dc.contributor.author
Wenzel, Sören-Sebastian
dc.date.accessioned
2018-06-07T23:46:36Z
dc.date.available
2014-09-05T10:31:49.914Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/10969
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-15167
dc.description.abstract
Das diffuse großzellige B-Zell Lymphom (DLBCL) stellt mit einem Anteil von ca.
30-40% den häufigsten Lymphom-Subtyp bei Erwachsenen dar. Es ist eine
heterogene diagnostische Kategorie, die anhand von Genexpressionsanalysen in
zwei vorherrschende molekulare Subtypen unterteilt werden kann: Den
Keimzentrums-B-Zell (GCB) Subtyp und den aktivierten B-Zell (ABC) Subtyp.
Mehrere Studien konnten zeigen, dass diese molekularen Subtypen aus
unterschiedlichen Vorläuferzellen während der B-Zell Entwicklung entstehen,
von der Aktivierung bestimmter Signalwege abhängig sind und unterschiedliche
klinische Verläufe aufweisen. Die Deregulation bestimmter Onkogene und
Signalwege kann zur Entstehung der unterschiedlichen DLBCL-Subtypen beitragen.
Allerdings sind viele der zugrunde liegenden molekularen und zellbiologischen
Mechanismen immer noch unverstanden. Daher sollten in der vorliegenden
Dissertation Subtyp-spezifische Onkogene bei den molekularen DLBCL-Subtypen
identifiziert und ihre molekulare Funktion bei der Pathogenese von DLBCL
untersucht werden. Bei primären DLBCL-Patienten konnte mittels
Genexpressionsanalysen (n = 350; p = 2, 7 x 10-10) und Immunhistochemie (n =
249; p = 0, 001) gezeigt werden, dass ABC DLBCL eine signifikante
Überexpression des anti-apoptotischen Proteins MCL1 aufweisen. Die Auswertung
von array comparative genomic hybridisation (aCGH) Daten bei DLBCL-Patienten
und -Zelllinien zeigte, dass die aberrante MCL1 Expression häufig auf
chromosomale Amplifikationen zurückzuführen ist. Zudem konnte nachgewiesen
werden, dass die konstitutive Aktivierung des JAK/STAT Signalweges zu einer
MCL1 Deregulation bei DLBCL führt. Weitere funktionelle Analysen von MCL1 bei
DLBCL-Zelllinien haben gezeigt, dass sowohl die Herunterregulation der MCL1
Expression mittels shRNA, als auch die Behandlung mit dem BH3-Mimetikum
Obatoclax nur bei Zelllinien mit einer hohen MCL1 Expression toxisch ist und
Apoptose auslöst. Zusätzlich konnte gezeigt werden, dass das Expressionslevel
von MCL1 die Sensitivität von DLBCL-Zelllinien gegenüber diversen
Chemotherapeutika beeinflusst. Des Weiteren konnte bei der Analyse von
Genexpressionsdaten von 350 primären DLBCL-Patienten eine signifikante
Überexpression von IκBζ, einem atypischen Mitglied der IκB-Familie, bei ABC
DLBCL identifiziert werden (p = 5, 7 x 10-37). Die Herunterregulation von IκBζ
mittels shRNA induzierte nur bei ABC DLBCL-Zelllinien und nicht bei GCB DLBCL-
Zelllinien Zelltod. Überraschenderweise zeigten Genexpressionsanalysen, dass
die Herunterregulation von IκBζ die Expression einer Vielzahl von typischen
NF-κB-Zielgenen beeinflusst. Zudem konnte eine Interaktion zwischen IκBζ und
den NF-κB-Untereinheiten p50 und p52 festgestellt werden, die auf eine
regulatorische Funktion von IκBζ auf den klassischen und alternativen NF-κB-
Signalweg deutet. Zusammenfassend unterstreichen die Ergebnisse der
vorliegenden Dissertation die funktionelle Bedeutung von MCL1 und IκBζ bei der
molekularen Pathogenese von DLBCL. Sowohl der Einfluss von MCL1 auf die
Sensitivität von Tumorzellen gegenüber diversen Chemotherapeutika als auch die
Schlüsselposition von IκBζ bei der Regulation NF-κB-abhängiger Zielgene
zeigen, dass eine spezifische Hemmung ihrer Aktivität einen therapeutischen
Nutzen haben kann und sprechen für weitere Evaluationen in zukünftigen
Studien.
