dc.contributor.author
Holzlöhner, Pamela
dc.date.accessioned
2018-06-07T23:49:10Z
dc.date.available
2009-11-06T08:11:02.143Z
dc.identifier.uri
https://refubium.fu-berlin.de/handle/fub188/11031
dc.identifier.uri
http://dx.doi.org/10.17169/refubium-15229
dc.description.abstract
Bei einem gesunden Menschen herrscht im Darm eine homöostatische Balance, die
dafür sorgt, dass bakterielle und Nahrungsmittelantigene toleriert werden.
Dieser Mechanismus ist bei den chronisch entzündlichen Darmerkrankungen (CED)
unterbrochen. Die resultierende Entzündung scheint T-Zell-abhängig zu sein und
wird durch ein Ungleichgewicht der pro- und anti-inflammatorischen
Immunantwort hervorgerufen. CD44v7 ist ein kostimulatorisches, transmembranes
Oberflächen-molekül. Es konnte bisher gezeigt werden, dass die Deletion von
CD44v7 bzw. der Einsatz von antagonistischen Antikörpern vor der Ausbildung
einer chemisch induzierten Kolitis im Mausmodell schützen. Das Problem der
meisten Tiermodelle ist aber, dass ein spezifisches Antigen nicht definiert
ist. Ziel dieser Arbeit war es daher, ein neues antigen-spezifisches
Kolitismodell zu entwickeln, in dem die immunogenen bzw. tolerogenen
Mechanismen des Darmes untersucht werden können. Dafür wurden DO11.10 (OVA-TCR
positive) TH1-Zellen in kongene Balb/c Wildtyp Mäuse transferiert und 24 h
später intrarektal, im Abstand von zwei Stunden, 50% Ethanol und OVA Protein
in den distalen Dickdarm appliziert. Diese Behandlung wurde 4 Tage später
wiederholt. Tiere, die so behandelt wurden, entwickelten eine OVA-spezifische
Kolitis, die histologisch den pathologischen Befunden bei Morbus Crohn
entsprach. Daneben konnte eine signifikant erhöhte Anzahl OVA-TCR positiver
T-Zellen innerhalb der Lamina propria (LP), sowie eine erhöhte Produktion von
INF-γ durch reisolierte Lamina propria mononukleäre Zellen in Kultur
festgestellt werden. Wurde zwischen den intrarektalen Behandlungen täglich OVA
Protein gefüttert, kam es zu einer Ausheilung der OVA-spezifischen Kolitis.
Dies war begleitet durch die Induktion von Apoptose in Effektor-T-Zellen und
durch eine erhöhte Anzahl an OVA-TCR – FoxP3+ CD4+ T-Zellen innerhalb der LP.
CD44v7-deletierte Mäuse waren vor der Ausbildung der OVA-spezifischen Kolitis
geschützt, wenn sie reine Wildtyp TH1-Zellen transferiert bekamen. Wurden
zusätzlich dazu Wildtyp Makrophagen transferiert, kam es zur Ausbildung der
Kolitis. Keine Unterschiede konnten bei der Verwendung von CD44v7-/- OVA-TCR
pos. TH1-Zellen im Vergleich zu DO11.10 TH1-Zellen festgestellt werden. Nach
Transfer beider Zelltypen konnte in Balb/c Wildtyp Mäusen sowohl eine OVA-
spezifische Kolitis ausgebildet werden als auch diese durch zusätzliche
Fütterung mit OVA Protein unterbunden werden. Es ist daher zu vermuten, dass
die Expression von CD44v7 auf Makrophagen aber nicht auf T-Zellen eine
entscheidende Rolle bei der Ausbildung der OVA-spezifischen Kolitis spielt. In
der vorliegenden Arbeit wurde eine neue Methode zur Induktion einer antigen-
spezifischen Kolitis etabliert, die schnell reproduzierbar und einfach zu
handhaben ist. Sie bietet damit eine neue Möglichkeit, die tolerogenen und
immunogenen Mechanismen innerhalb des Darmes zu untersuchen. Dabei kann auch
die Verwendung von knock-out Tieren und der Einsatz therapeutischer Mittel
berücksichtigt werden.
de
dc.description.abstract
The healthy human organism shows a homeostatic balance within the cut which
tolerates bacterial antigens or antigens derived from dietary sources. In
inflammatory bowle disease (IBD) this mechanism is disrupted. The resulting
inflammation seems to be T cell dependent and is caused by a disbalance of the
pro- and anti-inflammatory immune response. CD44v7 is a costimulatory
transmembran surface molecule. So far it could be shown, that the deletion of
CD44v7 or the use of an antagonistic antibody protects from the development of
a chemical induced colitis in mouse. The problem with most animal models is
that the antigen is not defined. Aim of this thesis was to establish a new
antigen-specific colitismodel to investigate the immunogenic and tolerogenic
mechanism within the colon. Therefore, DO11.10 (OVA-TCR positive) TH1 cells
were transferred into congenic BALB/c wildtyp mice. 24 h later, 50% ethanol
and, 2 hours later, OVA protein was intrarectally applied in the distal colon.
This was repeated at day 4. The mice developed an OVA-specific colitis that
showed the same histological features as patients with Morbus Crohn.
Additionally, a higher percentage of OVA-TCR positive cells could be detected
in the lamina propria (LP). Isolated Lamina propria mononuclear cells show a
higher production of INF-γ when restimulated in culture. Feeding OVA-protein
between the intraluminal treatment leads to an abrogation of the OVA-specific
colitis. This was accompanied with the induction of apoptosis in effector-T
cells and the higher percentage of OVA-TCR – FoxP3+ CD4+ T cells in the LP.
CD44v7-/- mice were protected from the development of an OVA-specific colitis
if they only received wildtyp TH1 cells. If wildtyp macrophages were
additionally transferred, mice developed a severe colitis. No differences
could be observed in the application of CD44v7-/- OVA-TCR pos. TH1 cells or
DO11.10 TH1 cells, respectively. Balb/c mice developed an OVA-specific colitis
which also was abrogated after feeding OVA protein independent of the TH1
celltyp transferred. This result leads to the assumption that the expression
of CD44v7 on macrophages but not on T cells plays an important role during the
development of an OVA-specific colitis. This thesis explores a new approach to
establish an antigen-specific colitis. This new method is easy in handling and
fast to reproduce. It provides an animal model to investigate antigen-specific
immunization versus tolerance in the gut mucosa. Furthermore it provides the
opportunity to investigate the usage of knock-out mice and therapeutic
substances.
en
dc.rights.uri
http://www.fu-berlin.de/sites/refubium/rechtliches/Nutzungsbedingungen
dc.subject
OVA-specific colitis
dc.subject
Inflammatory Bowel Disease (IBD)
dc.subject
oral Tolerance
dc.subject.ddc
500 Naturwissenschaften und Mathematik::570 Biowissenschaften; Biologie
dc.title
Die Rolle von CD44v7 bei der tolerisierenden und immunisierenden Immunantwort
im Darm
dc.contributor.firstReferee
PD Dr. Bianca Wittig
dc.contributor.furtherReferee
Prof. Dr. Kürsad Turgay
dc.date.accepted
2009-10-08
dc.identifier.urn
urn:nbn:de:kobv:188-fudissthesis000000013974-1
dc.title.translated
The role of CD44v7 during tolerating and immunizing immune response
en
refubium.affiliation
Biologie, Chemie, Pharmazie
de
refubium.mycore.fudocsId
FUDISS_thesis_000000013974
refubium.mycore.derivateId
FUDISS_derivate_000000011523
dcterms.accessRights.dnb
free
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open access