dc.contributor.author
Tachezy, Michael
dc.date.accessioned
2018-06-07T23:04:09Z
dc.date.available
2009-06-10T12:33:22.083Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/10004
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-14202
dc.description.abstract
Die derzeit verfügbaren Screening-Tests und diagnostischen Möglichkeiten sind
unzureichend, um mögliche Opfer von Herzinfarkten vor dem Ereignis zu
entdecken. Deswegen sollen, unabhängig von der Zahl oder Größe der
atherosklerotischen Läsionen, spezifische biologische Aspekte der
Atherosklerose in der Diagnostik der Koronargefäßerkrankung dargestellt
werden. Es konnte gezeigt werden, dass das extrazelluläre Matrixprotein ED-B
Fibronektin ein mögliches Zielmolekül für die Atherosklerose-Diagnostik
darstellt. Das Ziel dieser Arbeit war es zu testen, ob das ED-B Fibronektin im
ApoE (-/-) Knockout(KO) Mausmodell in atherosklerotischen Läsionen mit Hilfe
eines spezifischen single-chain Antikörpers gegen ED-B Fibronektin, der mit
einem Nahinfrarot(NIRF)-Farbstoff gekoppelt wurde, in einem neuartigen NIRF-
Imaging System nachgewiesen werden kann und sich somit prinzipiell als
Zielmolekül für das molekulare Imaging der Atherosklerose eignet. Die
Atherosklerosebildung der ApoE (-/-) KO Mäuse wurde mit Hilfe des
Cholesterinabsorptionshemmers Ezetimib (EZE) beeinflusst. ApoE (-/-) KO Mäuse
erhielten Fettfutter oder ein Fettfutter/EZE-Gemisch (0,005%) bis zum Alter
von 4, 6 und 8 Monaten. NIRF-Messungen der aortalen Läsionen wurden 24 Stunden
nach i.v. Applikation ex vivo durchgeführt. Die Plaquequantität und -qualität
wurde mit histologischen und immunhistochemischen Methoden beurteilt. Das
NIRF-Messsystem liefert stabile, reproduzierbare und miteinander vergleichbare
Messdaten. Abhängig vom Alter und der Plaquemenge der ApoE (-/-) KO Mäuse
wurde die Expression des ED-B Fibronektin in den atherosklerotischen
Gefäßläsionen nachgewiesen. Ex vivo konnten zuverlässig intensive NIRF-Signale
innerhalb der Plaques der Aorta und angrenzenden Gefäße gemessen werden. Die
Ergebnisse der Plaqueflächenbestimmung durch die Sudan III-Färbung und die
NIRF-Messungen korrelieren in hohem Maße (p<0,001). Die signifikante Reduktion
der Plaqueflächen der sechs und acht Monate alten Tiere durch die EZE-
Behandlung konnte mit Hilfe des ED-B Fibronektin-NIRF-Imagings nachvollzogen
werden. Auch die histologischen Plaqueflächenanteile korrelieren in hohem Maße
mit den immunhistochemisch nachgewiesenen ED-B Fibronektin und Mac-3
Flächenanteilen. Die EZE-Behandlung führt zu einer signifikanten Reduktion der
ED-B Fibronektin und Mac-3 Immunoreaktivität in den Plaques der Arteria
brachiocaphalica (p<0,05). Es ließ sich eine signifikante Reduktion der
Plaquegröße bei den acht Monate alten, mit EZE therapierten ApoE (-/-) KO
Mäusen, verglichen mit kürzer behandelten Tieren, messen (p<0,05), so dass
eine regressive Wirkung des EZE angenommen werden kann. Die Ergebnisse der
Untersuchungen dieser Arbeit zeigen, dass es möglich ist, im ApoE (-/-) KO
Mausmodell mit Hilfe eines NIRF-Farbstoff markierten neuartigen Antikörpers
gegen ED-B Fibronektin atherosklerotische Läsionen, ex vivo hochspezifisch
quantitativ und auch qualitativ zu bestimmen.
de
dc.description.abstract
Available screening and diagnostic methods of coronary heart disease are
insufficient to identify the victims of a lethal myocardial infarction before
the event occurs. For this reason diagnostic methods have to be improved.
Specific biologic aspects of atherosclerosis should be imaged independent of
size and number of lesions. Extracellular matrix molecule ED-B fibronectin is
a potential marker for atherosclerosis. The aim of the study was to determine
if atherosclerotic lesions of ApoE(-/-) knock-out mice may be measured by an
in vivo applied specific single chain antibody against ED-B fibronectin
conjugated with a near-infrared fluorochrome in a near-infrared imaging
system. Mice were analyzed at the age of four, six and eight months. Half of
the mice were treated interventionally with Ezetimibe, a cholesterol
absorption inhibitor. 24 hours after tail-vein injection of the antibody-
conjugate mice were euthanized, the thoracal aorta was explanted and ex vivo
measured. Afterwards Sudan III (red oil) staining was performed, which is the
gold standard in microscopic quantification of atherosclerosis. Furthermore,
atherosclerotic lesions quality and quantity were determined by histology and
immunohistochemical stainings. NIRF-Measurement is a stable, reproducible and
comparable method. ED-B fibronectin expression in mural atherosclerotic
lesions was measured depending on the age and the plaque volume. Ex vivo
intense NIRF signals within the plaques of the aorta and adjacent vessels
could be measured. The results of the plaque area determination by the Sudan
III staining and NIRF measurements correlate significantly (p <0001). The
significant reduction caused by the EZE-treatment in the plaque area of the
six and eight-month-old animals could be detected with the ED-B fibronectin-
NIRF-imaging. Also, the histological plaque area correlated highly with the
immunohistochemical areas of ED-B fibronectin and Mac-3 staining. The EZE-
treatment lead to a significant reduction of ED-B fibronectin and Mac-3
immunoreactivity in the plaques in the artery brachiocephalica (p <0.05).
There was a significant reduction in plaque size for the eight month old ApoE
(-/-) knockout mice, treated with EZE, compared with shorter-treated animals
(p <0.05), so that a regressive effect of EZE be can be assumed. The results
of this work show the possibility to determine highly specific, both
quantitatively and qualitatively atherosclerotic lesions ex vivo in the ApoE
(-/-) knockout mouse model, using a NIRF dye-labeled novel antibody against
ED-B fibronectin.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Eignet sich ED-B Fibronektin als Zielmolekül für Athersoklerose in der Nah-
Infrarot-Fluoreszenz-Bildgebung?
dc.contributor.contact
michaeltachezy@yahoo.de
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. med. K. Graf
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. J. Schrader
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. U. Dirnagl
dc.date.accepted
2009-06-14
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000009118-2
dc.title.translated
ED-B Fibronectin - a potential marker for atherosclerosis?
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000009118
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000005309
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access