de
dc.description.abstract
Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) accounts for approximately 30-40% of all
malignant lymphoma cases in adults. DLBCL is a heterogeneous diagnostic
category and gene expression studies have identified two major molecular
subgroups of DLBCL, termed germinal center B-cell-like (GCB) DLBCL and
activated B-cell-like (ABC) DLBCL. Further studies revealed that these
subgroups arise from different stages of normal B-cell differentiation,
utilize distinct oncogenic mechanisms, and differ in their clinical behaviour.
Deregulation of certain oncogenes and signaling pathways may contribute to the
development of different DLBCL subtypes. However, many of the underlying
molecular and biological mechanisms are not yet fully understood. Therefore,
the aim of the present study was to identify novel subtype specific oncogenes
and to elucidate their molecular function in the pathogenesis of DLBCL.
Evaluation of gene expression profiling data from 350 DLBCL patient samples
revealed the anti-apoptotic BCL2-Family member MCL1 to be upregulated in ABC
compared to GCB DLBCL primary patient samples (p = 2.7 x 10-10).
Immunohistochemistry confirmed high MCL1 protein expression predominantly in
ABC DLBCL in an independent patient cohort (n = 249; p = 0.001). Analysis of
array comparative genomic hybridisation (aCGH) data of DLBCL samples showed
that aberrant expression of MCL1 is often caused by chromosomal
amplifications. Additionally, constitutive STAT3 signaling was shown as a
different mechanism leading to high MCL1 expression. Further analyses revealed
that inhibition of MCL1 either by shRNA or treatment with the BH3-mimetic
obatoclax induced apoptotic cell death only in MCL1 expressing DLBCL cell
lines. Moreover, MCL1 expression levels affected sensitivity of DLBCL cell
lines to chemotherapeutic agents commonly used in the treatment of DLBCL
patients, indicating that MCL1 contributes to therapy resistance. In addition
to these results, gene expression analyses showed that the atypical IκB-family
member IκBζ is expressed in the ABC subtype of DLBCL at significant higher
levels compared to GCB DLBCL patients (n = 350; p = 5.7 x 10-37). Knockdown of
IκBζ using shRNA was toxic to ABC but not to GCB DLBCL cell lines. Gene
expression profiling after IκBζ knockdown revealed a large number of known NF-
κB target genes to be regulated by IκBζ. Further analyses detected a physical
interaction of IκBζ with both p50 and p52 NF-κB subunits, indicating that IκBζ
regulates a specific set of NF-κB target genes by interacting with components
of the classical and alternative NF-κB pathway in ABC DLBCL. Collectively, the
results of this study reveal the functional significance of IκBζ and MCL1 in
the molecular pathogenesis of DLBCL. Both the effect of MCL1 on the
sensitivity towards diverse chemotherapeutic agents as well as the key
position of IκBζ in the regulation of NF-κB-dependent target genes suggest
that their specific inhibition might be an effective therapeutic approach, and
call for further evaluation in future studies.
en
dc.format.extent
V, 57, III S.
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
diffuse large B-cell lymphoma
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::570 Biowissenschaften; Biologie::570 Biowissenschaften; Biologie
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::570 Biowissenschaften; Biologie::572 Biochemie
dc.title
Funktionelle Validierung von Onkogenen bei molekularen Subtypen von diffusen
großzelligen B-Zell Lymphomen (DLBCL)
dc.contributor.contact
soeren_wenzel@web.de
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. Georg Lenz
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. Petra Knaus
dc.date.accepted
2014-08-21
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000097407-4
dc.title.translated
Functional validation of oncogenes in molecular subtypes of diffuse large
B-cell lymphomas (DLBCL)
en
refubium.affiliation
Biologie, Chemie, Pharmazie
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000097407
refubium.note.author
Aus Copyrightgründen sind die Zeitschriftenartikel hier nicht online
veröffentlicht.
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000015726
dcterms.accessRights.dnb
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dcterms.accessRights.openaire
open access