Untersuchung zur immunmodulierenden Wirkung von Milchsaft aus Euphorbia mauritanica L. auf humane Hautzellen

Abstract

Die vorliegende Arbeit dient der Untersuchung zur immunmodulierenden Wirkung von Milchsaft aus Euphorbia mauritanica L. auf humane Hautzellen. Milchsäfte der Pflanzenfamilie Euphorbiaceae gehören zu den am stärksten entzündungsauslösenden Pflanzensäften im gesamten Pflanzenreich. Entzündliche Haut- und Augenreaktionen nach dem Kontakt mit Milchsäften einiger Euphorbiaceae, wie z.B. dem von Hippomane mancinella L., sind ein massives Problem für Menschen, die in unmittelbarer Nähe zu diesen Pflanzen leben und mit ihnen in Kontakt kommen. Neben Proteinen wie Proteasen, Lysozym und Chitinasen beinhalten die Milchsäfte der Euphorbiaceae auch sekundäre Pflanzeninhaltsstoffe wie Diterpene, Zucker, Alkaloide oder Polyterpene. Da die Ursachen der Immunreaktionen auf die Milchsäfte bisher nicht geklärt ist, sollte in der vorliegenden Arbeit der Milchsaft von Euphorbia mauritanica L. (Euphorbiaceae) auf seine immunmodulierende Wirkung an humanen Hautzellen untersucht werden. Neben den G-Protein-gekoppelten Protease-aktivierten Rezeptor 2 (PAR2) ist auch die Aktivierung der PKC durch Diterpene geeignet, Entzündungsreaktionen auslösen zu können. Mögliche synergistische Einflüsse sollten dahingehend untersucht werden. Dazu wurde zunächst ein humanes Hautmodell entwickelt, um Informationen über die immunmodulierende Wirkung des verdünnten Milchsaftes von E. mauritanica zu erhalten. Desweiteren wurde an HaCaT-Keratinozyten und primären humanen dermalen Fibroblasten untersucht, ob es einen gemeinsamen Effekt in der Entzündungsmediation zwischen der in E. mauritanica stark exprimierten Protease Mauritanicain und dem Diterpen Phorbol-12-myristat-13-acetat gibt. Dazu wurde die relative Freisetzung von IL-8 Parameter zur Entzündungsauslösung gemessen und mit dem positiven PAR2 Agonisten 2-Furoyl-LIGRLO-Amid verglichen. In der vorliegenden Dissertation konnte zusätzlich die Aminosäuresequenz von der Subtilisin-like Protease Mauritanicain aufgeklärt werden.