dc.contributor.author
Raue, Claudia
dc.date.accessioned
2018-06-07T17:41:28Z
dc.date.available
2010-08-04T09:49:20.311Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/4141
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-8341
dc.description.abstract
Pharmakoresistenz ist ein wesentliches Problem bei der Therapie der
Temporallappenepilepsie. Bei einem Teil der Patienten kann durch chirurgische
Entfernung des epileptogenen Hirngewebes Anfallsfreiheit erreicht werden. Kann
das entfernte Gewebe vital erhalten werden, können Pathomechanismen der
Pharmakoresistenz in vitro untersucht werden. An der Blut-Hirn-Schranke und im
Parenchym des epileptogenen Gewebes werden ATP-abhängige Transportproteine
(MDT) exprimiert. Es wird vermutet, dass diese Proteine die Anreicherung der
AED im epileptogenen Gewebe behindern und dadurch an deren Wirkort eine
unzureichende Konzentration vorliegt (Transporter-Hypothese). Unsere
Arbeitsgruppe wollte den Beitrag der im Parenchym lokalisierten MDT zur
Pharmakoresistenz experimentell abschätzen. Zelluläre und regionale
Unterschiede der Expression von P-Glykoprotein (Pgp), Mitgliedern der MRP-
Proteinfamilie (MRP1, MRP2, MRP5) und des „Major Vault Proteins“ (MVP) im
resezierten Hippokampus und Temporalen Kortex sollten ermittelt und
Zusammenhänge zu histopathologischen Gewebeveränderungen bzw. klinischen
Merkmalen der untersuchten Patientenstichprobe aufgedeckt werden. Es wurden
hippokampale und/oder kortikale Gewebeproben von 28 Patienten
immunhistochemisch untersucht. Die quantitative Analyse erfolgte nach
Diaminobenzidin- Einfachfärbung mittels computergestützter mikroskopischer
Zellzählung in 10 µm dicken Gefrierschnitten. Zur Zuordnung der
Immunreaktivität zu Nerven- oder Gliazellen erfolgten
Doppelfluoreszensfärbungen. In den Gewebeproben fanden sich alle untersuchten
Transportproteine. Im Hippokampus waren im Mittel 30 % der Neurone und 25 %
der Astrozyten immunreaktiv, im Temporalen Kortex 22 % der Nervenzellen und 26
% der Astrozyten. In den Neuronen des Gyrus dentatus wurden alle MDT in
signifikant geringerem Maße exprimiert als in den anderen Regionen. Im
Temporalen Kortex wurden in den oberen Schichten häufiger MVP-immunpositive
Nervenzellen gefunden. MRP1-reaktive Astrozyten kamen häufiger im Hippokampus
als im Temporalen Kortex vor und eine stärkere neuronale Expression von MVP
zeigte sich im Kortex. Die MDT-Expression im sklerotischen und nicht
sklerotischen Hippokampusgewebe differierte kaum. Kortexproben mit klar
umschriebener Pathologie wiesen eine geringere neuronale MDT-Immunreaktivität
auf als solche, die keine oder nur diffuse gliotische Veränderungen aufwiesen.
Hinsichtlich der klinischen Merkmale des Patientenkollektivs bestanden
positive Korrelationen zwischen dem Lebensalter und der Rate
MRP1-exprimierender kortikaler Zellen. Ferner zeigte sich für wenige Patienten
mit verminderter Akkumulation von AED ein größerer Anteil Pgp-exprimierender
Zellen im Hippokampus als bei normaler Akkumulation.
de
dc.description.abstract
Pharmacoresistance is a crucial problem in treatment of patients with temporal
lobe epilepsy. A proportion of these patients undergo epilepsy surgery to
reduce seizure frequency. If resected tissue remains vital, pathomechanisms of
pharamacoresistance can be explored in vitro. At the blood-brain barrier and
at brain parenchyma of epileptic tissue ATP-dependent transport proteins are
expressed. Transporter-hypothesis contents that these proteins reduce AED-
accumulation in epileptogenic tissue and therefore decrease their
concentration at their intra- and extracellular targets. Our investigation
group studied the contribution of MDT located at brain parenchyma to
pharmacoresistance. Cellular and regional distribution patterns of pgp, MRP1,
MRP2, MRP5 and MVP at resected hippocampal and cortical tissue as well as
potential correlations to histopathologic changes and clinical features of the
patient group should be determined. Hippocampal and cortical tissue samples of
28 patients were analysed by immunohistochemistry. Quantitative analysis was
performed at diaminobencidine-stained slices (10µm frozen sections) by
computer assisted microscopic cell count. Double-fluorescense staining was
also done in some cases to relate immunoreactivity (IR) to neuronal or glial
cells. All MDT were detected in the tissue samples. Mean neuronal IR at
hippocampus was 30%, glial IR was 25%. In cortical samples neuronal IR was
22%, glial IR was 26%. IR was significantly lower in granule cells of dentate
gyrus compared to other hippocampal regions. At temporal cortex MRP-
immunoreactive neurons were localized more frequently at upper layers.
MRP1-positive glial cells dominated in hippocampal slices compared to cortical
samples and a stronger neuronal expression of MVP became apparent in temporal
cortex. Expression of MDT between sclerotic and non-sclerotic hippocampal
tissue were only slightly different. Cortical samples with clearly defined
pathology had a smaller neuronal MDT-IR compared to those with absent
pathology or diffuse gliosis. Concerning clinical features of patient sample a
positive correlation between age and rate of MRP1-immunoreactive cortical
cells became apparent. Furthermore for a few patients with reduced AED-
accumulation a greater rate of pgp-expressing cells in hippocampus became
evident.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
temporal lobe epilepsy
dc.subject
pharmacoresistance
dc.subject
transporter proteins
dc.subject
temporal cortex
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::610 Medizin und Gesundheit
dc.title
Ektope Expression ATP-abhängiger Transportproteine im humanen resezierten
epileptogenen Gewebe
dc.contributor.contact
claudia.raue@uniklinikum-dresden.de
dc.contributor.firstReferee
Prof. Dr. Uwe Heinemann
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. rer. nat. G. Ahnert-Hilger
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. med. H. Beck
dc.date.accepted
2010-09-03
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000017532-9
dc.title.translated
Ectopic Expression of ATP-dependent transporter proteins in human resected
epileptic tissue
en
refubium.affiliation
Charité - Universitätsmedizin Berlin
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000017532
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000007606
dcterms.accessRights.dnb
free
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open access