dc.contributor.author
Waldow, Konstanze
dc.date.accessioned
2018-06-07T15:29:12Z
dc.date.available
2009-11-06T09:45:34.605Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/1152
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-5354
dc.description.abstract
Untersuchungen zur Embryoletalität, Genotypisierung und Resistenzlage
aktueller Ornithobacterium rhinotracheale-Isolate Mittels Kultivierung sowie
Anwendung biochemischer und molekularbiologischer Methoden wurden 117 Isolate,
die aus erkrankten Mastputen zwischen 2003 und 2006 in Deutschland und
Frankreich isoliert wurden, als ORT identifiziert. Unterschiede wurden in der
Koloniemorphologie und einigen biochemischen Merkmalen beobachtet. Die
Serotypisierung zeigte eine heterogene Verteilung, in der der Serotyp A am
häufigsten auftrat. Auffällig war das vermehrte Auftreten des Serotyps C
sowohl in Deutschland als auch in Frankreich. Der zweite Teil der Arbeit
befasste sich mit der Genotypisierung mittels Fingerprinting. Hierzu wurde die
Eignung der Primer ERIC 1R und ERIC 2 sowie des Primers M 13 und der
zugehörigen PCR-Methode (ERIC-PCR bzw. RAPD-PCR) ermittelt. Unter Nutzung des
Primers M 13 wurden unterscheidbare Fragmentmuster der Standardserotypen A, B,
D, E, F, G, I, K, M und O produziert. Die Fragmentmuster der Standardstämme C,
H und Q, J und L sowie N und P ließen aufgrund großer Ähnlichkeit eine
Differenzierung nicht zu. Ausgewählte deutsche ORT-Isolate der Serotypgruppen
A, B, C und E wurden der PCR mittels Primer M 13 unterzogen. Die größte
genetische Ähnlichkeit wurde innerhalb der Serotypgruppe A festgestellt. Die
als Serotyp B charakterisierten Feldisolate wiesen eine geringe genetische
Ähnlichkeit zu ihrem Standardstamm auf und zeigten unterschiedliche
Fragmentmuster, die wiederum eine große Vergleichbarkeit mit den Mustern der
Feldisolate des Serotyps A offenbarten. Für die Isolate der Serotypgruppen C
und E wurde eine Vielzahl an Fragmentmustern erstellt. Eine sichere
Typisierung mittels Fingerprinting unter Verwendung des Primers M 13 scheint
nur für die Isolate des Serotyps A möglich. Die Embryoletalität der deutschen
ORT-Isolate wurde mittels Infektion von Hühnerembryonen mit ca. 1000 KBE pro
Ei via Allantoishöhle bestimmt. Anhand der Parameter Mortalitätsrate und
Überlebensindex wurden 54 bzw. 69 Isolate als niedrig pathogen sowie 34 bzw.
19 Isolate als mäßig pathogen bewertet. Es wurden keine hoch pathogenen
Isolate nachgewiesen. Gegenstand des vierten Teils der Arbeit war die
Bestimmung der minimalen Hemmstoffkonzentration (MHK) aller 117 ORT-
Feldisolate unter Anwendung der Mikrobouillondilutionsmethode. Unter Nutzung
kommerzieller Mikrotiterplatten wurden MHK-Werte von 9 antimikrobiellen
Wirkstoffen gegen ORT ermittelt und diese aufgrund fehlender Grenzwerte in
Form von MHK50, MHK90 sowie Minimal-, Maximal- und Modalwerten dargestellt.
