dc.contributor.author
Angres, Silvia
dc.date.accessioned
2018-06-07T18:27:37Z
dc.date.available
2010-02-11T08:15:45.279Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/5053
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-9252
dc.description.abstract
In dieser Arbeit sollte untersucht werden, ob es Substanzen gibt, die die
Sebum-Produktion regulieren und die Einfluss auf das Entzündungsgeschehen in
den SZ95-Sebozyten nehmen. Dazu wurde die Expression der
Fettsäuresyntheseenzyme: SCD und FADS2, sowie des in der Entzündungskaskade
involvierten TLR2 durch RT-PCR und Western Blot untersucht. Um die Effekte auf
die Entzündungskaskade weiter zu verifizieren, wurde die Synthese von
proinflammatorischen Zytokinen (Il-6 und IL-8), sowie des neuroendokrinen
Stresshormons CRH mittels ELISA untersucht. Eine Behandlung der SZ95-Sebozyten
mit den Omega-6-Fettsäuren Linolsäure und Arachidonsäure führte zu einer
erhöhten IL-6-Freisetzung und einer vermehrten Transkription und Translation
des SCD-Gens. Linolsäure ist zusätzlich in der Lage die FADS2-Expression in
den SZ95-Sebozyten zu erhöhen, wodurch es seine eigene Metabolisierung in
Arachidonsäure begünstigt und damit die Ausgangssubstanz für Prostaglandine
und Leukotriene liefert. Die Behandlung mit Arachidonsäure führte hingegen
über einen Negativ-Feedback- Mechanismus zu einer Reduktion der
FADS2-Expression. Es scheint, dass Arachidonsäure als Endprodukt im
Fettsäuremetabolismus ihr eigenes Syntheseenzym hemmt, wenn sie in
ausreichender Menge vorhanden ist. Diese Daten zeigen, dass die hier
untersuchten Omega-6-Fettsäuren Einfluss auf ihren eigenen Stoffwechsel
nehmen. Zusätzlich sind sie in der Lage indirekt über ihre Metabolite
(Prostaglandine und Leukotriene), sowie direkt über die Produktion
proinflammatorischer Zytokine und der verstärkten TLR2- Expression das
Entzündungsgeschehen in SZ95-Sebozyten zu beeinflussen. Insgesamt konnte
gezeigt werden, dass eine Behandlung mit Omega-6-Fettsäuren die
Entzündungssignalwege in den SZ95-Sebozyten stimuliert. In dieser Arbeit
konnte auch gezeigt werden, dass NVP-LCF368, ein SCDExpressionshemmer, eine
vorher durch MALP-2 oder Testosteron/Linolsäure stimulierte SCD- und
FADS2-Transkription deutlich reduzieren kann. Inwieweit eine systemische oder
topische Anwendung von NVP-LCF369 für die Therapie von Erkrankungen, die mit
Seborrhoe assoziiert sind (z.B. Akne), verwendet werden kann, sollte in
nachfolgenden Studien untersucht werden. Dexamethason, ein Glucokortikoid,
wurde als Kontrolle eingesetzt, zeigte aber nicht die erwarteten,
antiinflammatorischen Effekte. Es reduzierte zwar deutlich die IL-6 und IL-8
Produktion der SZ95-Sebozyten, hatte aber nicht den erwarteten hemmenden
Effekt auf die Expression des SCD-, FADS2- und des TLR2-Gens. Die klinisch
gesehenen Symptome einer Langzeittherapie mit Steroiden (Atrophie der Haut,
verzögerte Wundheilung) sind möglicherweise durch einen Mangel an
antibakteriellen MUFAs verursacht. Die dafür als ursächlich anzusehende
Suppression des SCD-Gens konnte nach 24 h Behandlungsdauer nicht gesehen
werden. Es erscheint daher sinnvoll, die Langzeiteffekte unter
Steroidbehandlung auch in in vitro-Langzeitstudien zu untersuchen. Die CRH-
Synthese der SZ95-Sebozyten konnte durch MALP-2, einem selektiven TLR2
-Rezeptor-Agonisten, und CRH stimuliert werden. Die CRHBehandlung zeigte
Einfluss auf die Lipid- und Entzündungssignalkaskade, im Sinne einer
vermehrten SCD-, FADS2- und TLR2-Expression. Die hier gezeigten Daten zeigen,
dass CRH, als neuroendokriner Mediator, in der Lage ist, direkt auf den
Lipidstoffwechsel zu wirken, indem es die Expression von lipogenen Enzymen
beeinflusst. Diese Daten stützen das Modell einer peripheren Stressachse, das
zeigt, dass zentral gebildetes CRH nicht nur im ZNS wirken kann, sondern auch
in peripheren Geweben. Durch dieses Stressmodell, ist man in der Lage, bisher
unverstandene Pathomechanismen von Hauterkrankungen zu erklären. In dieser
Arbeit konnte gezeigt werden, dass CRH die Sebum-Produktion der SZ95-Sebozyten
verändern kann, indem es direkt auf den Lipidmetabolismus der Zellen wirkt und
die durch bakterielle Antigene ausgelöste Entzündungsantwort verstärkt. Damit
konnte das Konzept eines peripheren Stressmechanismus verstärkt werden.
