Untersuchung zur Rolle der Monozyten in der Pathogenese bei Morbus Still und der atopischen Dermatitis

Abstract

Ziel dieser Untersuchung war es, die Expression von Zelloberflaechenproteinen auf Monozyten bei Patienten mit M. Still zu analysieren und die Ergebnisse mit denen von Kindern mit atopischer Dermatitis und immunologisch gesunden Kindern zu vergleichen. Verschiedene Untersuchungen zeigten, dass bestimmte Monozytensubpopulationen (charakterisiert durch Zelloberflaechenmarker) bei bestimmten Erkrankungen charakteristisch sind, unter anderem wurden CD14+CD16+ Monozyten vermehrt bei rheumatoider Arthritis gefunden und waehrend der akuten Phase der atopischen Dermatitis machten CD14+CD64-CD16+ Monozyten einen erhoehten Anteil aus. In der vorliegenden Arbeit wurden Monozyten hinsichtlich der Expression von CD14, CD64, CD32, CD33, HLA-DR, CD11a, CD11b und CD16 von 13 Kindern mit Morbus Still, 11 Kindern mit atopischer Dermatitis (AD) und 18 immunologisch gesunden Kindern mittels der durchflusszytometrischen Analyse untersucht. Es wurde eine neue Methode zur moeglichst genauen Isolierung von Monozyten erarbeitet, die besonders zu Untersuchungen geeignet ist, bei denen wenig Material vorhanden ist. Es zeigten sich signifikant (p<0,01) weniger CD11b+CD16-/+ Monozyten bei den Still Patienten, demgegenueber war der Anteil von CD11b-CD16- signifikant erhoeht im Vergleich zu den Gesunden. Bei den AD Patienten waren CD11b+CD16- und CD33+CD16- Monozyten signifikant vermindert, andererseits waren CD11b-CD16- und CD33+CD16+ Monozyten signifikant vermehrt, verglichen mit den Gesunden. Der Vergleich der Erkrankungsgruppen erbrachte einen signifikant geringeren Anteil von CD32+CD16-, CD33+CD16- und HLA- DR+CD16- bzw. einen signifikant hoeheren Anteil von CD33+CD16+, HLA-DR+CD16+ und CD11a++CD16+ bei den AD Patienten. Weiterhin wurde die Staerke der Expression von HLA-DR, CD33, CD11a, CD11b und CD16 analysiert, bei der sich signifikante Unterschiede (p<0,01) ergaben, insbesondere die CD11b Expression war bei beiden Erkrankungsgruppen staerker. In der vorliegenden Untersuchung konnten verschiedene Monozytensubpopulationen anhand der Expression von ausgewaehlten Oberflaechenmarkern erstmalig bei immunologisch gesunden Kindern charakterisiert werden. Weiterhin erbrachte einerseits der Vergleich zwischen gesunden und kranken Kindern einen veraenderten Anteil bestimmter Monozytensubpopulationen. So machten reifere Monozyten mit starker CD11b Expression, die besser in das entzuendete Gewebe migrieren koennen, bei beiden Erkrankungsgruppen einen verminderten Anteil aus. Andererseits zeigte der Vergleich zwischen den beiden Erkrankungsgruppen, dass verschiedene Monozytensubpopulationen pathogenetisch bei der jeweiligen Erkrankung eine Rolle zu spielen scheinen, beispielsweise sind bei der AD CD16+ Monozyten mit bestimmten Expressionsmustern bedeutsam.

The objective of this study was to analyse the expression of cell surface proteins on monocytes in patients with Morbus Still and to compare the results with those of children with atopic dermatitis (AD) and immunologically healthy children. Various studies have shown that certain monocyte subpopulations (characterised by cell surface markers) are characteristic of certain diseases. In rheumatoid arthritis, for example, an increased number of CD14+CD16+ monocytes could be detected, and during the acute phase of AD, the patients showed an increase in the number of CD14+CD64-CD16+ monocytes. In the present study, the flow cytometry analysis was used to examine the monocytes of 13 children with Morbus Still, 11 children with AD and 18 immunologically healthy children with regard to the expression of CD14, CD64, CD32, CD33, HLA- DR, CD11a, CD11b and CD16. A new method for precise isolation of monocytes has been developed, which is particularly suitable for analyses with only small amounts of material available. Compared to the healthy subjects, there were significantly (p<0,01) less CD11b+CD16-/+ monocytes in the Morbus Still patients whereas the number of CD11b-CD16- monocytes was significantly higher. In the AD patients, the number of CD11b+CD16- and CD33+CD16- monocytes was significantly lower, whereas the number of CD11b-CD16- and CD33+CD16+ monocytes was significantly higher compared to the healthy subjects. Comparing the disease groups, the AD patients showed a significantly lower proportion of CD32+CD16-, CD33+CD16- and HLA-DR+CD16- and a significantly higher proportion of CD33+CD16+, HLA-DR+CD16+ and CD11a++CD16+. Furthermore, the intensity of expression of HLA-DR, CD33, CD11a, CD11b and CD16 was analysed and showed significant differences (p<0,01). Particularly the CD11b expression was higher in both disease groups. In the present study, different monocyte subpopulations were analysed in immunologically healthy children for the first time using the expression of selected cell surface markerss. Furthermore, the comparison of healthy and sick children showed different quantities of certain monocyte subpopulations: the two disease groups showed a lower proportion of more mature monocytes with a strong CD11b expression, because these monocytes are able to migrate into the inflamed tissue more easily. The comparison of the two disease groups suggested that different monocyte subpopulations seem to be part of the pathogenesis of the respective disease. In AD, for example, CD16+ monocytes with special expression patterns seem to play an important role.