dc.contributor.author
Fischer, Claudia
dc.date.accessioned
2018-06-08T00:31:48Z
dc.date.available
2007-03-15T00:00:00.649Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/12080
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-16278
dc.description
Deckblatt-Impressum
Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis
Einleitung
Literaturübersicht
Material
Methodik
Ergebnisse
Diskussion
Zusammenfassung
Summary
Literaturverzeichnis
Danksagung
Selbständigkeitserklärung
dc.description.abstract
Für ein erfolgreiches Management in Milchviehbetrieben ist eine hohe
Fruchtbarkeitsleistung eine wichtige Voraussetzung. Im Anschluss an die
Kalbung sind vor allem Endometritiden maßgeblich an Störungen der
Fruchtbarkeit beteiligt. Häufig bleiben jedoch subklinische Endometritiden
unentdeckt und verursachen hohe wirtschaftliche Verluste. Um einen tieferen
Einblick in die zellulären Vorgänge des Endometriums zu gewinnen, kann die
Analyse der Gen-Expression wertvolle Informationen liefern. In der Literatur
werden zahlreiche Zytokine und Enzyme diskutiert, die im Zusammenhang mit der
Vorbereitung des Endometriums auf die Implantation eine wichtige Rolle
spielen. Ziel der vorliegenden Arbeit war die Untersuchung der mRNA-Expression
von ausgewählten pro-inflammatorischen Systemen im bovinen Endometrium. Die
Gewinnung endometrialer Zellen erfolgte minimal invasiv mittels der
Cytobrush®-Methode. Mit Hilfe der quantitativen RT-PCR wurde die mRNA-
Expression der Entzündungsmediatoren bovines granulozytäres chemotaktisches
Protein 2 (bGCP-2), der Cyclooxygenasen 1 und 2 (COX-1/-2), Haptoglobin, der
Interleukine 1ß (IL-1ß), 6 (IL-6) und 8 (IL-8) sowie des Tumor Nekrose Faktors
alpha (TNFα) untersucht. Im ersten Teil der Studie erfolgte die Untersuchung
der mRNA-Expression anhand von Schlachthofmaterial in Abhängigkeit vom
Entnahmeort (ipsilaterales, contralaterales Horn, Corpus) sowie von der
Zyklusphase. Die Uteri (n=8 pro Zyklusphase) wurden in folgende Zyklusphasen
eingeteilt: prä- (Tag 19-21) und postovulatorische Phase (Tag 1-5) sowie frühe
(Tag 6-12) und späte Lutealphase (Tag 13-18). Alle untersuchten Mediatoren
konnten im bovinen Endometrium nachgewiesen werden. bGCP-2, IL-1ß und IL-8
wurden zum Zeitpunkt um die Ovulation signifikant höher expremiert als in der
Lutealphase. Es konnten keine signifikanten Expressionsunterschiede zwischen
den Entnahmeorten (ipsilaterales und contralaterales Horn, Corpus)
festgestellt werden. Auf einem Milcherzeugerbetrieb wurde die Expression der
Entzündungsmediatoren im Endometrium von gesunden Kühen sowie Kühen mit
subklinischer und klinischer Endometritis unter Feldbedingungen untersucht
(jeweils n=9). Die Unterscheidung zwischen gesunden Tieren und Tieren mit
subklinischer Endometritis erfolgte anhand des prozentualen Anteils an PMN im
Endometrium. Betrug der Anteil an PMN über 5%, so wurden die Tiere als
subklinisch krank eingestuft. Kühe mit eitrigem Vaginalausfluss wurden als
klinisch krank beurteilt. Die Probengewinnung erfolgte 21 bis 27 Tage post
partum. Im Vergleich zu gesunden Kühen wiesen Tiere mit subklinischer und
klinischer Endometritis eine signifikant höhere mRNA-Expression der Faktoren
bGCP-2, IL-1ß, IL-8 sowie TNFα im Endometrium auf. Im dritten Teil der Studie
wurde die mRNA-Expression im Endometrium von Erstkalbinnen (n=5) im Verlauf
des Puerperiums untersucht. Die Probengewinnung erfolgte 10, 17, 24, 31, 38
und 45 Tage nach der Kalbung. bGCP-2, COX-2, Haptoglobin, IL-1ß, IL-6, IL-8
sowie TNFα wurden am 17. Tag signifikant höher expremiert als am 31. Tag post
partum. Aus den Ergebnissen der vorliegenden Arbeit lässt sich schließen, dass
die angewendete Methode zur Diagnostik von subklinischen Endometritiden
geeignet ist. Der Ort der Probenentnahme hatte keinen Einfluss auf das
Ergebnis. Somit ist es von untergeordneter Bedeutung, ob die Proben vom
ipsilateralen, contralateralen Horn oder aus dem Corpus entnommen werden. Es
muss berücksichtigt werden, dass die untersuchten Entzündungsmediatoren
physiologisch während des Sexualzyklus sowie im Puerperium expremiert werden.