de
dc.description.abstract
In this work is examined, if there are substances, which can regulate the
sebum production and affects the inflammatory process in SZ-95-sebocytes. For
this the fatty acid synthesis enzymes SCD and FADS2, and the TLR2 as a
receptor involved in the inflammatory process were tested with RT-PCR and
Western Blot. To verify the effects on the inflammatory process the synthesis
of the pro-inflammatory cytokines (IL-6 and IL-8), and of the neuroendocrine
hormone CRH were tested by using ELISA. Treatment of the SZ95-sebocytes with
the ω-6-fatty acids linoleic acid (LA) and arachidonic acid (AA) led to an
increased IL-6 release and an increased transcription and translation of the
SCD gene. Furthermore linoleic acid up-regulated the expression of the FADS2
in SZ-95 sebocytes and is therefore able to promote their own metabolism to
arachidonic acid, the precursor for prostaglandins and leukotrienes. Treatment
of arachidonic acid led to a reduction of the FADS2 expression by a negative-
feedback mechanism. It seems that arachidonic acid as an end-product in the
fatty acid metabolism can inhibit its own synthesis enzyme. These data show
that ω-6 fatty acids influence their own metabolism. Furthermore they
influence the inflammatory process indirectly by their metabolites
(prostaglandins and leukotrienes) and directly by production of pro-
inflammatory cytokines. Altogether it is shown, that treatment with ω-6 fatty
acids stimulates the inflammation pathways in SZ95-sebocytes. Treatment with
the SCD-inhibitor NVP-LCF369 reduced the LA/testosterone-upregulated or MALP-
upregulated SCD and FADS mRNA levels. To what extend a systemic or topical use
of NVP-LCF369 can be used as a treatment for diseases associated with
seborrhoea (e.g. acne) should be examined in further studies. Dexamethasone, a
glucocorticoid, used as a control, did not show the expected anti-inflammatory
effects. It reduced the IL-6 and IL-8 production significantly, but did not
have the expected suppressive effect on the SCD- FADS2- and
TLR2-expression.The clinical symptoms of long-term use with steroids (e.g.
skin atrophy, decelerated wound healing) are probably caused by a lack of
antibacterial monounsaturated fatty acids (MUFA). This should be realized by
suppression of the SCD-gene. This effect could not be shown in this work after
24 hour treatment with dexamethasone. It seems necessary that long-term
effects are examined by long-term in vitro studies. CRH-synthesis in
SZ95-sebocytes was stimulated by MALP-2 ( a selective TLR2-agonist) and CRH
itself. CRH-treatment influenced the lipid- and inflammatory-signalling
pathway in terms of a changed SCD-, FADS2- and TLR2-expression. These data
show that CRH as an neuroendocrine mediator affects the lipid metabolism
directly by affecting the expression of lipogenic enzymes. This supports the
model of a peripheral stress axis, which shows that CRH is not only able to
act in the CNS, but in the peripheral tissue as well. By using this model it
is possible to explain pathomechanisms of skin diseases. The data show that
CRH affects the sebum production of the SZ95-sebocytes by affecting the lipid
metabolism and intensify the inflammatory response. This strengthens the
concept of a peripheral stress-mechanism.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
SZ-95-sebocytes
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Die Regulation des Fettsäuremetabolismus in den SZ95-Sebozyten
dc.contributor.contact
s_angres@web.de
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. med. C. C. Zouboulis
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. A. Pfeiffer
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. S. R. Bornstein
dc.date.accepted
2010-03-19
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000015730-3
dc.title.translated
The regulation of the fatty acid metabolism in SZ95-sebocytes
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000015730
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000007014
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access