dc.contributor.author
Stark, Robert
dc.date.accessioned
2018-06-08T01:12:30Z
dc.date.available
2006-03-09T00:00:00.649Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/13084
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-17282
dc.description
Deckblatt-Impressum
Inhaltsverzeichnis
Abkürzungsverzeichnis
Einleitung
Literaturübersicht
Eigene Untersuchungen
Ergebnisse
Diskussion
Zusammenfassung
Summary
Literaturverzeichnis
Anhang
Eigene publizierte Ergebnisse
Danksagung
Selbständigkeitserklärung
dc.description.abstract
In dieser Arbeit wurde der Phänotyp von tumorbegleitenden Immunzellen in
kutanen Hauttumoren beim Pferd untersucht und versucht, unter Verwendung eines
breiten Spektrums monoklonaler Antikörper, der in-situ-Hybridisierung und der
RT-PCR eine Momentaufnahme des Infiltrationsmusters von Immunzellen abzubilden
und daraus mögliche Schlussfolgerungen zu ziehen. Im Rahmen dieser Studie
wurden zunächst 200 Sarkoide, 32 Papillome, 30 Melanome, 29
Plattenepithelkarzinome und 27 Fibrosarkome aus dem Fundus des Instituts für
Veterinär-Pathologie der Freien Universität Berlin mittels H&E; Färbung
nachdiagnostiziert, sodaß für weitere Untersuchungen 179 Sarkoide, 15
Papillome, 27 Melanome, 25 Plattenepithelkarzinome und 19 Fibrosarkome zur
Verfügung standen. Diese Tumore wurden mittels immunhistochemischer Methoden
auf verschiedene tumorbegleitende Immunzellen untersucht. Die gegen humanes
CD3, CD79a, MAC387 (Monozyten/Makrophagenmarker) und S100 gerichteten
Antikörper zeigten eine positive Reaktion in equinem Gewebe. Da der anti-
MAC387 Antikörper sowohl auf Monozyten als auch auf Makrophagen nachzuweisen
war, wurde equines CD68 sequenziert und mittels RT-PCR und RNA-in-situ
Hybridisierung (radioaktiv-markierte 35S-RNA-Sonden) im Gewebe nachgewiesen.
S100 weist ebenfalls ein breites Reaktionsspektrum auf, das sowohl epidermale
Langerhanszellen als auch Melanozyten und peripheren Nerven beinhaltet, sodaß
für einen spezifischen Langerhanszellnachweis equines CD1a sequenziert und
mittels RT-PCR in equiner Haut nachgewiesen wurde. Im Verlauf einer malignen
Transformation von normaler Zelle zur Tumorzelle können Veränderungen der
Zelloberflächenstrukturen auftreten (z.B. Expression von Tumorantigenen,
Verlust von MHC-Molekülen), die eine Erkennung der Tumorzellen als fremd
ermöglichen. Die ausgelösten sowohl humoralen als auch zellulären
Immunreaktionen, an denen Antigen-präsentierende Zellen und Lymphozyten
beteiligt sind, führen zur Bildung spezifischer Antikörper und Killerzellen
gegen erkannte Tumorantigene. Zwischen beiden Effektorsystemen des
Immunsystems existieren sehr komplexe spezifische und unspezifische,
kooperative und regulative Beziehungen. Sie provozieren durch das
Tumorwachstum bedingte Zellnekrosen in der Umgebung Entzündungsreaktionen.
Dabei spielen Antigen-präsentierende Zellen wie beispielsweise dendritische
Zellen eine wichtige Rolle. APC nehmen über Phagozytose Tumorzellbruchstücke
auf, präsentieren einerseits diese in bearbeiteter Form über MHC-Moleküle
T-Zellen andererseits aktivieren sie direkt NK-Zellen. In Übereinstimmung mit
Untersuchungen anderer Autoren beim Menschen, nahmen CD68-positive Makrophagen
und T-Zellen in der vorliegenden Untersuchung bei allen Tumoren, mit Ausnahme
bei Fibrosarkomen, den größten Anteil ein. Mit dem Nachweis von T-Zellen in
allen Tumorentitäten, besaßen alle untersuchten Patienten potentiell
zytotoxische Effektorzellen. Diese Ergebnisse sprechen für eine aktive
Auseinandersetzung des Immunsystems mit den Tumoren. Trotz ihres zytotoxischen
Potentials scheinen die T-Zellen häufig keine ausreichende Tumorkontrolle in
vivo ausgeübt zu haben, da in den meisten Fällen die Tumore keine Anzeichen
von Regression aufwiesen. Die Immunzellinfiltrate der untersuchten
Fibrosarkome unterschieden sich von den anderen Tumoren dadurch, dass
Lymphozyten nur eine untergeordnete Rolle spielten. Auffallend war hier das
Dominieren von Antigen-präsentierenden Zellen.
