dc.contributor.author
Derwiysh, Alaa
dc.date.accessioned
2018-06-07T18:08:10Z
dc.date.available
2013-01-25T09:39:52.077Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/4688
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-8888
dc.description.abstract
YAP-protein is a transcription factor coactivator which is able to coactivate
a broad spectrum of transcription factors that represent the downstream of
different signaling pathways leading to quite different outcomes: oncogenesis,
tumour suppression and apoptosis or differentiation. This study is an attempt
to assess the expression of YAP protein and its biological role in cell lines
representing different types of follicular cell-derived thyroid cancer and
tissue specimens of normal, non-neoplastic and different neoplastic thyroid
lesions using RT-PCR, Western blot and immunohistochemistry. RT-PCR
demonstrated an increased expression of YAP mRNA in different types of thyroid
can-cer cell lines in comparison to that in the normal thyroid tissues.
Western blot confirmed YAP mRNA expression and showed that most of the YAP
protein is phosphorylated at Ser-127 and strongly coexpressed with its
candidates phosphorylating kinases AKT and/or LATS1. To dem-onstrate the real
biological function of YAP-protein in these cell lines, YAP expression was
knocked down in one thyroid cancer cell line (FTC-133) by RNAi technique using
anti-YAP shRNA. The knocking down led to a dramatic reduction in apoptosis
simultaneously with in-creasing resistance to cisplatin treatment but not to
other four cytotoxic drugs (doxorubicin, mi-toxantron, vincristin and
etoposide). Immunohistochemistry confirmed these findings, where it
demonstrates that YAP protein is increased in its expression and accumulates
predominantly cy-toplasmically as a phosphorylated form at Ser-127 residue
with a prominent reduction in its ac-cumulation in the nuclei in different
follicular cell- derived thyroid carcinomas in comparison to normal thyroid
tissues. This study concluded that the high nuclear expression of YAP in
normal thyrocytes will be changed to accumulate predominantly in the cytoplasm
in malignant thyrocytes. Ser-127 phos-phorylation of YAP may play a
significant role in this change. At the same time, YAP plays a significant
role in selectively increasing chemosensitivity of thyroid cancer cell
(FTC-133) to cisplatin but not to doxorubicin, mitoxantron, vincristin and
etoposide.
de
dc.description.abstract
Das Yes assozierte Protein (YAP) ist ein transkriptionfaktorkoaktivator für
ein breites Spektrum von Transkriptionsfaktoren, welche in eine Vielzahl von
Signalwegen involviert sind, die wie-derum an verschiedenen biologischen
Prozessen wie Zelldifferenzierung, Tumorsuppression bzw. Onkogenese beteiligt
sind. Ziel der vorliegenden Arbeit ist die Untersuchung der YAP-Expression in
follikelzell- ausgehen-den Schilddrüsenkarzinomlinien und Schilddrüsengeweben
verschiedener Schilddrüsenläsionen auf Protein- und Genebene, durch real-time
PCR, Western Blot und Immunhistochemie. Ferner sollte der Einfluss von YAP auf
die Proliferation, Apoptose und Chemoresistenz in malignen Schilddrüsenzellen
ermittelt werden. Auf mRNA-Ebene konnte, im Vergleich zu normalen
Schilddrüsengeweben, eine erhöhte YAP-Expression in den verschiedenen
Schilddrüsenkarzinomzelllinien festgestellt werden. Diese Be-obachtung ließ
sich auf Proteinebene, mittels Western Blot-Technik und Immunhistochemie,
bestätigen. Dabei zeigte sich, dass follikelzell- ausgehende
Schilddrüsenkarzinomen eine vor-nehmlich zytoplasmatische Akkumulation von YAP
aufweisen. Überdies war der Großteil der YAP-Proteine am Serin 127
phosphoryliert. Und stark exprimiert mit den Zielprotienen AKT und/oder LATS1.
Um die biologische Relevanz von YAP in vitro näher zu untersuchen, wurde
dessen Expression in der Zelllinie FTC-133 durch den Einsatz von anti-YAP
shRNA gehemmt. Die verminderte YAP-Expression hatte eine signifikante
Reduktion der Apoptose, bei gleichzei-tig verstärkter Resistenz gegenüber
Cisplatin, aber nicht gegenüber Doxirubicin, Mitoxantron, Vincristin und
Etoposid, zur Folge. Die vorliegende Arbeit zeigt, dass maligne Thyrozyten, im
Gegensatz zu normalen Thyrozyten, eine zytoplasmatische Überexpression von YAP
aufweisen. Höchstwahrscheinlich ist die Phosphorylierung von YAP am Serin 127
dabei von Bedeutung. Gleichzeitig spielt YAP eine wichtige Rolle in der
selektiven Erhöhung der Chemosensitivität gegenüber Cisplatin.
de
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
Yes-associated protein
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Yes-associated protein (YAP) expression and its biological role in thyroid
gland
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. Dr. H. Lage
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. C. Röcken
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. G. Kristiansen
dc.date.accepted
2013-02-01
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000042042-1
dc.title.translated
Yes-associated Protein (YAP) Expression und seine biologische Rolle in der
Schilddrüse
de
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000042042
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000012762
dcterms.accessRights.dnb
free
dcterms.accessRights.openaire
open access