Das endogene Lysophospholipid Spingosylphosphorylcholin ist ein potenter Aktivator der endothelialen NO-Synthase

Abstract

Die Bedeutung der Sauerstoffradikale für die Entwicklung der Atherosklerose ist heute allgemein akzeptiert. Daher sind Enzymsysteme, die die Bildung von Sauerstoffradikalen hemmen von großer Bedeutung hinsichtlich der Therapie der Atherosklerose. Die mit Atherosklerose assoziierten Erkrankungen sind für mehr als 50 % der in Deutschland auftretenden Todesfälle verantwortlich. Ziel der vorgelegten Arbeit war es die Bedeutung des HDL assoziierten Lysophospholipides SPC bei der Aktivierung der eNOS zu untersuchen und die daraus resultierende Vasorelaxation zu beurteilen. Dazu führten wir in vitro Versuche an Gefäßsegmenten thoakaler Aorten von männlichen WKY Ratten, männlichen eNOS defizienten Mäusen, männlichen C57BL/6-Mäusen und S1P3-Rezeptor defizienten Mäusen durch. Als Grundlage der Versuche diente die Aorta des entsprechenden Tieres, die wir atraumatisch entnahmen und in einen Kleingefäßmyographen installierten. Nach dem Einspannen des Aortenringes erfolgte eine Applikation der in dieser Arbeit verwendeten Substanzen, nach Applikation wurden die ermittelten Werte registriert und ausgewertet. In dieser Arbeit konnte nachgewiesen werden, dass nach Vorkontraktion durch PE eine konzentrationsabhängige Vasodilatation durch SPC, an intakten, nicht durch den spezifischen eNOS Hemmer L-NAME oder durch chemische Deendothelialisierung veränderten Aortenringen induziert wurde. Dabei ist die vasodilatierende Wirkung des Lysophospholipides SPC unter Vorkontraktionsbedingungen stärker ausgeprägt als die vasokonstringierende Wirkung unter Basalbedingungen. Das konnte an den Aortenringen der WKY Ratten sowie der C57BL/6 Mäuse demonstriert werden. Eine Vasodilatation konnte an eNOS defizienten Mäusen und S1P3-Rezeptor defizienten Mäusen nicht erreicht werden. Die vasodilatativen Eigenschaften des SPC sind also eNOS vermittelt. Gleichfalls wurde deutlich das SPC über die Kopplung an den S1P3-Rezeptor wirkt, da an S1P3-Rezeptor defizienten Aortenringen ebenfalls keine Vasodilatation induziert werden konnte. In dieser Arbeit konnte erfolgreich das HDL-assoziierte Lysophospholipid Sphingosylphosphorylcholin als eNOS aktivierender Faktor herausgearbeitet werden. Diese eNOS Aktivierung verläuft über die Stimulation des S1P3-Rezeptors, der ein funktioneller HDL-Rezeptor zu sein scheint. Lysophospholipide und insbesondere der S1P3-Rezeptor könnten somit einen neuartigen Ansatz in der antiatherogenen Therapie darstellen.

The importance of oxygen radicals for the development of atherosclerosis is today widely accepted. Enzyms systems which could reduce the development of oxygen radicals are very importent in treatment of the atherosclerosis. Atherosclerosis associated illnesses account for more then 50% of total mortality in Germany. The aim of this work was to demonstrate the importance of the HDL associated lysophospholipid SPC in activating eNOS and to measure the resulting vasorelaxation. We did in vitro tests with vessel segments of thoracic aorta from male WKY rats, male eNOS deficient mouse, male C57BL/6 mouse and male S1P3 receptor deficient mouse. The base for our tests was the aorta of each animal, we removed the aorta of each animla atraumatic and installed the segments in a small vessel myograph. After the segment of the respective aorta was installed we applied the substances we used in our work, then we registered and evaluated the results. In this work we could demonstrate, that after precontraction through PE a concentration dependent vasodilation was induced through SPC on intact not through the specific eNOS inhibitor L-NAME or chemical deendothelialisation changed aortic segments. The vasodilatating impact induced through SPC was stronger under precontraction conditions, then vasocontraction in base conditions. That could be demonstrated on WKY rats and C57BL/6 mouse. We could not induced a vasodilatation through SPC in eNOS deficient mouse and S1P3 receptor deficient mouse. The vasodilatating effects of SPC are eNOS dependent. We could also demonstrate that SPC effects are dependent on coupling to the S1P3 receptor, because there were no vasodialating effects on S1P3 receptor deficient mouse. This work could demonstrate that the HDL associated lysophospholipid Spingosylphosphorylcholin is a eNOS activating factor. This eNOS activation depends on the stimulation of the S1P3 receptor, who seems to be a functional HDL receptor. Lysophospholipids and particulary the S1P3 receptor could be new starting point in the atherosclerosis therapy.