de
dc.description.abstract
In this thesis the phenotype of tumor associated immune cells of equine
cutaneous skin tumors was examined. Using a wide spectrum of monoclonal
antibodies as well as in situ hybridizing and RT-PCR a snapshot of the
infiltration pattern of immune cells was taken and possible conclusions were
considered. In the context of this study 200 equine sarcoids, 32 papillomas,
30 melanomas, 29 squamous cell tumors and 27 fibrosarcomas from the files of
the Institute for Veterinary Pathology of the Free University of Berlin were
rediagnosed using H&E; staining. After rediagnosing 179 equine sarcoids,
15 papillomas, 27 melanomas, 25 squamous cell tumors and 19 fibrosarcomas were
available for further investigations. Firstly, these tumors were examined for
different tumor associated immune cells by means of immunohistochemical
methods. The antibodies directed against human CD3, CD79a, MAC387
(monocytes/macrophages) and S100 showed a positive reaction in equine tissues.
Since the MAC387 was positive on both, monocytes and macrophages, equine CD68
was amplified and verified by using RT-PCR and RNA in situ hybridizing (35S-
RNA radioactive marked probe).The S100 antibody indicates likewise a wide
reaction spectrum, which contains both epidermal Langerhans cells as well as
melanocytes and peripheral nerves. For a specific Langerhans cells detection
equine CD1a was amplified and verified by RT-PCR in equine skin. During the
process of malignant transformation from "normal" cell to tumor cell,
modifications of the cell surface (e.g. expression of tumor antigens, loss of
MHC molecules) can occur, which enable a recognition of the tumor cells by the
immune system. Humoral and also cellular immune reactions, in which antigen-
presenting cells and lymphocytes are involved, lead to the development of
specific antibodies and killer cells against the detected tumor antigens.
Between the both effector systems of the immune system exist a very complex
linkage of specific and nonspecific cooperative regulations. Cell necrosis
induced by tumor growth provoke inflammation reactions in the enviroment. In
that process antigen presenting cells (APC), for example dendritic cells, play
an important role. APC phagoticytize tumor cell fragments, present them in
processed form to T cells together with MHC molecules or activate natural
killer cells directly. In this work CD68 positive macrophages and T cells were
observed as the most frequent cell population in all examined tumors, with
exception in fibrosarcomas. This is in agreement with other authors in humans.
In all examined patients potentially cytotoxic effector cells, indicated by
the presents of T cells in all tumor, could be observed. These results show an
activity of the immune system against that tumors. Despite their potential
cytotoxic effects, the T cells observed showed no sufficient tumor control in
vivo, since in most cases the tumors did not indicate signs of regressions.
Immune cell infiltrates of the examined fibrosarcomas differed from that of
other tumors by the fact that lymphocytes played only a subordinated role,
while antigen presenting cells were dominating.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject.ddc
600 Technik, Medizin, angewandte Wissenschaften::630 Landwirtschaft::630 Landwirtschaft und verwandte Bereiche
dc.title
Phänotypisierung tumorbegleitender Immunzellpopulationen in equinen
Hauttumoren
dc.contributor.firstReferee
Univ.-Prof. Dr. Roland Rudolph
dc.contributor.furtherReferee
PD Dr. Jakob Walter
dc.contributor.furtherReferee
Univ.-Prof. Dr. Klaus-Dieter Budras
dc.date.accepted
2005-05-27
dc.date.embargoEnd
2006-03-10
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-2006001471
dc.title.translated
Phenotyping of tumour associated immune cells in equine skin tumours
en
refubium.affiliation
Veterinärmedizin
de
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FUDISS_thesis_000000001901
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http://www.diss.fu-berlin.de/2006/147/
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open access