dc.contributor.author
Krawtchenko, Nadja
dc.date.accessioned
2018-06-07T20:42:52Z
dc.date.available
2012-11-27T09:55:11.491Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/7057
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-11256
dc.description.abstract
Einleitung: Aktinische Keratosen (AK) sind Plattenepithelkarzinome in situ der
Haut und treten fast auschließlich in sonnenexponierten Arealen auf. Der
wichtigste äthiologische Faktor der AK ist die UV-Bestrahlung, welche ihre
Wirkung vor allem auf der DNA-Ebene entfaltet. Studien berichten über
unterschiedliche Mutationsraten des TP53-, sowie des Ha-ras-Gens in
Plattenepithelkarzinomen und ihren Vorläufern – den AK. Ziel der Studie: Diese
Studie verglich die initiale sowie nach 12 Monaten bestehende klinische und
histologische Abheilung von AK nach drei unterschiedlichen Behandlungen
(Kryotherapie, 5%ge 5-FU-Salbe, 5%ge Imiquimod-Creme). Im
molekularbiologischen Abschnitt wurden die vor und nach einer Therapie
entnommen Biopsien aus aktinischen Keratosen bzw. abgeheilten Läsionen auf
„missense“ Mutationen in den Exonen 7 und 8 des TP53- und Exon 1 des Ha-ras-
Gens untersucht. Patienten und Methoden: Die Aufteilung der 75
Studienpatienten erfolgte zufällig zu den drei Behandlungsgruppen. Die
Patienten der Kryptherapie-Gruppe erhielten eine bis zwei
Kryotherapieanwendungen (je 20 bis 40 sec pro Läsion). Patienten der 5-FU-
Gruppe wurden zwei Mal täglich, 4 Wochen lang mit 5%iger 5-FU-Salbe lokal
therapiert. Die letzte Patientengruppe wurde in einem oder zwei Zyklen (je
über 4 Wochen drei Mal wöchentlich) lokal mit 5%iger Imiquimod-Creme
therapiert. Klinische Ergebnisse: 68% (17/25) der mit Kryotherapie, 96%
(23/24) mit 5-FU und 85% (22/26) mit Imiquimod behandelten Patienten zeigten
initial eine klinische Abheilung der AK (p < 0.05). Histologisch konnte eine
Abheilung der AK in 32% (8/25) der Kryotherapie-, in 67% (16/24) der 5-FU- und
in 73% (19/26) der Imiquimod-Patienten gesichert werden (p < 0,01). Das
12-Monats Follow-up zeigte eine hohe Rezidivrate bereits abgeheilter, sowie
das Auftreten neuer AK in der 5-FU-, sowie Kryotherapie-Gruppe. Ein Ausbleiben
von Läsionsrezidiven konnte in 28% (7/25) der Kryotherapie-, in 54% (13/24)
der 5-FU- und 73% (19/26) der Imiquimod-Gruppe beobachtet werden (p < 0,01).
Eine anhaltende Abheilung im gesamten behandelten Areal konnte in 4% (1/25),
33% (8/24), und 73% (19/26) der Kryotherapie-, 5-FU- bzw. Imiquimod-Gruppe
erziehlt werden (p < 0,01). Molekularbiologische Ergebnisse: Unter den 75 vor
einer Behandlung untersuchten AK- Biopsien wiesen 5 (7%) eine „missense“ und 1
(1%) eine „nonsense“ Mutation auf. Das Ha-ras-Gen (Exon 1) war zu 1% mutiert,
das TP53-Gen (Exon 7 und 8) zeigte mit 7% eine höhere Mutationsrate. Die
posttherapeutischen Mutationsraten in insgesamt 87 Biopsien zeigten keinen
signifikanten Unterschied zu den prätherapeutischen Ergebnissen. Insgesamt
wiesen 8% (7/87) der Proben eine Mutation auf: das Ha-ras-Gen (Exon 1) war
einmal mutiert (1%, 1/87), das Exon 7 des TP53-Gens war in 2 Proben (2%, 2/87)
und das Exon 8 – in 4 Proben (5%, 4/87) mutiert (n.s.). Die Verteilung der
Mutationen auf die einzelnen Behandlungsgruppen zeigte keinen signifikanten
Unterschied. Schlussfolgerung: Eine Behandlung der aktinischen Keratosen mit
Imiquimod zeigte langfristig das beste klinische Ergebnis. Das schlechtere
langfristige Ergebnis in der Kryotherapie-Gruppe und das damit weiter
bestehenden Risiko für ein invasives Plattenepithelkarzniom deutet auf eine
therapeutische Unzuverlässigkeit der Methode hin. Molekulargenetische
Ergebnisse dieser Studie zeigen eine niedrige Mutationsrate der TP53- sowie
der Ha-ras-gene in frühen AK. Dieses Ergebnis weist erneut auf die
Notwendigkeit einer frühzeitign AK-Therapie hin, insbesondere hinsichtlich der
steigenden Mutationsraten im Laufe der Progression eines
Plattenepithelkarzinoms. Die in dieser Studie gezeigten niedrigen
Mutationsraten des Ha-ras-Gens deuten darauf hin, dass dieses Gen nicht an der
AK-Entstehung beteiligt zu sein scheint. Dagegen kann durch die nachgwiesenen
Mutationsraten des Genes TP53 letzteres eher mit der Entstehung der Erkrankung
assoziiert werden.