Alle Isolate wiesen gegenüber Tiamulin niedrige MHK50 und MHK90 -Werte auf und
ließen sich als empfindlich einstufen. Für die verbleibenden Wirkstoffe
Penicillin G, Ampicillin, Enrofloxacin, Erythromycin, Ceftiofur, Lincomycin,
Tetracyclin und Trimethoprim/Sulfamethoxazol wurden MHK-Werte in hohen
Konzentrationsbereichen ermittelt, sodass auf eine Unempfindlichkeit von ORT
gegenüber diesen Substanzen geschlossen werden kann.
de
dc.description.abstract
Investigations into the embryo lethality, genotyping and resistance to
antibiotics of current Ornithobacterium rhinotracheale isolates The first part
of the present study focussed on the identification and characterisation of
German and French ORT isolates, which were isolated between 2003 and 2006 from
affected turkeys of different age. By using cultivation as well as biochemical
and molecular biological methods, 117 field isolates were unambiguously
identified as ORT. Differences were observed in colony morphology and some and
biochemical characteristics. Serotyping by AGP test. German isolates were
classified as serotypes A, B, C, D, E, H, I or J, while the French isolates
were classified as serotypes A, C, I or J. Within these heterogeneous
distributions the serotype A appeared most often. The frequent occurrence of
serotype C within the German and the French isolates was surprising. In the
second part two fingerprinting methods for ORT genotyping were evaluated. The
suitability of primers ERIC 1R and ERIC 2 as well as of primer M 13 and the
corresponding PCRs (ERIC-PCR or RAPD-PCR) was determined. RAPD-PCR by using
primer M 13 was able to distinguish reference strains of serotypes A, B, D, E,
F, G, I, K, M and O based on fragment patterns. In contrast fragment patterns
of reference serotypes C, H and Q, J and L, as well as N and P were very
similar so that a differentiation between these serotypes was not possible.
Based on these results selected German isolates of serotype A, B, C and E were
investigated by RAPD-PCR. Of all serotypes the patterns of field isolates of
serotype A showed the highest genetic similarity. The field isolates
characterized as serotype B showed two different patterns which could hardly
be differentiated from patterns of serotype A field isolates and had only a
slight similarity to the reference serotype B. For isolates of serotypes C and
E a large number of fragment patterns were produced. A reliable fingerprinting
by RAPD-PCR seems to be possible only for isolates of serotype A. The third
part comprised the determination of embryo lethality of the 88 German ORT
isolates. Eggs were inoculated with 1000 cfu Ornithobacterium rhinotracheale
via allantoic cavity. Based on mortality rate and survival rate 54 and 69
isolates respectively were categorized as lowly pathogenic and 34 and 19
isolates respectively were categorized as moderately pathogenic. No highly
pathogenic isolates were detected. Subject of the fourth part was the
determination of the minimal inhibitory concentration (MIC) of 88 German and
29 French ORT field isolates using the broth microdilution method. By using
commercial micro titre plates MIC values of 9 antimicrobial substances against
ORT were estimated. Because of missing breakpoints these values were presented
as minimal-, maximal- and modal-value as well as MIC50 and MIC90. All isolates
showed low MIC50 and MIC90 for tiamulin. For the remaining substances
penicillin G, ampicillin, enrofloxacin, erythromycin, ceftiofur, lincomycin,
tetracycline and trimethoprim/sulfamethoxazole MIC values of high
concentrations were estimated. Consequently a resistance and insusceptibility
of ORT in Germany as well as in France could be assumed.
en
dc.format.extent
VI, 130 S.
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
poultry diseases
dc.subject
Ornithobacterium rhinotracheale
dc.subject
drug resistance
dc.subject
microbial sensitivity test
dc.subject
embryo mortality
dc.subject
random amplified polymorphic DNA
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::630 Landwirtschaft::630 Landwirtschaft und verwandte Bereiche
dc.title
Untersuchungen zur Embryoletalität, Genotypisierung und Resistenzlage
aktueller Ornithobacterium rhinotracheale-Isolate
dc.contributor.contact
connywaldow@aol.com
dc.contributor.firstReferee
Univ.-Prof. Dr. Dr. H. M. Hafez
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. S. Grund
dc.contributor.furtherReferee
Univ.-Prof. Dr. A. Richter
dc.date.accepted
2009-07-21
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000013517-2
dc.title.translated
Investigations into the embryo lethality, genotyping and resistance to
antibiotics of current Ornithobacterium rhinotracheale isolates
en
refubium.affiliation
Veterinärmedizin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000013517
refubium.note.author
Erscheint gleichzeitig im Verlag DVG Service, Gießen, ISBN 978-3-941703-31-5
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000006399
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access