Eine Untersuchung der Gen-Expression unter Beachtung der Zyklusphase erscheint
ab dem 24. Tag nach der Kalbung sinnvoll, um subklinische Endometritiden bei
der Milchkuh besser zu diagnostizieren.
de
dc.description.abstract
High reproductive performance is required for successful management of dairy
farms. After calving, especially endometritis is one of the main reasons for
reproductive failure. However, subclinical endometritis remains undetected in
many cases and causes a high financial loss. To elucidate the cellular
processes in the endometrium, the acquisition of the gene expression of
selected transcripts will provide helpful information. In the literature,
numerous cytokines and enzymes were discussed to play important roles in
preparing the endometrium for implantation. The aim of the present study was
to examine of the mRNA expression of pro-inflammatory systems in the bovine
endometrium. Endometrial cells were harvested by using the cytobrush®-method.
Quantitative RT-PCR was performed to investigate the mRNA expression of
inflammatory mediators as bovine granulocyte chemotactic protein 2 (bGCP-2),
cyclooxygenases 1 and 2 (COX-1/-2), haptoglobin, interleukins 1ß (IL-1ß), 6
(IL-6) and 8 (IL-8) as well as tumor necrosis factor alpha (TNFα). In the
first part of the present study, endometrial cells were collected at a local
slaughterhouse. The mRNA expression was examined in relation to different
regions of the uterus (ipsilateral, contralateral horn and corpus) as well as
during the estrous cycle (n=8 for each phase). Bovine uteri were classified
into the following four phases: pre- (day 19-21) and postovulatory phase (day
1-5), early luteal phase (day 6-12) and late luteal phase (day 13-18). All of
the investigated mediators were detected in the bovine endometrium. bGCP-2,
IL-1ß and IL-8 were significantly higher expressed around ovulation compared
to the luteal phase. Concerning the different regions of the uterus, there was
no significant difference observed between the ipsilateral, contralateral horn
and the corpus. On a commercial dairy farm, the expression of the inflammatory
mediators were investigated under field conditions in the endometrium of
healthy cows as well as of cows with subclinical and clinical endometritis
(n=9 for each group). The differentiation between healthy cows and cows with
subclinical endometritis was performed in relation to the percentage of PMN in
the endometrium. Subclinical endometritis was diagnosed when the percentage of
PMN exceed 5%. Purulent vaginal discharge was defined as a sign for clinical
endometritis. Endometrial samples were harvested between 21 and 27 days post
partum. Cows with subclinical or clinical endometritis showed a significant
higher mRNA expression of the mediators bGCP-2, IL-1ß, IL-8 and TNFα compared
to the group of healthy cows. In the third part of the study, the mRNA
expression was examined in the endometrium of heifers (n=5) directly after
calving. Samples were collected on days 10, 17, 24, 31, 38 and 45 post partum.
bGCP-2, COX-2, haptoglobin, IL-1ß, IL-6, IL-8 and TNFα were expressed
significantly higher on day 17 compared to day 31 post partum. In addition to
the results of the present study, it can be concluded that the used method is
appropriate in diagnosing subclinical endometritis. Furthermore, it is not
important whether the endometrial cells were collected from the ipsilateral,
the contralateral horn or the corpus. It has to be considered, that the
investigated cytokines were expressed physiologically during the estrous cycle
and the post partum period. For a better diagnostic of subclinical
endometritis in dairy cows, the mRNA expression should be investigated after
day 24 post partum.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
subclinical infections
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::630 Landwirtschaft::630 Landwirtschaft und verwandte Bereiche
dc.title
Erstellung von Expressionsprofilen im Endometrium von Milchkühen als
Voraussetzung zur Konzeptionsbereitschaft
dc.contributor.firstReferee
Univ.-Prof. Dr. Dr. R. Einspanier
dc.contributor.furtherReferee
Univ.-Prof. Dr. W. Heuwieser
dc.contributor.furtherReferee
Univ.-Prof. Dr. H. Tönhardt
dc.date.accepted
2006-09-29
dc.date.embargoEnd
2007-03-16
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000002723-8
dc.title.translated
Expression profiling of endometrial transcripts as potential fertility
parameters in dairy cattle
en
refubium.affiliation
Veterinärmedizin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000002723
refubium.mycore.transfer
http://www.diss.fu-berlin.de/2007/223/
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000002723
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access