Die differenzierungsabhängige Expression der Klasse-II-Tumorsuppressorgene H-rev107.1 und H-rev107.2 in der Hämatopoese und die Induktion von H-rev107.2 durch Interferon-γ

Abstract

In der vorliegenden Arbeit sollte die Expression der Klasse-II- Tumorsuppressorgene H-rev107.1 und H-rev107.2 in hämatopoetischen Zellen untersucht werden. Klasse-II-Tumorsuppressorgene sind in malignen Zellen genomisch intakt, aber durch Unterdrückung der Expression funktionslos. H-rev107.1 und H-rev107.2 (synonym TIG3, RARRES3 und RIG1) sind auf cDNA-Ebene zu 65% identisch. Die Expressionsanalysen dieser Arbeit wurden als semiquantitave RT-PCRs durchgeführt. Die zu untersuchenden Leukozytensubpopulationen wurden mit Hilfe monoklonaler Antikörper und eines Magnetsäulensystems separiert. Die Expression von H-rev107.1 und H-rev107.2 konnte in der Gesamtpopulation mononukleärer Blutzellen nachgewiesen werden. Im Gegensatz dazu gab es Hinweise, dass beide Gene in den untersuchten CD34+-Vorläuferzellen nicht exprimiert waren. Die Expression der Gene in differenzierten Subpopulationen mononukleärer Zellen war heterogen. Experimente zur Regulation der Gene zeigten eine Induktion von H-rev107.2 durch IFNγ in CD34+-Zellen. H-rev107.1 ließ sich nicht spezifisch regulieren. Die gezeigte differenzierungsabhängige Expression von H-rev107.1 und H-rev107.2 in hämatopoetischen Zellen könnte auf Tumorsuppressorfunktionen der beiden Gene in der Hämatopoese hindeuten. Dabei könnte H-rev107.2 Ziel antiproliferativer oder differenzierungsfördernder Signale durch IFNγ sein. Nachfolgende Versuche zeigten eine Korrelation zwischen der IFNγ-induzierten Expression des Gens und einer Wachstumshemmung in malignen hämatopoetischen Zelllinien.

The expression patterns of the class-II-tumorsuppressorgenes H-rev107.1 and H-rev107.2 in hematopoetic cells should be examined in the presented dissertation. Class-II-tumorsuppressorgenes are intact in the genome of malignent cells. Their function is prevented by expressionblock. H-rev107.1 and H-rev107.2 are 65% identical on level of cDNA. Expression analysis in this dissertation has been performed by semiquantitative RT-PCR. The leucocytepopulations to be examined were separated by use of monoclonal antibodies and a magnetic column-system. The expression of H-rev107.1 and H-rev107.2 could be proofed in the total of mononuclear bloodcells. In contrast to that their were hints for lack of expression of both genes in CD34+-stemcells. The expression patterns were heterogenic in differentiated subpopulations of mononuclear bloodcells. Regulation analysis of gene expression showed the induction of H-rev107.2-expression by interferone-γ in CD34+-stemcells. There was no specific regulation of H-rev107.1-expression found. The demonstrated differentiation-dependent expression of the class-II- tumorsupressorgenes H-rev107.1 and H-rev107.2 in hematopoetic cells could direct to tumorsuppressor-functions of both genes in hematopoesis. H-rev107.2 could be aim of antiproliferative and differentiation-inducing signals by interferone-γ. Following experiments showed correlation between interferone-γ-induced expression of H-rev107.2 and growth-inhibition in malignent hematopoetic cell-lines.