Pharmakologische und molekularbiologische Charakterisierung eines neuen blutdruckregulierenden Gruppe I P2X-Rezeptors in der Rattenniere

Abstract

In den letzten Jahren gibt es zahlreiche Hinweise, daß Purinrezeptoren eine wichtige Rolle in der Blutdruckregulation spielen. In der Literatur gibt es Hinweise, daß mindestens zwei P2X-Rezeptorsubtypen an einer Blutdruckregulation beteiligt sind. Zunächst wurde mit Hilfe der RT-PCR die Expression aller bekannten P2X-Rezeptorsubtypen in der Niere überprüft. In einem zweiten Schritt wurde dann an der isolierten perfundierten Rattenniere mit Hilfe von spezifischen P2X-Rezeptorantagonisten überprüft, welche P2X- Rezeptorsubtypen an einer Vasokonstriktion beteiligt sind. Mittels molekularbiologischer Methoden konnten in der Rattenniere die Purinrezeptoren P2X1, P2X2, P2X3, P2X4 und P2X7 nachgewiesen werden. Mit spezifischen P2X- Rezeptoragonisten wie Alpha, Beta-methylen-Adenosin-5'-Triphosphat (Alpha, Beta-meATP), Diadenosinhexaphosphat (Ap6A) und Adenosin-Guanosin-hexaphosphat (Ap6G) und unter Verwendung von P2X-Rezeptorantagonisten wie Pyridoxalphosphat-6-azophenyl-2´,4´- disulfonsäure (PPADS), Suramin und 1,3,5 naphtalene-trisulfonsäüre (NFO23) konnte gezeigt werden, daß die Vasokonstriktionen induziert durch den P2X1-Rezeptor und besonders durch den P2X3-Rezeptor vermittelt werden. Es konnte zum ersten Mal die Existenz des P2X3-Rezeptors in der Rattenniere nachgewiesen werden. Unter Verwendung von P2X-Rezeptorantagonisten konnte gezeigt werden, daß der P2X3-Rezeptor an der Blutdruckregulation entscheidend beteiligt ist und damit eine wichtige Rolle in der glomerulären Perfusion, Blutdruckregulation und damit bei der Entstehung der Hypertonie spielen kann.

The potential importance of purines and purinreceptors for hypertension and its pathophysiology is being discussed more intensively in the last years. In this study, we have investigated the role of P2X-receptors, especially P2X1 and P2X3. Using RT-PCR, we have investigated the expression of mRNA of all known P2X-receptors in the kidney of the rat, subdevided into renal artery, medullary and cortical tissues. Using specific P2X-receptor antagonists as pyridoxalphosphate-6-azophenyl-2?,4?-disulfonate (PPADS), suramine and naphthalene-1,3,5-trisulphonic acid (NF023), we have investigated the role of P2X1 and P2X3 receptors in the rat isolated perfused kidney. We could demonstrate the presence of P2X1, P2X2, P2X3, P2X4 and P2X7 in the cortical and the medullary part of the kidney. In the renal artery we could show the presence of P2X1, P2X2 and P2X7. Specific P2X-receptor agonists as alphabeta- me-ATP (alpha, beta-meATP), diadenosinehexaphophates (Ap6A) and adenosin- guanosin-hexaphosphat (Ap6G) were capable to induce vasoconstriction in the vasculature of the kidney. By using the specific P2X-receptorantagonists PPADS, suramine and NF023 we could show that this vasoconstriction is mediated by P2X1 and especially by P2X3. In summary, this study shows the evidence for the presence of the P2X3-receptor in the kidney. Using specific P2X- receptorantagonists, it could be shown that the P2X3-receptor is involved in the regulation of blood pressure control and plays an important role in glomerular perfusion and the development of hypertension.