de
dc.description.abstract
Background: Actinic keratoses (AK) frequently occur on sun-exposed skin and
are considered as in situ squamous cell carcinoma. To date, no treatment
algorithm exists for first or second line therapies due to the lack of
comparative studies. Ultraviolet radiation induces DNA damage and is the major
risk factor for the development of actinic keratosis. Different mutation rates
of p53 and Ha-ras in cutaneous squamous cell carcinoma (SCC) and the earlier
stage actinic keratosis (AK) have been reported. Objectives: This study
compared the initial and 12-month clinical clearance, histological clearance
and cosmetic outcomes of topically applied 5% imiquimod cream, 5%
5-fluorouracil (5-FU) ointment and cryosurgery for the treatment of AK. All AK
(low-graded) where assessed for the presence of missense mutations in hotspot
exons of p53 and Ha-ras before and after treatment. Patients ⁄ methods:
Patients were randomised to one of the following three treatment groups: one
or two courses of cryosurgery (20–40 s per lesion), topical 5-FU (twice daily
for 4 weeks), or one or two courses of topical imquimod (three times per week
for 4 weeks each). Cryobiopsies of 75 low-graded AK lesions before treatment
and 75 sun-shielded areas of normal skin from 75 AK patients were analysed to
identify mutations in p53 (exons 7 and 8), and Ha-ras (exon 1) using
polymerase chain reaction (PCR) followed by direct sequencing. As a
representative subset of the specimens, ten mutation-negative AK were also
micro-dissected in order to exclude the possibility that additional mutations
were undetected. The assessment was repeated after end of treatment. Results:
68% (17 ⁄ 25) of patients treated with cryosurgery, 96% (23 ⁄ 24) of patients
treated with 5-FU, and 85% (22 ⁄ 26) of patients treated with imiquimod
achieved initial clinical clearance (p < 0,05). The histological clearance
rate for cryosurgery was 32% (8 ⁄ 25), 67% (16 ⁄ 24) for 5-FU, and 73% (19 ⁄
26) in the imiquimod group (p < 0,05). The 12-month follow-up showed a high
rate of recurrent and new lesions in the 5-FU and cryosurgery arms. The
sustained clearance rate of initially cleared individual lesions was 28% (7 ⁄
25) for cryosurgery, 54% (13 ⁄ 24) for 5-FU and 73% (19 ⁄ 26) for imiquimod (p
< 0,01). Sustained clearance of the total treatment field was 4% (1 ⁄ 25), 33%
(8 ⁄ 24), and 73% (19 ⁄ 26) of patients after cryosurgery, 5-FU and imiquimod,
respectively (p < 0,01). The patients in the imiquimod group were judged to
have the best cosmetic outcomes (p < 0,01). Five missense (7%) and one (1%)
nonsense point mutations were found in the 75 AK lesions examined, of which
all were tumour-specific (i.e. present in AK lesions only). The Ha-ras gene
showed mutation in 1%, the p53 (exon 7 and 8) showed a higher mutation rate in
7% of the lesions. The mutation rates after treatment showed no significant
difference compared to the mutation rates before treatment. In total 8% (7/87)
of the biopsies after end of treatment showed a mutation: one (1%, 1/87) in
the Ha-ras gene (Exon 1), two (2%, 2/87) in the p53 gene (Exon 7) and four
(5%m 4/87) in the exon 8 of the p53 gene. There was no significant difference
in the mutation rates in the three treatment groups. Conclusions: Imiquimod
treatment of AK resulted in superior sustained clearance and cosmetic outcomes
compared with cryosurgery and 5-FU. It should be considered as a first line
therapy for sustained treatment of AK. The evaluation of a large number of AK
specimens in this study has found a low gene mutation rate in low-graded AK
lesions. p53 mutations rather than Ha-ras mutations may be an early event in
the development of AK to cutaneous SCC.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
actinic keratosis
dc.subject
comparative study
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Ha-ras- und TP53-Mutationsmuster aktinischer Keratosen in einer
therapeutischen Vergleichsstudie
dc.contributor.firstReferee
PD Dr. rer. nat. I. Nindl
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. U. Hengge, Univ.-Prof. Dr. Dr. J. C. Becker
dc.date.accepted
2012-11-30
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000038791-9
dc.title.translated
Ha-ras- and TP53-mutation pattern of actinic keratosis in a therapeutical
comparative study
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000038791
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000012134
dcterms.accessRights.dnb
free
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open access