dc.contributor.author
Faus Giménez, Hortensia
dc.date.accessioned
2018-06-07T15:25:08Z
dc.date.available
2008-10-01T06:32:41.696Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/1055
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-5257
dc.description.abstract
The androgen receptor (AR) is essential for proper development and function of
the male reproductive system as well as for secondary male traits. It also
plays a key role in the origin and growth of prostate cancer. Although the
basic mechanisms of AR activation by androgens are known, new aspects such as
the regulation by post-translational modifications have recently emerged. The
role of ubiquitylation in androgen signalling was studied by an indirect
approach. Ubiquitin-specific protease 10 (USP10) had been identified in a
purified, DNA-bound AR complex and its role in modulating AR activity was
examined. By overexpressing USP10 it was found to act as a coactivator of the
AR, dependently on its enzymatic activity. Confirming these results, USP10
expression knock-down impaired AR function. However, no changes in the
ubiquitylation status of the AR could be evidenced, suggesting that the AR was
not the direct substrate of USP10. In view of the interconnection between the
ubiquitin-proteasome system and transcription, USP10 may act by stabilising AR
cofactors or members of the general transcriptional machinery, or by modifying
histones. This part of the work supports the concept that the ubiquitin-
proteasome system plays an important role in modulating transcriptional events
and the results presented here indicate that the deubiquitylation side has a
regulatory role as well. In the second part, the role of AR acetylation was
analysed. Mutation of various acetylation sites had remarkably different
effects, depending on the tested promoter. The most interesting data were
obtained when eliminating all three AR acetylation sites. This led to a total
loss of stimulation of the Pem promoter whereas an activity stronger than that
of the wild-type form was seen when testing the MMTV promoter. The loss of
activity on the Pem promoter was not due to changes in protein level, in
ligand recognition, in nuclear translocation, in promoter binding or to
defective N/C interaction. A possible explanation is the altered interaction
of acetylation-defective AR mutants with promoter-specific cofactors. In
summary, this work emphasises the role of post-translational modifications in
modulating AR function. More experiments will be required to better delineate
how these modifications fine-tune androgen action in vivo since they are
expected to have promoter-selective effects and also to be dependent on the
cellular context.
de
dc.description.abstract
Der Androgenrezeptor ist essentiell für die richtige Entwicklung und Funktion
des männlichen Fortpflanzungssystems sowie für die sekundären männlichen
Merkmale. Er spielt auch eine entscheidende Rolle in der Entstehung und dem
Wachstum von Prostatakrebs. Obwohl die grundlegenden Mechanismen der
Aktivierung des AR durch Androgene bekannt sind, sind kürzlich neue Aspekte,
wie die Regulation durch posttranslationale Modifikationen herausgefunden
worden. Die Rolle der Ubiquitylierung in dem Androgensignalweg wurde durch
einen indirekten Ansatz untersucht. Die Ubiquitin spezifische Protease 10
(USP10) war in einem AR-DNA-Komplex identifiziert worden. Deswegen wurde die
mögliche Rolle von USP10 in der Regulation der AR-Aktivität geprüft. USP10
wirkte als Coaktivator des AR und diese Wirkung war abhängig von der
enzymatischen Aktivität des USP10. Darüber hinaus beeinträchtigte das knock-
down von USP10 die Funktion des AR. Allerdings konnte keine Änderungen in der
Ubiquitylierung des AR gezeigt werden und das deutet an, dass der AR nicht das
Substrat von USP10 ist. Ausgehend von der engen Verbindung zwischen dem
Ubiquitin-Proteasom-System und der Transkription könnte USP10 durch die
Stabilisierung von Cofaktoren des AR oder von Elementen des
Transkriptionsapparates oder durch die Modifizierung der Histone wirken.
Dieser Teil der Arbeit unterstützt die Idee, dass das Ubiquitin-Proteasom-
System eine wichtige Rolle in der Modulation der Transkription spielt und die
Ergebnisse zeigen, dass die Deubiquitylierung auch an der Regulation beteiligt
ist. Im zweiten Teil dieser Arbeit wurde die Bedeutung der Acetylierung des AR
untersucht. Die Mutagenese verschiedener Acetylierungsstellen verursachte
unterschiedliche Effekte, abhängig vom verwendeten Promotor. Die
interessantesten Ergebnisse wurden gefunden als alle drei Acetylierungsstellen
mutiert waren. Diese AR-Mutante zeigte einen vollständigen Verlust der
Aktivierung des Pem Promotors während ihre Aktivität auf dem MMTV Promotor
stärker war als die des wild-type AR. Der Verlust der AR-Aktivität auf dem Pem
Promotor wurde weder bei Unterschieden in der Proteinmenge, in der
Ligandbindung, in der Kernlokalisierung oder in der Promotorbindung noch bei
gestörter N/C Interaktion verursacht. Eine mögliche Erklärung ist eine
fehlende Interaktion der Mutante mit promotorspezifischen Cofaktoren. Diese
Arbeit betont die Rolle von posttranslationalen Modifikationen in der
Regulation der Funktion des AR. Es wird mehr Arbeit nötig sein, um die
Feinabstimmung des Androgensignalwegs durch diese Modifikationen besser
beschreiben zu können, da zu erwarten ist, dass diese promotor- und
zellkontextabhängige Effekte zeigen.
de
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
Androgen receptor
dc.subject
prostate cancer
dc.subject
post-translational modifications
dc.subject
ubiquitylation
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::570 Biowissenschaften; Biologie::572 Biochemie
dc.title
The role of ubiquitylation and acetylation in androgen receptor function
dc.contributor.contact
hortensia.faus@bayerhealthcare.com
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. Petra Knaus
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. Peter Donner
dc.date.accepted
2008-04-28
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000005480-1
dc.title.translated
Die Rolle von Ubiquitylierung und Acetylierung bei der Funktion des
Androgenrezeptors
de
refubium.affiliation
Biologie, Chemie, Pharmazie
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000005480
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000004453
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access