Im Vergleich mit den anderen
Strukturproteinen wurden die β1-Integrine als adherens junctions Proteine am
wenigsten beeinträchtigt. In der Immunhistologie zeigten sich bei Vimentin
nach MEHP- und CdCl2-Exposition deutliche Veränderungen. Mit Hilfe der in
dieser Dissertation gewonnenen Daten konnte die Eignung der Sertoli-Zelllinie
SerW3 für in vitro Untersuchungen mit Fremdstoffen gezeigt werden.
Insbesondere für umweltrelevante Stoffe ist es sinnvoll auch längere
Expositionszeiten zu realisieren, die mit Primärkulturen von Sertoli-Zellen
nicht möglich sind.
de
dc.description.abstract
Di-(2-ethylhexyl)-phthalat (DEHP) is a synthetic plasticiser. It will be
metabolized in the gastrintestinal tract in the active metabolite
Mono-(2-ethylhexyl)-phthalat (MEHP). The heavy metal cadmium is widely spread,
for example in food. It ist known, that all substances have a high effect on
fertility. The experiments have done for 1, 3 and 6 days in the concentrations
of phthalates from 0,01 μΜ to 100 μΜ and of cadmium from 0,01 μΜ to 1 μΜ. All
experiments were done with the sertoli-cellline SerW3. The effects of the
proteins of the blood-testis-barrier, Occludin, N-Cadherin,
β1-Integrine,Vimentin and Connexin 43 were analysiered with Western-Blot-
Analysis, Immunhistology and Microscopy. The results show that MEHP has the
biggest effect in low concentrations on the SerW3-cells. The effects on the
proteins Occludin, N-Cadherin and Connexin 43 are obviously.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Wirkungen der Phthalate DEHP [Di-(2-ethylhexyl)-phthalat] und MEHP
[Mono-(2-ethylhexyl)-phthalat] und des Schwermetalls Cadmium auf die Zellen
der Sertoli-Zelllinie SerW3
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. med. R. Stahlmann
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. P. Steinberg
dc.contributor.furtherReferee
Priv-Doz. Dr. rer. nat. Th. Schulz
dc.date.accepted
2011-11-18
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000025401-1
dc.title.translated
Effects of the Phthalates DEHP [Di-(2-ethylhexyl)-phthalat] and MEHP
[Mono-(2-ethylhexyl)-phthalat] and of the heavy metal Cadmium on the cells of
the Sertoli-cellline SerW3
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000025401
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000010082
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access