Durchflusszytometrische Analyse von Thrombozytenmembranproteinen in der Regenerationsphase der Thrombopoese nach Knochenmark- und Stammzelltransplantation

Abstract

Diese Arbeit beschäftigt sich mit durchflußzytometrischen Untersuchungen der Membranglykoproteine von Thrombozyten bei Patienten, denen bei maligner Grunderkrankung in kurativer Absicht Stammzellen oder Knochenmark zur Beschleunigung der Regeneration von Blutzellen nach Hochdosischemotherapie appliziert wurden. Die Patienten befinden sich für eine bestimmte Zeit in einer Zellaplasie und sind auf Erythrozyten-, Thrombozytenkonzentrate und Granulozytenwachstumsfaktoren angewiesen. Die Substitution mit Thrombozyten stellt bei einem stammzelltransplantierten Patienten einen wesentlichen Kostenfaktor dar. Nach Thrombozytengabe ist der Patient auch gefährdet durch eine mögliche Alloimmunisierung und Thrombozytenrefraktärität. Um den Bedarf von Thrombozytenkonzentraten möglichst gering zu halten, müssen verläßliche Parameter zur Indikationsstellung herangezogen werden können. Neben klinischen Faktoren (Blutung, Fieber, Infektion) steht bisher lediglich die Thrombozytenzahl routinemäßig zur Verfügung. In der vorliegenden Arbeit sind mithilfe der Durchflusszytometrie wiederholt die Membranglykoproteine als Rezeptoren auf der Oberfläche der Thrombozyten untersucht und die Expression innerhalb der Patientengruppen im zeitlichen Verlauf miteinander verglichen worden. Somit kann der genaue Zelltypus und die Membranglykoproteinexpression einzelner Zellen analysiert werden. Untersucht wurden die Membranglykoproteine Ib, IIb/IIIa, IV, IX, P-Selektin und GP 53. Es wurde deutlich, daß mit den statistisch signifikanten Veränderungen der Membranglykoproteinexpression eine 2 -10 Tage andauernde veränderte Funktionsfähigkeit der Thrombozyten in der Regenerationsphase der Myelopoese einherging, die durch die gesteigerte Expression der Adhäsionsmoleküle GP Ib, GP IV, P-Selektin und GP 53 erkennbar wird. Diese Zunahme der Expression deutet darauf hin, daß in einer bestimmten Phase der Thrombozytenbildung nach totaler Aplasie durch Hochdosischemotherapie trotz geringer Thrombozytenzahl ihre Funktionalität, zumindest die der Adhäsion zeitweise gesteigert ist, so daß, würde man dies in weiteren Untersuchungen bestätigen, die Indikation an fremden Thrombozytenkonzentraten präziser gestellt werden könnte.

This study is meant to analyze platelet membrane glycoproteins of patients with oncologic diseases by flow cytometry. After high dose chemotherapy and stem cell or bone marrow transplantation patients need erythrocyte and platelet concentrates and granulocyte growth factors, because of their cytopenic situation. But to get platelet concentrates means risks of alloimmunization and platelet refractoriness for the patients. Established indications for platelet concentrates are the amount of platelets and clinical factors (bleedings, infections). In this study the platelet membrane glycoproteins Ib (CD 42b), IIb/IIIa (CD 41a), IV (CD 36), IX, P-selectin (CD 62) and glycoprotein 53 (CD 63) were investigated at different times by flow cytometry. So the membrane glycoproteins expression of the single cell could be shown. There were significant differences in the expression of CD 42b, CD 36, CD 62 and CD 63 and for 2-10 days an increase expression with a following decrease could be observed. Therefore measurements of platelet membrane glycoproteins expression as a marker of platelet function after high dose chemotherapy could be helpful for indication of platelet concentrates.